大范围疫情中新型冠状病毒抗体免疫城市墙形成的现状调研

陈志芳，曹文玲，邢红娜，刘宏涛，荣 策，杨红云，汪朝晖，康熙雄,

（1.北京爱康国宾白石门诊部检验科，北京 100038；2.北京中检体外诊断工程技术研究中心检验科，北京 100084；3.首都医科大学附属北京天坛医院检验科，北京 100070）

新型冠状病毒感染自2023 年1 月起，由“乙类甲管”调整为“乙类乙管”，这是我国新型冠状肺炎疫情防控政策的一次重大调整。北京疫情已过感染高峰期，整体人群在免疫能力方面已构建新的能力。近日，临床对于新型冠状病毒康复者体内是否含有大量中和抗体极其关注，北京爱康国宾白石门诊部体检推出了感染新型冠状病毒康复者体检套餐，套餐中包括了总抗体、免疫球蛋白M（IgM）抗体、免疫球蛋白G（IgG）抗体。本文以2022 年12 月至2023 年2 月在爱康国宾接受感染新型冠状病毒康复者体检套餐的体检者为研究对象，并对该人群体内抗体情况进行梳理，以分析大范围疫情中新型冠状病毒抗体免疫城市墙形成的现状，现将研究结果详细报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2022 年12 月至2023 年2 月石家庄、贵阳、北京、烟台、潍坊、海口、银川、南京、西安、深圳、镇江、广州、上海、青岛等37 个城市接受感染新型冠状病毒康复者体检套餐中新型冠状病毒特异性抗体3 项检测的体检者，共61 804 例的体检结果，进行回顾性分析。其中男性34 883 例，女性26 921 例；年龄12～86 岁，平均（39.19±11.54）岁。诊断标准：参照《新型冠状病毒肺炎防控方案（试行第十版）》[1]中新型冠状病毒感染的诊断标准。纳入标准：体检时自述症状，出现发热、咳嗽乏力等，其中90%以上在家自测抗原为阳性。排除标准：无相关临床症状且近期未行抗原自测。本研究全部为脱敏数据，已经爱康集团伦理委员会申请伦理审批通过，批准编号：20230420。

1.2 方法61 804 例受检者均进行IgG 抗体检测，其中21 830 例受检者进行IgM 抗体检测；12 463 例北京地区受检者进行新型冠状病毒特异性总抗体检测，并对3 种新型冠状病毒特异性抗体检测结果COI 值进行定量资料统计分析。3 种抗体的检测均使用全自动化学方法免疫分析仪（厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，型号：Caris200），IgM 抗体（捕获法方法），IgG 抗体（间接法方法），总抗体（双抗原夹心法），所用试剂为专用仪器配套的试剂盒，结果以S/CO 比值表示，单位为COI，其中S 值为化学发光免疫分析仪（厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，型号：Caris200）测量血清样本产生的化学发光反应信号检测值，CO 值为仪器通过校准品发光值计算出的临界值，即Cut-Off 值。S/CO＜1 COI 为阴性，S/CO ≥ 1 COI 为阳性。

3 种抗体检测试剂为定性试剂，校准品和质控品为企业参考品，因此，3 种抗体检测结果的S/CO（COI）值无比例关系。①总抗体S/CO（COI）：通过发光仪对校准品1 和校准品2 行3 次检测，取相对发光值（RLU）的平均值，计算CO 值。CO 值=校准品1 的平均RLU 值×1+校准品2 的平均值RLU 值×0.3，总抗体的S/CO（COI）=RLU/CO。②IgM、IgG 抗体S/CO（COI）：通过发光仪对阴性质控品和阳性质控品行3 次检测，取RLU 的平均值，计算CO 值。CO=阴性质控品的RLU 平均值+阳性质控品的RLU 平均值×校准系数（置于试剂二维码中，加载试剂时，仪器会自动扫描二维码并获取校准信息，得到校准系数值），IgM、IgG 抗体S/CO（COI）=RLU/CO。

1.3 观察指标①分析3 种新型冠状病毒特异性抗体阳性检出情况。②分析3 种抗体在不同性别受检者中的阳性检出情况。③分析3 种新型冠状病毒特异性抗体在不同年龄受检者中的阳性检出情况。④分析北京地区12 463 例体检者新型冠状病毒特异性总抗体S/CO 值随感染时间推移的变化情况。⑤分析北京地区12 463 例体检者3 种新型冠状病毒特异性抗体COI 值检测结果。

