降浊合剂浓缩液对肥胖大鼠体质量、糖脂指标的影响

苏琼 江丹娜 钟钊 周开 龚文波

[摘要] 目的 探究降濁合剂浓缩液对肥胖大鼠体质量、糖脂指标的影响。方法 将30只SD大鼠随机分为正常组、模型组和给药组，每组各10只。正常组大鼠给予普通饲料足量喂养+生理盐水灌胃，模型组大鼠给予高脂饲料足量喂养+生理盐水灌胃，给药组大鼠给予高脂饲料足量喂养+降浊合剂浓缩液灌胃。干预8周后，观察各组大鼠的大体情况和体质量变化，采用苏木精–伊红染色（hematoxylin and eosin staining，HE染色）观察脂肪细胞的病理变化，比较血糖（glucose，GLU）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）水平。结果 干预后，给药组大鼠的精神状态、皮毛光泽度显著改善，且干预7～8周的体质量显著低于模型组（P<0.05）；HE染色观察显示，给药组大鼠的白色、棕色脂肪细胞体积接近正常组；给药组大鼠的TG显著低于模型组（P<0.05），GLU、TC、LDL-C水平略低于模型组，但比较无统计学意义（P>0.05）。结论 降浊合剂浓缩液能够改善肥胖大鼠的体质量和皮毛光泽度，缓解脂肪组织变性，降低糖脂指标。

[关键词] 降浊合剂浓缩液；高脂饲养；肥胖；病理变化

[中图分类号] R723.14      [文献标识码] A      [DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2023.16.015

Effect of concentrated solution of Jiangzhuo mixture on body weight， glucose and lipid index of obese rats

SU Qiong1， JIANG Danna2， ZHONG Zhao3， ZHOU Kai1， GONG Wenbo1

1.Department of Endocrinology， Ningbo Hospital of Chinese Medicine Affiliated Zhejiang Chinese Medical University， Ningbo 315010， Zhejiang， China; 2.Department of Cardiology， Ningbo Hospital of Chinese Medicine Affiliated Zhejiang Chinese Medical University， Ningbo 315010， Zhejiang， China; 3.Department of Rheumatology， Ningbo Hospital of Chinese Medicine Affiliated Zhejiang Chinese Medical University， Ningbo 315010， Zhejiang， China

[Abstract] Objective To explore the effect of concentrated solution of Jiangzhuo mixture on body weight， glucose and lipid index of obese rats. Methods 30 SD rats were randomly divided into normal group， model group and drug group， with 10 rats in each group. The rats in normal group were given regular feed and normal saline intragastric administration， the rats in model group were given high-fat feed and normal saline intragastric administration， and the rats in drug group were given high-fat feed and Jiangzhuo mixture intragastric administration. After 8 weeks of intervention， the general condition and weight changes of each group of rats were observed， hematoxylin and eosin （HE） staining was used to observe the pathological changes of adipocytes， and glucose （GLU）， total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， low density lipoprotein-cholesterol （LDL-C） levels were compared. Results After intervention， the mental state and coat gloss of the rats in drug group were significantly improved， and the body weight at 7-8 weeks was significantly lower than that of model group （P<0.05）. HE staining observation showed that the white and brown adipocyte volumes in drug group were close to those in normal group. The TG of rats in drug group was significantly lower than that in model group （P<0.05）， the levels of GLU， TC and LDL-C were slightly lower than those of model group， but there were no statistical significance （P>0.05）. Conclusion The concentrated solution of Jiangzhuo mixture can improve the weight and coat gloss of obese rats， relieve adipose tissue degeneration， and lower glucose and lipid index.

[Key words] Concentrated solution of Jiangzhuo mixture; High fat feeding; Obesity; Pathological changes

肥胖症是一种常见的代谢综合征，由热量摄入超过机体需求，使过量脂肪堆积于体内所致。该疾病是多种因素共同作用的结果，其影响因素包括缺乏锻炼、高热量饮食、基因、生活方式等[1]。肥胖是人类健康的主要风险因素之一，可引发糖尿病、胰岛素抵抗、心血管疾病等多种慢性疾病，同时还可导致患者自尊心及个人外表满意度下降，进而产生消极心理，甚至引起不良的社会后果[2-5]。由此可见，寻找防治肥胖的有效手段具有重要意义。《中国超重/肥胖医学营养治疗专家共识（2016年版）》[6]建议体质量指数>28kg/m2的肥胖者，在饮食管理、行为干预的基础上应用药物进行减重治疗。与合成药物相比，中药制剂通常是多药合用，毒性较小，可对高胆固醇血症进行安全有效的治疗，且药物不良反应较少[7]。本研究根据中药配伍原则制作降浊合剂浓缩液，采用高脂饲养大鼠建立肥胖模型，探究该中药汤剂在肥胖大鼠中的治疗作用，以期为肥胖症治疗提供可行方案，现报道如下。

