血清Caspase-3、Lp-PLA2水平与突发性耳聋病情严重程度和预后的关系

崔彦儒，高伟，郑艳秋

内蒙古医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科，呼和浩特 010059

突发性耳聋（SD）是指72 h内突然发生，没有可识别原因，且至少两个相邻频率听力下降≥20 dBHL的感音神经性听力损失，可伴有头晕、耳鸣、耳胀等不适感［1］。近年来，SD发病率呈上升趋势，尽管SD具有自愈倾向，但部分患者恢复程度不一，可能出现不可逆的听力损失，影响患者生活质量［2］。研究表明，耳蜗细胞凋亡和炎症反应参与SD发生、发展［3］。半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）是一种通过裂解细胞脱氧核糖核酸促进细胞凋亡的蛋白酶［4］。据报道，Caspase-3在顺铂诱导的耳聋小鼠耳蜗组织内表达上调［5］。脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）是一种磷脂酶，能水解氧化磷脂参与炎症反应［6］。Lp-PLA2基因多态性与SD有关［7］。本研究探讨血清Caspase-3、Lp-PLA2水平与SD病情严重程度和预后的关系，以期为SD防治提供参考。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年1月—2022年8月我院收治的100例SD患者（SD组），其中男59例、女41例，年龄20～81（49.46 ± 13.63）岁；体质量指数18.70～28.43（22.36 ± 1.73）kg/m2；症状：耳鸣86例、晕眩31例、耳胀27例；听力曲线分型［8］：低频下降型33例、高频下降型26例、平坦下降型33例、全聋型8例。纳入标准：①符合《突发性聋诊断和治疗指南（2015）》［8］诊断标准；②年龄≥18岁；③单耳SD。排除标准：①合并偏头痛、梅尼埃病、传导性听力损失、慢性中耳炎、听觉创伤等其他耳部疾病；②先天遗传聋或耳科手术史；③近期急慢性感染或既往心力衰竭、中风；④合并造血系统、免疫系统、神经系统损害、严重心肝肾功能损害、恶性肿瘤；⑤近3个月有免疫抑制剂、抗生素使用史；⑥复发性SD。参考全球疾病负担听力损失专家组定义［9］将SD患者分为轻度听力损失20例［纯音平均听阈（PTA）：20～40 dB‐HL］、中度听力损失43例（PTA：41～60 dBHL）、重度听力损失25例（PTA：61～80 dBHL）、极重度听力损失12例（PTA：>81 dBHL）。SD患者均参考指南［8］根据不同听力损失情况接受治疗，并根据临床疗效分为预后不良（无效）38例（预后不良组）、预后良好（痊愈+显效+有效）62例（预后良好组）。另选取同期60例体检健康且听力正常者为对照组，其中男35例、女25例，年龄18～78（50.14 ± 10.75）岁；体质量指数18.53～26.87（22.42 ± 1.62）kg/m2。两组一般资料比较差异无统计学意义（P均>0.05）。患者及家属对本研究知情并签署同意书，且经医院伦理委员会批准（审批编号：2019-0243）。

1.2 血清Caspase-3、Lp-PLA2检测 收集SD组入院后次日和对照组体检时采集3 mL静脉血，3 000 r/min离心15 min（离心半径10 cm），取上层血清，采用酶联免疫吸附法（北京百奥莱博科技有限公司，编号：ZN2053-OJR、ZN2369-LZH）检测Caspase-3、Lp-PLA2。

1.3 统计学方法 采用SPSS28.0统计软件。计量资料符合正态分布以表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用F检验；不符合正态分布计量资料以M（P25，P75）表示，两组间比较采用U检验，多组间比较采用H检验，组间两两比较采用Bonferroni校正；计数资料以例（%）表示，比较采用χ2检验；Spearman相关性分析SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平与PTA的相关性；多因素Logistic回归分析SD患者预后不良的影响因素；受试者工作特征（ROC）曲线分析血清Caspase-3、Lp-PLA2水平对SD患者预后不良的预测价值。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SD组与对照组血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比较 SD组与对照组血清Caspase-3水平分别为17.32（12.56，21.77）、10.86（9.59，11.44）pg/mL，Lp-PLA2水平分别为（18.36 ± 3.85）、（13.12 ±2.44）ng/mL，SD组血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于对照组（P均<0.05）。

2.2 不同病情严重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比较 轻度、中度、重度、极重度听力损失者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平依次升高（P均<0.05）。见表1。

表1 不同病情严重程度SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平比较

2.3 SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平与PTA的相关性 SD患者PTA为22～96［52.00（44.00，70.00）］dBHL，Spearman相关性分析显示，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平与PTA呈正相关（r分别为0.816、0.848，P均<0.05）。

2.4 SD患者预后不良的影响因素 预后不良组年龄大于预后良好组，PTA、全聋型比例和血清Caspase-3、Lp-PLA2水平高于预后良好组（P均<0.05），见表2。以年龄、PTA、全聋型（是为“1”，否为“0”）、Caspase-3、Lp-PLA2为自变量，预后不良（是为“1”，否为“0”）为因变量。多因素Logistic回归分析显示，年龄增加、PTA升高、全聋型、Caspase-3升高、Lp-PLA2升高为SD患者预后不良的独立危险因素（P均<0.05）。见表3。

