痛风舒片治疗痛风的作用机制和疗效研究

孙晓慧，马晶，柳杰

哈尔滨市第一医院内分泌科一病房，黑龙江哈尔滨 150001

痛风病变为单钠尿酸盐沉积造成的晶体相关性关节病变，典型诱因为大量食用嘌呤高食物[1]。痛风病变在典型症状表现，一般是可见突然性关节疼痛不适，且关节部位见疼痛、水肿以及炎症，而若是关节腔间尿酸盐大量沉积则造成急性关节疼痛不适，正常生活及工作因此受到巨大影响，所以也强调及早做对应性干预。常规抗痛风药是一类通过抑制尿酸的合成、抑制尿酸在肾小管的重吸收或促进尿酸排泄而产生治疗作用的药物，且在临床应用中存在一定的药物依赖性[2]。急性痛风属于中医学之痹证；其病因病机为肾虚，湿邪阻滞，热毒攻于手足；以湿热蕴结为主要证型；治疗以清热利湿为主，方多为四妙散加减；针灸治疗以循经取穴针刺和局部围刺放血为主；中药外敷多以大黄、黄柏等清热泻火解毒药敷于关节痛处；中医药治疗急性痛风不良反应少。因而中药作为改善患者预后的方法，以痛风舒片为代表的药物，在临床实践中凸显了明显的优势[3]。本文为研究痛风舒片治疗痛风的作用机制和疗效，特选择2022年1—6 月正常成年SD 雄性大鼠40 只进行处理，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料来源

选取正常成年SD 雄性大鼠，清洁级，共40 只，体质量180～265 g，平均（220±20）g。均给予普通的饲料喂养，自由饮水。本研究经动物伦理委员会的批准（伦理号：HJ28415365）。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂 痛风舒片（国药准字Z20080410；规格：0.3 g×12 片×2 板）；双氯芬酸钠肠溶片（国药准字H11021640；规格：25 mg×30 片）；5-羟色胺（5-HT）、钾离子（K+）、多巴胺（DA）、去甲肾上腺素标准品及尿酸钠结晶均购自Sigma 公司。

1.2.2 尿酸溶液制备 194 mL 蒸馏时加6 mL NaOH（1 mol∕L），在煮沸后加入1 g 的尿酸，使用1 mol∕L HCL，调节pH 值为7.2，充分搅拌后冷却，之后贮藏到4℃冰箱中保存24 h，获取上清液借助滤纸吸干沉淀物的水分，充分干燥后获得尿酸钠结晶。取1 250 mg 尿酸钠结晶加45 mL 生理盐水，加热搅拌配制成50 mL 尿酸钠溶液。

1.2.3 动物分组 实验小鼠分成正常组（不做任何处理）、模型组（用6 号注射针在受试大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌肌腱内侧，将0.2 mL尿酸钠溶液，浓度为2.5 g∕100 mL，注入踝关节腔）、双氯芬酸组（用6 号注射针在受试大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌肌腱内侧，将0.2 mL 双氯芬酸溶液注入踝关节腔）、痛风舒片组（用6 号注射针在受试大鼠右侧踝关节背侧从45°方向插入胫骨肌肌腱内侧，将0.2 mL 痛风舒片同1 mL 生理盐水混合液注入踝关节腔），每组10 只。选取模型动物，主要是在关节周围，见软组织的明显充血∕水肿表现，关节滑膜细胞，见线粒体、内质网细胞器肿胀表现，将其判定顺利完成造模工作。尿酸钠（Sodium urate， MSU）可诱导巨噬细胞高表达MRP8；MRP8 siRNA 转染能有效干扰巨噬细胞中髓样相关蛋白8（MRP8）的表达。

1.2.4 尿酸水平、大鼠步态测定 通过体外细胞模型筛选中药提取物及标准品对MSU 刺激的体外急性痛风模型的抗炎作用；通过超高效液相色谱-质谱∕质谱（UPLC-MS∕MS）的方法监测黄嘌呤氧化生成尿酸的含量，反应中药提取物及标准品对XOD 的抑制作用。以痛风舒片的有效成分为测定指标，采用体外扩散池法，利用新鲜大鼠离体皮肤，分别于透皮的1、2、3、4 h 采取5 mL 接受液。用TLC 定性法及薄层扫描定量法测定内含的桂皮醛是可以透过大鼠皮肤的，其量随给药时间延长而增多。

1.3 观察指标

①借助分光光度仪分析法，分析巨噬细胞中髓样相关蛋白8（myeloid associated protein 8 in macrophages, MRP8）对核因子κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）的影响，以图示予以对比。②关节肿胀测量。干预前及干预后5 d，借助无弹性软尺测定关节周径，观察治疗前后各组大鼠受试关节周径变化。③止痛物质含量测定。大鼠处死后选择受试关节周围软组织，比色法测定钾离子（K+）含量，荧光光度法测定多巴胺（dopamine, DA）、5-羟色胺（5-hydroxytryptamine， 5-HT）含量。

1.4 统计方法

使用SPSS 21.0 统计学软件进行分析，计量资料经检验符合正态分布，以（±s）表示，组间差异比较采用t检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MPR8 对NF-κB 等的影响

MPR8 沉默后巨噬细胞中IL-1β 的分泌降低，NF-κB 表达下调，I-κB 表达上调。见图1。

图1 MPR8 对NF-κB 等的影响

2.2 4 组大鼠受试关节周径比较

正常组用药前后受试关节周径比较，差异无统计学意义（P＞0.05），模型组、双氯芬酸组、痛风舒片组在用药后5 d 的受试关节周径较用药前增加，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 4 组大鼠受试关节周径变化对比[(±s)，cm]