1  材料与方法

1.1  实验动物

本实验开展于2020年7月至2021年4月，30只SPF雄性SD大鼠，平均体质量（120±10）g，由杭州医学院提供并在浙江省中医药研究院实验动物中心进行饲养，饲养温度（22±2）℃，湿度50%～60%，保持光照周期12h/12h昼夜节律。实验动物生产许可证号：SCXK（浙）2019-0002，实验动物使用许可证号：SYXK（浙）2019-0010。

1.2  主要试剂、材料和仪器

Trizol试剂（Ambion公司，批号：119704）；异丙醇（成都市科龙化工试剂厂，批号：2015122801）；无水乙醇（成都市科隆化学品有限公司，批号：2018051801）；二甲苯（北京偶合科技有限公司，批号：01001437-100ml）；苏木精–伊红染色（hematoxylin and eosin staining，HE染色）试剂盒（碧云天生物，批号：C0105S）。普通饲料为实验动物标准饲料，由浙江省中医药研究院实验动物中心提供；造模饲料含食用化猪油15%、蔗糖20%、胆固醇1.2%、胆盐0.2%，其余63.6%为普通饲料加工而成。降浊合剂组方：生黄芪30g、丹参30g、生苍术15g、生薏苡仁30g、生麦芽30g、生扁豆30g、绞股蓝30g、生鸡内金15g、生葛根30g、生山楂30g、荷叶15g。加水煎制成生药浓度5g/ml的浓缩液，由宁波市中医院提供。

Centrifuge 5810R型离心机（Eppendorf公司）；AU5831型全自动生化分析仪（美国贝克曼库尔特有限公司）；TP1020-1型组织脱水机、EG1150型石蜡包埋机、RM2235型石蜡切片机（德国莱卡公司）。

1.3  模型制备及动物分组

将大鼠随机分为正常组、模型组和给药组，每组各10只。正常组大鼠予普通饲料喂养。模型组和给药组大鼠用于构建肥胖模型，以高脂饲料足量喂养，自由饮食饮水。肥胖大鼠建模成功的标准为空腹条件下体质量超过正常组大鼠平均体质量的20%。待模型建立后，模型组大鼠给予蒸馏水10ml/kg灌胃，给药组大鼠给予降浊合剂浓缩液50g/kg灌胃，正常组大鼠给予蒸馏水10ml/kg灌胃，每日上午灌胃1次。均连续饲养8周。观察各组大鼠的一般情况、体质量变化，检测糖脂指标，HE染色观察白色、棕色脂肪细胞的病理变化。

1.4  观察指标

干预8周后，观察大鼠的一般情况，包括体质量、体长（大鼠鼻尖至肛门的长度）、精神狀态、皮毛光泽度等。禁食24h，采用3%戊巴比妥钠40mg/kg腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，将血液置于离心管4000转/min离心20min，分离血清，采用全自动生化分析仪检测各组大鼠的血糖（glucose，GLU）、总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）水平。将大鼠脂肪组织固定于10%中性福尔马林溶液24h，酒精脱水后，置于二甲苯溶液中透明，然后将组织置于石蜡液中包埋24h，制成4μm的切片，进行常规HE染色，中性树胶封片，显微镜下观察脂肪细胞的形态学改变。

1.5  统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件处理数据。计数资料以例数（百分率）[n（%）]表示，比较采用χ2检验，计量资料以均数±标准差（）表示，多组间比较采用方差分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2  结果

2.1  三组大鼠的大体形态比较

干预8周后，正常组大鼠形体适中、自主活动正常，食欲佳，皮毛光泽、蓬松，大便质地硬，对外界反应敏捷，饮水量正常；模型组大鼠形体肥胖、活动度下降，食欲下降，皮毛无光泽、蓬松度差，便溏，对外界反应能力下降，饮水量减少；与模型组相比，给药组大鼠活动度较强，食欲可，皮毛光泽及蓬松度好，大便质地硬，对外界反应能力增强，饮水量较多。干预后，模型组大鼠的体质量均显著高于正常组（P<0.05）；干预0～6周，给药组大鼠的体质量均显著高于正常组（P<0.05），干预7～8周，给药组大鼠的体质量显著低于模型组（P<0.05），见图1。

2.2  三组大鼠的脂肪细胞病理变化

正常组大鼠的白色脂肪细胞、棕色脂肪细胞均呈空泡状，近似圆形；模型组大鼠的白色、棕色脂肪细胞体积明显大于正常组；干预8周后给药组大鼠的脂肪细胞体积与正常组相似，见图2。

