梅花鹿活体麻醉采血试验研究

●崔鹤馨 田来明 尚丽元 孙兴忠 刘沂霖 苑冬梅 呼延含蓉 陈 琦 李 男 付晓霞

（1.吉林省畜牧兽医科学研究院 吉林 长春 130021；2.吉林省动物疫病预防控制中心 吉林 长春 130021；3.长春市农业科学院 吉林 长春 130111）

梅花鹿是珍贵的国家一级保护动物，不仅具有极高的经济价值和观赏价值，其营养价值和药用价值也备受关注。近年来人们对鹿血制品的研发较为活跃，以鹿血为原料的药品和保健品种类众多[1]。鹿血自古以来被视为滋补上品，其营养成分和药理作用与鹿茸大同小异[2]，但更趋于广谱性。现代临床及动物实验均证明，鹿血具有增强免疫功能、抗疲劳、抗辐射、治疗贫血、改善性功能、促进伤口愈合等多种功效[3]。生产用鹿血主要依靠锯茸和屠宰鹿只时获取，采集时间和采集量严格受限，导致鹿血资源匮乏，价格昂贵。梅花鹿活体采血是解决生产中鹿血可持续采集利用的有效途径，对其开展试验研究，为科学合理地进行活体采血提供技术依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 梅花鹿由吉林省博文鹿业良种繁育有限公司提供。选择公鹿3头，年龄2～7锯，平均体重（100±0.5） kg；选择母鹿3头，2～6产，平均体重（75±0.5） kg。健康无病，营养均衡，精神状态良好。

1.2 试验药品 麻药眠乃灵、解药苏醒灵均购自吉林省华牧动物保健品有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 试验设计 公鹿和母鹿各1组，公鹿组采血量600 mL/头，母鹿组采血量500 mL/头。

1.3.2 血液采集和保存 按每100 kg体重用麻药0.1～0.3 mL的标准，以麻醉枪或吹管方法将药液直接注入梅花鹿肌肉，麻醉后使其侧躺，观察心跳、呼吸及眼球转动是否正常。应用16～20#针在鹿只的颈静脉或胫前静脉处采血，无菌收集血液于预先注入枸橼酸钠抗凝剂的采血袋。采血完成后，立即给鹿只补充等量的5%～10%葡萄糖水或生理盐水。待鹿苏醒，自行站起，方可离开采血地点。血液短期低温保存，长期需冷冻保存，防止腐败变质。

1.3.3 采血前后血液指标的测定 采血当日计为0 d，于采血后0，10，20，30，40 d，采用日本Sysmex 公司的F820血球计数仪分别测定鹿血液的红细胞数（RBC）、红细胞压积（HCT）和血红蛋白（HGB）。以梅花鹿采血0 d的各血项指标的平均值作对照。

2 结果与分析

2.1 公鹿活体采血不同时间血液指标及恢复情况

表1为成年公鹿血液正常指标，平均红细胞数（RBC）8.39×1012/L、红细胞压积（HCT）0.461、血红蛋白（HGB）123 g/L。表2为公鹿采血后10，20，30，40 d血液指标，发现成年公鹿采血30 d后机体基本恢复至采血前水平，红细胞数（RBC）恢复至99.1%，红细胞压积（HCT）恢复至100.6%，血红蛋白（HGB）恢复至100.9%；采血40 d后红细胞数（RBC）恢复至采血前的101.5%，红细胞压积（HCT）恢复至104.6%，血红蛋白（HGB）恢复至102.7%，均超过采血前机体水平。

表1 公鹿活体采血正常血液指标

表2 公鹿活体采血后不同时间血液指标及恢复情况

2.2 母鹿活体采血不同时间血液指标及恢复情况

表3为成年母鹿血液正常指标，平均红细胞数（RBC）8.01×1012/L、红细胞压积（HCT）0.443、血红蛋白（HGB）126 g/L。表4为母鹿采血后10，20，30，40 d血液指标，发现成年母鹿采血30 d后机体基本恢复至采血前水平，红细胞数（RBC）恢复至98.8%，红细胞压积（HCT）恢复至102.5%，血红蛋白（HGB）恢复至100.8%，红细胞数（RBC）基本恢复至采血前水平，红细胞压积（HCT）和血红蛋白（HB）均超过采血前水平；采血40 d后红细胞数（RBC）恢复至采血前的103.7%，红细胞压积（HCT）恢复至105.2%，血红蛋白（HB）恢复至103.2%，均超过采血前机体水平。