1.4 统计学方法使用Excel 录入数据，用SPSS 27.0 统计学软件分析，正态分布及近似正态分布的计量资料以(±s)表示，组间比较采用t检验；非正态分布计量资料采用[M（P25， P75）]表示；计数资料（阳性率）采用[ 例(%)]表示，两组间比较行χ2检验，多组间比较采用χ2趋势分析。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 种新型冠状病毒特异性抗体阳性检出情况总抗体的阳性率为97.91%，IgG 抗体的阳性率为95.97%，IgM 抗体的阳性率为11.97%，见表1。

表1 3 种新型冠状病毒特异性抗体阳性检出情况

2.2 3 种新型冠状病毒特异性抗体在不同性别受检者中的阳性检出情况3 种抗体阳性率比较，男性均显著高于女性，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表2。

表2 3 种新型冠状病毒特异性抗体在不同性别受检者中的阳性检出情况

2.3 3 种新型冠状病毒特异性抗体在不同年龄受检者中的阳性检出情况总抗体阳性率随年龄升高而略有降低，但差异无统计学意义（P＞0.05），IgG 抗体的阳性率随年龄升高而降低，但IgM 阳性率则随年龄升高而升高，且差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表3。

表3 新型冠状病毒特异性3 种抗体在不同年龄分组中的变化(%)

2.4 北京地区12 463 例体检者新型冠状病毒特异性总抗体S/CO 值随感染时间推移的变化情况从国家疾控官方网站查找北京地区每日新发病例数（2022 年12 月3 日至12 月15 日），结果显示，北京地区新型冠状病毒特异性总抗体S/CO 值在感染的1 个月后（2023 年1 月3 日至1 月15 日北京爱康国宾白石门诊部北京区域一共检测新型冠状抗体12 463 例）均维持在1 000 COI 以上，且波动不明显，基本可维持较高的水平，见表4、图1。

图1 北京地区12 463 例体检者新型冠状病毒特异性总抗体S/CO 值随感染时间推移的变化情况

表4 北京地区12 463 例体检者新型冠状病毒特异性总抗体S/CO 值随感染时间推移的变化情况

2.5 北京地区12 463 例体检者3 种新型冠状病毒特异性抗体研究值检测结果总抗体S/CO 为（1 367.88±533.63） COI；IgG 抗体S/CO 为（18.96±6.42） COI；IgM抗体S/CO 为[0.19（0.1，0.45）]COI；其中总抗体S/CO（COI） ≥ 320 的受检者占比为90.62%， ≥ 1 000 的受检者占比为82.90%；IgG 抗体S/CO（COI） ≥ 10 的受检者占比为89.84%，IgM 抗体S/CO（COI） ≥ 1 的受检者占比为12.90%，见表5。

表5 北京地区12 463 例体检者3 种新型冠状病毒特异性抗体S/CO 值检测结果

3 讨论

2022 年6 月，颁布的《新型冠状病毒肺炎防控方案（第九版）》[2]中：新型冠状病毒血清抗体检测可对核酸检测进行有益补充，降低核酸漏检概率，也可对接种疫苗的有效性进行判断。感染或接种新型冠状病毒疫苗后，机体产生相关抗体：IgM 抗体多在感染3～5 d 后出现阳性；IgG 抗体多在感染10～15 d 时产生，可长时间存在。《新冠病毒感染诊疗方案（试行第十版）》中指出：新型冠状病毒感染者血清学检测中，IgM、IgG 抗体阳性。

《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第九版）》中曾对IgM 和IgG 抗体的检测方法学作出描述：由于试剂本身阳性判断值原因，或体内存在干扰物质，抗体检测可能会出现假阳性。为更准确反映感染新型冠状病毒康复者人群体内抗体的真实水平，本研究增加了总抗体检测。总抗体检测采用双抗原夹心方法，其相较于捕获法和间接法有如下优势：①可同时检测包括IgM、IgG、免疫球蛋白A（IgA）等抗体[3]；②抗原抗体双侧特异性反应，减少因特异性结合引起的假阳性；③由于反应抗干扰性强，可使用更高浓度的包被抗原和标记抗原，加上提高加样量至50 μL，进而提高灵敏度。此外，疫苗相关研究显示，总抗体检测采用刺突蛋白S-RBD 抗原原料，可反映疫苗接种后身体全部抗体情况[4]。《新型冠状病毒实验室检测专家共识》[5]中也提出：多种类型的抗体联合检测可提高检出率。既往国内外研究中也显示总抗体检测灵敏度和特异性较高[6-7]，其可反映体内接触新型冠状病毒后全部抗体的情况，所以将总抗体检测也纳入研究。