2.3  三组大鼠的生化指标比较

干预8周后，给药组大鼠的TG显著低于模型组（P<0.05），GLU、TC、LDL-C水平略低于模型组，但比较无统计学意义（P>0.05），见表1。

3  讨论

肥胖现已成为严重的社会健康问题。研究表明，肥胖不仅影响形体美观，还可诱发糖尿病、胰岛素抵抗等多种并发症，对人民健康造成消极影响[8-9]。中医汤药不良反应小，是现阶段肥胖治疗的较佳方案。中医认为肥胖是由多种原因导致体内膏脂堆积过多，《景岳全书·非风诸证治法》指出“肥人多有气虚”，因其“阴盛于阳”，故又“多湿多滞”，以气虚为本，痰湿气滞为标。治疗上以补气虚为原则。此外，《脾胃论·脾胃盛衰论》中提到肥胖者常见脾胃虚弱，而脾胃虚弱则不能化生气血精微以养五脏，五脏不兴则诸证起，其多见痰湿、水肿。因此在治疗肥胖时可采用健脾祛湿之药物，本研究根据中药配伍原则配制降浊合剂浓缩液，试图为肥胖治疗提供一个可行方案。

降浊合剂浓缩液由黄芪、丹参、生苍术、生薏苡仁、生麦芽、生扁豆、绞股蓝、生鸡内金、生葛根、生山楂、荷叶组成。研究表明，黄芪可降低糖尿病大鼠血糖水平[10]；丹参可防止脂肪堆积，提高胰岛素敏感性，控制血糖[11]；生苍术可健脾燥湿、祛风散寒、消肿祛瘀[12]；生薏苡仁长于健脾，利于消肿，对虚胖的疗效较好[13]；绞股蓝可降血脂、防治血栓、调节血糖，适用于糖尿病肥胖的治疗[14]；生扁豆可增强免疫、降血脂，且富含膳食纤维。此外生鸡内金消食、消积；生葛根生津、止渴；生山楂生津、消食；荷叶升发清阳、凉血止血。诸药合用，具有消脂平肝、补肾健脾的功效，可针对性治疗由多因素导致的肥胖。为进一步确认降浊合剂浓缩液对肥胖的作用，本研究进行了体内验证。

体质量增加是判断肥胖最直观的外在特征，同时，肥胖者的脂肪持续堆积将增加血黏稠度，使动物出现精神状态萎靡、皮肤光泽暗淡等不良外在表现。本研究通过对高脂饮食诱导的肥胖大鼠的外在特征观察发现，干预8周后，正常组大鼠形体适中、自主活动正常，食欲佳，皮毛光泽、蓬松，大便质地硬，对外界反应敏捷，饮水量正常；模型组大鼠出现形体肥胖、活动度下降，食欲下降，皮毛无光泽、蓬松度差，便溏，对外界反应能力下降，饮水量减少等表现；与模型组相比，给药组大鼠活动度较强，食欲可，皮毛光泽且蓬松度好，大便质地硬，对外界反应能力增强，饮水量较多。降浊合剂浓缩液可显著改善肥胖大鼠的体质量、精神状态及皮毛光澤度。基于此，从宏观角度可初步判断，降浊合剂浓缩液对治疗肥胖具有一定效果。研究显示，肥胖大鼠的肝脏细胞内明显可见气球样空泡的单个大脂滴挤向细胞膜，可见明显的脂肪细胞[15-16]。本研究通过对肥胖大鼠脂肪细胞病理变化观察发现，高脂饲养的大鼠的白色、棕色脂肪细胞体积均明显变大，而降浊合剂浓缩液可显著抑制高脂饮食诱导的脂肪细胞体积增大，提示降浊合剂浓缩液可缓解高脂饮食诱导的脂肪组织变性。

GLU、TC、TG、LDL-C等升高是冠心病的危险因素，其水平可作为预测冠心病病情的常规指标，且与肥胖程度呈正相关[17]。在本研究中，通过检测GLU、TC、TG、LDL-C水平探究降浊合剂浓缩液对高脂饮食诱导肥胖大鼠的糖脂影响，结果显示，降浊合剂浓缩液可抑制高脂饮食导致的大鼠的GLU、TC、TG、LDL-C水平升高。提示降浊合剂可降低糖脂指标，侧面降低冠心病的发病风险。

综上所述，降浊合剂浓缩液可改善肥胖大鼠的体质量和皮毛光泽度，缓解脂肪组织变性，降低糖脂指标。

[参考文献][1] 宫祎慧， 闫彩凤. 肥胖患者脂肪分布和代谢与骨质疏松症关系的研究进展[J]. 中华肥胖与代谢病电子杂志， 2020， 6（1）： 55–57.

[5] 李俊晴， 雷夢媛， 杨艳艳， 等. 人体测量学指标预测心血管疾病危险因素的研究进展[J]. 中国全科医学， 2020， 23（35）： 4524–4529.