表3 母鹿活体采血正常血液指标

表4 母鹿活体采血后不同时间血液指标及恢复情况

3 讨论

3.1 采血量的确定

梅花鹿活体采血量取决于体循环中的血液总量，即血液总量越大，活体采血量就越大，一次性采血量达到20%就可导致梅花鹿出现生理应激、休克甚至死亡。清华大学实验动物中心的动物采血基本原则规定，动物血液收集的单次最大量不能超过动物全身血液总量的10%。一般动物的血液量占活体体重的7%～8%，张建波等[4]通过屠宰鹿只取血量的统计，得出公鹿血量为其体重的8.57%～9.17%，母鹿血量为其体重的7.5%～8.75%，略高于平均数据，这可能与梅花鹿年龄、体重、性别、健康、营养状况、放血方式不同有关。为了动物健康考虑，采血量应该选取推荐量的下限，因此本研究按照血量占比体重7%计算：公鹿平均体重100 kg/头，单次最大采血量600 mL/头；母鹿平均体重75 kg/头，单次最大采血量500 mL/头。

3.2 采血间隔时间的确定

对梅花鹿进行活体采血，除血容量减少，血液中的红细胞数、血红蛋白量和红细胞压积也会发生相应的变化，血液指标能客观反映机体的健康水平。张建波等[4]认为一次性采血600 mL/头，间歇期15 d对产茸量、机体的食欲精神均无影响。一般采血后失去的水分和无机盐2 h内可得以恢复，蛋白质、白细胞和血小板3 d内也可恢复，恢复较慢的是红细胞，因此采血间隔时间主要取决于红细胞更新率，即红细胞更新越快，采血间隔时间越短。赵宝华等[5]报道梅花鹿一次性采血200～250 mL/头后，需间隔30 d，血项指标得以恢复。李树明等[6]报道对梅花鹿一次性采血500 mL/头后血液生理生化各指标显著下降，40～50 d后基本恢复至采血前正常水平。本研究分别对公鹿一次性采血600 mL/头、母鹿一次性采血500 mL/头后，对不同时间的红细胞数（RBC）、红细胞压积（HCT）和血红蛋白（HGB）进行测定，发现30 d后机体基本恢复至采血前水平，与上述报道结果存在差异，这可能与个体差异和营养水平有关。

3.3 采血后的营养供给

采血后为尽快恢复梅花鹿机体水平，不影响其生长性能，应及时补充水分，加强蛋白质、维生素、无机盐、微量元素（铁、铜、锌等）和叶酸等的摄入量。采血后，鹿只饲料中的蛋白质占比应提升5%，同时每头鹿每天饲喂0.1 kg豆浆，食盐量比平时高5 g，维生素和微量元素比平时量提高1%。

3.4 注意事项

出现麻醉过敏时，应停止采血，按麻醉药品说明书剂量注射苏醒药并同时肌注肾上腺素；采血过程中，速度不宜过快，剂量不宜过大，当出现异常时，如鹿只呼吸急促、心跳加速或眼球转动加快等，应停止采血并马上注射苏醒药和肾上腺素；若采血造成采血部位肿胀，应及时处理消肿散瘀；采用麻醉保定方式采血的鹿只苏醒后不应立即采食，应隔顿饲喂；麻醉后出现鹿只不采食现象，应驱赶其加强运动，同时注射促消化药物。

4 结论

梅花鹿公鹿每次采血量按≤6 mL/kg·bw，母鹿每次采血量按体重≤6.67 mL/kg·bw计算，两次采血至少间隔30 d，可维持梅花鹿活体正常机能。