CO2点阵激光联合他克莫司治疗白癜风患者的疗效及对氧化应激、Treg细胞的影响

于 岚 湖北江汉油田总医院皮肤性病科,湖北省潜江市 433124

白癜风是一种局部表皮功能性黑素细胞减少而出现局限性不规则性皮肤白斑的疾病,其皮损可发生在任何部位,严重影响患者容貌和心理健康。目前,白癜风病因及发病机制尚未完全阐明,缺乏有效根治手段。近年来研究发现[1],白癜风与氧化应激有关,氧化应激是黑素细胞发生损伤的初始环节,且应激启动会进一步诱导自身免疫损伤。Treg细胞是一类调节体内自身免疫反应的T细胞亚群,其数目或功能异常会导致患者免疫失衡,使自身正常存在的黑素细胞被攻击、杀灭而出现皮肤色素脱失,导致白斑形成。CO2点阵激光是一种常见的激光治疗方法,通过光热作用可激活毛囊外根鞘中静止的黑素细胞或黑素前体细胞,并促使成熟黑素细胞向白斑处移行,使皮损处得以复色。他克莫司是一种钙调磷酸酶抑制剂,通过抑制T细胞活化来治疗免疫相关性皮肤病,是我国指南[2]推荐用于治疗白癜风的重要药物之一。研究表明,CO2点阵激光联合他克莫司治疗白癜风疗效确切、患者依从性高,且并发症少。但较少有研究报道CO2点阵激光联合他克莫司治疗对白癜风患者氧化应激及Treg细胞的影响。基于此,本文在观察CO2点阵激光联合他克莫司对白癜风患者疗效的同时,进一步探讨其对氧化应激及Treg细胞的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2021年3月—2022年2月在我院皮肤科就诊并确诊为白癜风的80例患者为观察对象。纳入标准:(1)符合白癜风的诊断标准[3];(2)病程<1年;(3)处于疾病稳定期(近6个月未出现新皮损,原有皮损也无明显扩大);(4)近1个月无糖皮质激素治疗、其他免疫治疗及光疗史;(5)皮损面积≤身体面积的10%,且排除眼睑、生殖器皮损;(6)年龄≥16岁。排除标准:(1)合并其他自身免疫性疾病或皮肤疾病,如甲亢、光敏性疾病;(2)妊娠或哺乳期女性;(3)合并严重心、肝、肾、脑疾病及皮肤肿瘤者;(4)对他克莫司过敏者,不能耐受激光治疗者。剔除标准:自行终止治疗、不能按时随诊或失访者。按照随机数字表法将患者随机分为对照组和观察组,每组40例,对照组有2例失访,观察组有1例自行退出。最终,对照组38例,观察组39例。两组性别、年龄、病程等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。本研究经医院伦理委员会审批,所有患者均签署知情同意书。

表1 两组一般资料比较

1.2 治疗方法 对照组实施他克莫司治疗:患者皮损处每日早晚外用他克莫司软膏(浙江万晟药业有限公司,国药准字H20133243,10g∶10mg,0.01%),将本品均匀涂于白斑处,轻轻擦匀,2次/d。观察组在对照组基础上联合CO2点阵激光治疗:先用5%复方利多卡因乳膏在白斑处进行表面麻醉,用75%酒精消毒,干后采用CO2点阵激光治疗仪(成都国雄,JZ-2)进行治疗。治疗参数依据患者皮损部位设置:波长10 600nm,脉宽10～20ms,能量密度30～60mJ/cm2,覆盖率25%,每4周治疗1次,3次为1个疗程。两组均治疗24周。

1.3 观察指标 (1)临床疗效:疗效评价标准:痊愈,皮损完全恢复至正常肤色;显效:复色面积≥50%;好转:10%≤复色面积<50%;无效:复色面积<10%、无复色或皮损范围扩大。总有效率=(痊愈+有效)例数/总例数×100%。(2)两组氧化应激指标比较:分别于治疗前后采集患者空腹静脉血5ml,经离心后取得上层血清,按照试剂盒说明测定血清中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。(3)两组Treg细胞数量及相关细胞因子水平比较:分别于治疗前后取患者空腹静脉血7ml,2ml置于普通离心管中经3 000r/min离心后取上层清液保存于-80℃冰箱待检。余下血样置于EDTA抗凝管中,用流式细胞术检测Treg细胞数量。采用酶联免疫吸附法检测Treg细胞及相关细胞因子叉头框蛋白P3(Foxp3)水平。(4)比较两组并发症发生情况。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较 观察组临床总有效率为82.05%,高于对照组的60.53%(χ2=4.370,P=0.037<0.05)。见表2。