《新冠肺炎康复者恢复期血浆临床治疗方案（试行第三版）》中，新型冠状病毒血清/血浆总抗体定性检测呈阳性且320 倍稀释后按照试剂说明书要求检测仍为阳性反应，才满足捐献血浆条件。可采用酶联免疫吸附实验或化学发光法检测。化学发光平台检测的总抗体采用夹心法（S/CO ≥ 1 COI 为阳性），灵敏度更高，S/CO 检测结果可能与体内抗体水平相关性更佳[8]。

本研究中61 804 例体检人群（多数为感染新型冠状病毒康复者人群）的样本，结果显示：①总抗体的阳性率为97.91%，IgG 抗体的阳性率为95.97%，可能说明感染新型冠状病毒康复后人群体内基本上都产生了抗体。总抗体检测阳性率高于IgG 抗体，且其S/CO（COI）检测结果会随着体内抗体水平的升高而升高，反映体内抗体产生的情况，具有极大的参考价值。②分析不同性别人群3 种抗体的检测情况发现：男性体检人群的总抗体、IgG 抗、IgM 抗体阳性率均显著高于女性，提示在接触新型冠状病毒后，男性人群的身体的免疫反应可能高于女性。相关研究发现，新型冠状病毒感染对免疫系统的影响与个人的性别有关，感染恢复后的男性通常比感染恢复后的女性表现出更强的免疫反应[9-10]。③分析不同年龄人群3种抗体的检测情况发现：总抗体阳性率随年龄升高而略有降低，但差异无统计学意义，IgG 抗体的阳性率随年龄升高而降低，但是IgM 抗体则随年龄升高IgM 阳性率升高，且差异均有统计学意义。对于如上结果，可能是由于，一方面，因机体免疫功能随年龄增长而降低；另一方面可能是由于老年人群外出活动或者社交没有年轻人活跃，感染或者接触到病毒较年轻人晚，所以抗体产生也晚于年轻人。④根据国家疾控官网上查找的2022 年12 月3 日至12 月5 日的北京地区新型冠状发病例数，结合2023 年1 月3 日至1 月15 日在北京爱康国宾白石门诊部体检者的总抗体检测平均值的变化发现，新型冠状病毒感染1 个月后，感染新型冠状病毒康复者人群基本上体内维持着较高水平的抗体。国家疾控官网1 月25 日通报新型冠状疫情全国核酸阳性和抗原阳性峰值在12 月22 日，北京的第一高峰在12 月上旬。北京地区这一样品采样的时间段正好吻合在北京疫情12 月上旬第一高峰后的3～4 周，反映了该病毒株具有很强的免疫原性，以及本次受检人群具有很强的抗体免疫的反应力。

本研究通过检测3 种新型冠状病毒特异性抗体，真实准确地显现了接触新型冠状病毒后身体内抗体产生的情况。由于北京地区纳入研究的12 463 例体检者有具体的S/CO（COI）数值结果，因此仅对北京地区新型冠状病毒特异性总抗体、IgG 及IgM 抗体的S/CO 值检测结果进行分析，结果显示，总抗体S/CO 为（1 367.88±533.63）COI；IgG 抗体S/CO 为（18.96±6.42）COI；IgM 抗体S/CO 为[0.19 （0.1，0.45）]COI ；其中总抗体S/CO ≥ 320 COI的受检者占比为90.62%，≥ 1 000 COI 的受检者占比为82.90% ；IgG 抗体S/CO ≥ 10 COI 的受检者占比为89.84%，IgM 抗体S/CO ≥ 1 COI 的受检者占比为12.90%，由此可见，新型冠状病毒感染1 个月后，总抗体及IgG 抗体均为较高水平，对新型冠状病毒有一定的抵抗力，IgM 抗体阳性率为12.90%，说明仍存在一定数量的人群正在经历新型冠状病毒感染。

综上，对于2022 年12 月至2023 年2 月期间体检人群，多数为感染新型冠状病毒康复者人群，3 种新型冠状病毒特异性抗体的检测可以更清晰、准确地显示体内抗体产生的情况，95%以上的受检者体内产生了抗体；其中北京地区抗体检测结果显示大多数为高水平抗体指数，提示北京地区受检者对本次疫情相关病毒株区域性高强度体液免疫墙已形成，也反映了女性及老年人群免疫反应力相对较低的特征。后续如能做动态连续观察，可能对抗体的变化情况会有更深入的了解，更利于采取个性化方案来防控感染。