表1 4 组大鼠受试关节周径变化对比[(±s)，cm]

组别正常组（n=10）模型组（n=10）双氯芬酸组（n=10）痛风舒片组（n=10）干预前2.366±0.125 2.665±0.142 2.671±0.138 2.669±0.141干预后5 d 2.341±0.136 2.802±0.149 2.956±0.142 3.115±0.134 t 值0.581 3.119 6.346 10.525 P 值0.568 0.005＜0.001＜0.001

2.3 4 组大鼠受试关节周围止痛物质含量比较

正常组受试关节周围K+、DA、5-HT 水平高于其他3 组，痛风舒片组、双氯芬酸组低于模型组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 4 组大鼠受试关节周围止痛物质含量比较(±s)

表2 4 组大鼠受试关节周围止痛物质含量比较(±s)

注：与正常组比较，aP＜0.05；与模型组比较，bP＜0.05

组别正常组（n=10）模型组（n=10）双氯芬酸组（n=10）痛风舒片组（n=10）F 值P 值K+（mmol∕mg）7.415±0.562（6.021±1.254）a（5.213±0.715）ab（4.562±0.625）ab 21.667＜0.001 DA（μg∕mL）9.154±0.826（7.895±1.415）a（5.562±0.802）b（5.246±0.786）b 36.623＜0.001 5-HT（μg∕mg）14.425±1.152（11.625±2.415）a（9.336±1.562）ab（8.614±1.284）b 24.400＜0.001

3 讨论

中医认为痛风可分为“湿热蕴结”“瘀热阻滞”“痰浊阻滞”“肝肾阴虚”几种证型，辨证治疗可收到显著的效果[4-6]。痛风舒片作为治疗湿热蕴结患者的可行性方法，已在本研究中得到了充分的证实。痛风舒片的主要成分为大黄、车前子、泽泻、川牛膝、防己等。方中大黄有攻积导滞、泻火凉血、逐瘀通经的功效[7]，能够更好地抑制MSU 诱导的炎症和抑制XOD 活性，这与其含有的主要活性成分多糖类、鞣质类与蒽醌类相关。虽然大黄攻下较猛，奏效迅速，但易伤正气。在治疗湿热痰阻所致的痛风病患者时，大黄泻下攻积、泻火解毒、活血祛瘀、清泄湿热；车前子主治小便不利，淋浊带下，水肿胀满，暑湿泻痢，目赤障翳，痰热咳喘；泽泻长于利水渗湿，泄热，用于小便不利，水肿胀满；诸药合用，发挥出药物典型性优势[8]。

本次研究中，模型组、双氯芬酸组、痛风舒片组在用药后5 d 的受试关节周径为（2.802±0.149）、（2.956±0.142）、（3.115±0.134）cm，较用药前增加（P＜0.05），此外在关节周围止痛物质含量低于正常组与模型组，表明痛风舒片对于大鼠痛风的关节肿胀改善好，并且对疼痛缓解有良好效果。这与曾祥永等[9]的研究保持一致，其研究中显示：用药后痛风舒浸膏粉组、双氯芬酸组受试关节周径为（2.432±0.140）、（2.478±0.140）cm，均比用药前增加（P＜0.05）。说明其具有一定的镇痛和抗炎作用。总之，痛风舒片具有清热、利湿、解毒的作用[10]。

痛风舒片清热解毒效用突出，对于湿热所致疼痛不适具备良好的缓解效果。痛风舒片可有效解决高尿酸血症，有效改善痛风石，纠正嘌呤代谢紊乱，分解尿酸，恢复肝肾尿酸代谢功能，使血尿酸浓度降至正常值，痛风石逐渐软化、溶解、排出，使关节逐渐灵活自由，全身舒适[11]。然而，单靠该药根治痛风并不容易，因为痛风比较顽固，而且持续时间比较长[12]，治疗时可以结合针灸疗法，还有饮食疗法。疼痛严重时可以加上止疼药缓解。

痛风患者服用痛风舒片后，能够抑制近端肾小管对尿酸盐的重吸收，从而增加尿酸排泄，降低尿酸水平，适合肾功能良好者[13]。建议痛风舒片剂量为0.96 g，3次∕d，饭后口服。用药期间少吃海鲜、动物内脏等食品；忌啤酒和白酒。每日还要大量饮水，量约2 000～3 000 mL，加速排尿，也能降低尿酸浓度[14]。痛风舒可用于痛风关节炎的消炎、消肿、止痛，但是不能从根本上控制痛风病变的进展[11]。治疗痛风最根本的还是控制血尿酸在相对正常的水平，降低血尿酸主要包括抑制尿酸合成，促进尿酸排泄和加呋塞米酸分解，痛风患者最好要在专科医生的指导下应用药物治疗，在临床上常用的西药包括别嘌醇、非布司他、苯溴马隆等。非布司他，是目前比较新的能治疗痛风的药物，效果比较好，具有抑制尿酸生成的作用，又能够促进尿酸排泄，不良反应比别嘌醇、苯溴马隆等传统的药物要小；因而治疗痛风病可以综合疗法来达到很好的疾病控制效果[15]。

综上所述，痛风舒片应用于动物试验的治疗实践中，对强化药物疗效，促进药物吸收，加速控酸具有显著的效果，在因痛风引起的湿热性疾病的治疗中具有极高的疗效，抗炎和镇痛效果突出，值得临床应用实施。