表2 两组临床疗效比较[n(%)]

2.2 两组氧化应激指标比较 治疗前,两组MDA、SOD及GSH-Px无显著差异(P>0.05)。治疗后,两组MDA均下降,且观察组低于对照组(P<0.05);两组SOD及GSH-Px均上升,且观察组高于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 两组氧化应激指标比较

2.3 两组Treg细胞及相关细胞因子比较 治疗前,两组Treg细胞及Foxp3水平无显著差异(P>0.05);治疗后,两组Treg细胞及Foxp3水平均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。见表4。

表4 两组Treg细胞及Foxp3水平比较

2.4 两组并发症发生情况比较 两组并发症总发生率无显著差异(P>0.05)。见表5。

表5 两组并发症发生情况比较[n(%)]

3 讨论

白癜风是一种后天性色素脱失性皮肤病,表现为皮肤局限性或广泛性色素脱失形成白斑。白癜风的病因及发病机制虽未完全阐明,但大多数研究认为[4],其与自身免疫、遗传、黑素细胞自身毒性、酪氨酸缺乏等相关。虽然白癜风诊断较为容易,但尚缺乏特异性治疗,且此病易反复发作。目前,白癜风治疗的主要目标是延缓疾病发展,并采取有效措施促进脱色部位尽快复色。CO2点阵激光+他克莫司软膏是近年来治疗白癜风的新方法,本文采用这一联合方案治疗白癜风,发现比他克莫司单独使用效果更好。

本文中,观察组总有效率高于对照组,由此表明,CO2点阵激光联合他克莫司治疗白癜风的疗效优于他克莫司单独使用。他克莫司是一种外用的免疫抑制剂,其通过抑制钙调磷酸酶活性而阻止特异性免疫细胞对黑素细胞的破坏,促进黑素细胞生长成熟,并迁移至色素脱失部位,致使白斑复色。CO2点阵激光运用其局部光热效应,可促进治疗局部血液循环,且特定激光会形成微治疗区,促进他克莫司的透皮吸收而增强其效果。同时,CO2点阵激光的光热效应还会促进各种细胞因子的释放,进而刺激白斑周边、基底层等处于静止状态的黑素前体细胞活化、增殖、成熟,并向色素脱失处迁移促进复色。因此,对白癜风患者联合使用CO2点阵激光可显著提高临床疗效。许教雄等[5]的研究也表明这一观点。

研究认为[6],黑素细胞较其他表皮细胞更易出现氧化应激,原因是黑素细胞除了在紫外线照射时产生活性氧(ROS),还会在自身黑素合成过程中产生大量的ROS。未及时清除ROS会攻击黑素细胞,干扰黑素细胞正常分化、成熟;此外,氧化应激还会导致黑素细胞合成过程中的中间毒性产物增加,引起黑素细胞免疫损伤。白癜风患者血清中氧化—抗氧化失衡,而监测MDA、SOD及GSH-Px等抗氧化物酶可反映机体氧化—抗氧化状态。本文中,相较于对照组,治疗后观察组MDA更低,SOD及GSH-Px更高。由此表明,对白癜风患者实施CO2点阵激光联合他克莫司治疗可显著减轻其氧化应激损伤。原因是他克莫司可阻断黑素细胞损伤,促进黑素细胞再生,而CO2点阵激光可促进治疗部位血液循环及各种细胞因子分泌,提高疗效,减轻氧化应激。

Treg细胞是CD4+细胞的一个亚群,其在免疫平衡中起免疫调节与免疫监视作用。Foxp3是Treg细胞的特异标志物与关键转录因子,其是Treg细胞增殖分化中的关键因子。Treg细胞数量减少或功能缺陷与白癜风密切相关。研究发现[7],白癜风患者外周血中Treg细胞数量明显少于正常人。也有研究报道[8],白癜风患者血清中Foxp3水平明显低于正常人。本文中,相较于对照组,治疗后观察组Treg细胞数量及Foxp3水平均更高。此与上述结果一致,由此表明对白癜风患者实施CO2点阵激光联合他克莫司治疗能提升Treg细胞数量及Foxp3表达水平,进而改善患者免疫调节。分析原因是联合治疗能增强抗氧化、抑制免疫反应、促进黑素细胞增殖等多个环节的作用,进而提高机体Treg细胞数量及Foxp3水平。本文中,两组并发症总发生率并无显著差异,且多表现较轻微,给予对症处理后好转。由此表明,联合治疗并不会增加不良反应,是安全可行的。

综上所述,对白癜风患者实施CO2点阵激光联合他克莫可减轻白癜风患者氧化应激,提高Treg细胞数量,在不增加并发症的情况下,对白癜风有较好的治疗效果。