表2 预后不良组与预后良好组临床资料比较

表3 影响SD患者预后不良的多因素Logistic回归分析

2.5 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平对SD患者预后不良的预测价值 ROC曲线分析显示，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平联合预测SD患者预后不良的曲线下面积（AUC）大于Caspase-3、Lp-PLA2单独预测（Z分别为3.038、3.174，P均<0.05）。见表4。

表4 血清Caspase-3、Lp-PLA2水平对SD患者预后不良的预测价值

3 讨论

SD是耳鼻喉科的常见急症，男女发病率相似，以单侧发病为主，双侧较少见，目前病因尚不完全明确，多数学者认为与睡眠障碍、生活不规律、情绪波动、压力增加、精神紧张等有关［10］。尽管近年来局部和全身的激素、抗病毒、高压氧、改善血液流变学药物、抗病毒药物、中耳瘘管修补术等治疗方法不断完善，但SD病因不明导致治疗上仍缺乏针对性，使得不同患者预后存在较大差异［11］。因此有必要探索SD相关生物标志物，为SD治疗和预后评估提供理论依据。

SD发病确切机制尚不明确，目前研究认为与炎症反应、病毒感染、内耳微循环障碍、免疫性疾病等密切相关［12］。近年研究发现，耳蜗毛细胞凋亡也参与SD发生、发展，耳蜗毛细胞是听觉感受器，与内耳中管状器官耳蜗中的神经相连，耳毒性药物、炎症、噪声暴露、年龄增长老化等因素均可导致毛细胞不可逆损害，当众多因素引起耳蜗毛细胞凋亡则会阻碍信号传至中枢，导致SD发生［13］。胱天蛋白酶是一组以酶原形式存在于细胞质内并介导细胞凋亡的半胱氨酸蛋白酶，Caspase-3是该家族内介导细胞凋亡的关键执行分子，在细胞凋亡早期被激活，能裂解相应的胞质胞核底物加速细胞凋亡［14］。HAYASHI等［15］实验报道，病毒感染能通过肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体诱导耳蜗毛细胞Caspase-3表达，抑制Caspase-3表达能抑制耳蜗毛细胞凋亡。XIE等［16］实验报道，Caspase-3在脂多糖诱导的豚鼠听力损失模型中大量表达，抑制耳蜗毛细胞内Caspase-3表达能改善豚鼠听力。这些研究均提示Caspase-3与体力损失密切相关。本研究结果显示，SD患者血清Caspase-3水平升高，并随着听力损失程度增加而升高，说明血清Caspase-3水平升高参与SD发生、发展，分析原因可能是SD患者耳蜗毛细胞凋亡导致Caspase-3被释放入血，引起血清Caspase-3水平升。而Caspase-3作为细胞凋亡的关键执行分子，其水平升高加剧耳蜗毛细胞凋亡，导致听力损失加重［14-16］。

炎症反应是SD发生发展的关键机制之一，不仅能直接破坏耳蜗内毛细血管完整性引起听力障碍，还能引起内耳局部组织细胞缺血、缺氧和炎症，通过内耳微循环障碍减少内耳血供，导致听力障碍［17］。Lp-PLA2是巨噬细胞和中性粒细胞等免疫细胞分泌的一种血管特异性炎症因子，能通过其酶活性水解低密度脂蛋白中氧化磷脂，形成氧化游离脂肪酸和溶血卵磷脂等脂类促炎物质，这些物质又能通过趋化炎症细胞生成更多促炎物质，参与炎症发生、发展［18］。近年研究证实，SD的发病机制与心脑血管疾病相似［3］。Lp-PLA2作为血管特异性炎症因子，已被证实与冠心病、脑卒中等心脑血管疾病相关［19］。同时有研究发现，Lp-PLA2基因多态性参与SD发生［7］。本研究结果显示，SD患者血清Lp-PLA2水平升高，并随着听力损失程度增加而升高，说明血清Lp-PLA2水平升高参与SD发生、发展，分析原因可能是SD患者耳蜗炎症反应导致Lp-PLA2升高。Lp-PLA2升高能激活血管壁炎症通路，促进炎症反应，增加耳蜗内毛细血管破坏，导致听力损失加重。同时Lp-PLA2还可能损伤血管内皮导致管腔狭窄或堵塞，可能导致内耳微循环障碍，造成内耳局部组织细胞缺血、缺氧、水肿等，加重听力损失［20］。

本研究通过分析SD患者预后不良影响因素发现，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高为SD患者预后不良的独立危险因素，提示二者可能成为SD患者预后不良的辅助预测指标，分析原因是Caspase-3、Lp-PLA2均参与SD发生、发展，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平升高反映听力损失程度更严重，因此预后更差。本研究结果还发现，年龄增加、PTA升高和全聋型能独立影响SD患者预后，分析原因是随着年龄增长，血管壁顺应性、微循环血液流变学和内耳听觉功能退化，影响听力恢复，因此疗效更差［21］；PTA升高和全聋型反映SD患者听力损失程度更严重，因此预后更差。绘制ROC曲线发现，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平分别为16.82 pg/mL、20.92 ng/mL时，预测SD患者预后不良的AUC分别为0.784、0.780，血清Caspase-3、Lp-PLA2水平联合预测SD患者预后不良的AUC增至0.901，说明血清Caspase-3、Lp-PLA2水平可能成为SD患者预后不良的辅助预测指标，且二者联合能提升预测价值。

综上所述，SD患者血清Caspase-3、Lp-PLA2水平明显升高，与SD患者听力损失加重和预后不良密切相关，可能成为SD患者预后不良的辅助预测指标，且二者联合能提升预测价值。