龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与重度牙周炎患者治疗后预后的关系*

朱丽娜,包丽娜

1.陕西省核工业二一五医院口腔科,陕西咸阳 712000;2.陕西省咸阳市第一人民医院口腔科,陕西咸阳 712000

牙周炎是口腔科临床常见疾病之一,往往是由菌斑微生物所致,患者表现为牙周袋的形成、牙龈红肿以及牙槽骨吸收等[1]。牙周炎的治疗手段以基础治疗以及外科治疗为主,其主要目的是清除菌斑、牙石以及遭受感染的袋内壁、根面,实现对牙周炎症的完全清除[2]。牙周基础治疗内容有口腔卫生干预、龈上洁治以及龈下刮治、根面平整等,实际工作中发现部分患者在接受基础治疗后仍存在疗效不佳,需开展激光辅助治疗或手术治疗[3]。因此,如何早期有效预测患者牙周基础治疗后预后不良显得尤为重要。牙周炎发病易导致牙槽骨、牙龈等组织出现炎症,进一步破坏牙槽骨[4]。Shh蛋白可通过相关信号通路介导急慢性炎症损伤,可能参与了牙周炎的发生、发展过程[5]。牙周组织中dickkopf相关蛋白1(DKK1)表达的增加会对Wnt信号通路所介导的促成骨分化、牙槽骨形成起到抑制作用,进而促进了牙槽骨的吸收[6]。人类软骨糖蛋白-39(HC-gp39)属于新型炎症指标,可加剧炎症反应,对炎症疾病进展起到促进作用[7]。目前,临床上关于Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后关系的研究少见报道。鉴于此,本文拟研究龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后的关系,现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1月至2022年1月陕西省核工业二一五医院收治的120例重度牙周炎患者作为研究对象,其中男71例、女49例,年龄25～67岁、平均(41.55±11.45)岁,有吸烟史12例。纳入标准:(1)前牙区重度牙周炎的诊断均符合《重度牙周炎诊断标准及特殊人群牙周病治疗原则的中国专家共识》[8]中推荐的重度牙周炎诊断标准,患牙炎症较明显,伴或不伴有牙周脓肿,牙齿松动,患牙牙槽骨吸收超过根长的1/2;(2)均接受牙周基础治疗;(3)年龄>18岁;(4)临床资料完整;(5)初诊时前牙区牙周袋探诊深度(PD)≥6 mm。排除标准:(1)合并其他感染性疾病或免疫性疾病;(2)牙齿部位异常或(和)无法完成口腔卫生维护;(3)接受正畸治疗;(4)神志异常或因故无法完成相关治疗;(5)正处于妊娠期或哺乳期女性;(6)入组前30 d内有抗菌药物或(和)激素类药物治疗史。所有纳入患者均已签署知情同意书,本研究经陕西省核工业二一五医院医学伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1治疗方法 治疗方法包括龈上洁治、龈下刮治以及根面平整术等,同时实施口腔卫生宣教,正确刷牙以及使用牙线,拔除无保留价值的患牙。

1.2.2观察指标 (1)根据医院病历系统统计所有患者治疗前PD、临床附着丧失(CAL)、龈沟出血指数(SBI)、菌斑指数(PLI)等资料。(2)龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39检测:首先采集龈沟液,取裁剪呈2 mm×10 mm的滤纸条,分别在各EP管中置入6条,消毒干燥处理后称重备用。去除目标牙位龈上菌斑以及软垢,以棉球隔湿,顺着牙面气枪吹干牙面,在取样牙龈沟置入滤纸条,遭遇阻力时停止,静置30 s后取出、称重。根据龈沟液比重完成龈沟液含量的计算,并滴加适量的PBS缓冲液,离心获取标本保存至低温冰箱中。龈沟液Shh蛋白、DKK1水平采用酶联免疫吸附试验检测,HC-gp39水平采用夹心酶联免疫吸附试验检测,所有步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。龈沟液Shh蛋白试剂盒购自上海科敏生物科技有限公司,DKK1试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司,HC-gp39试剂盒购自上海蓝基生物科技有限公司。

1.2.3预后分组 治疗90 d后,将患者按照治疗后PD的差异分为预后不良组和预后良好组。PD≥5 mm判断为预后不良,PD<5 mm判断为预后良好。

2 结 果

2.1120例患者预后情况分析 治疗90 d后,预后不良组有36例,预后良好组有84例。

2.2两组龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平对比 预后不良组龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平均高于预后良好组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平对比

2.3不同预后患者基线资料对比 有吸烟史比例、治疗前PD及治疗前CAL在预后不良组与预后良好组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);而性别、年龄、治疗前SBI、治疗前PLI在预后不良组与预后良好组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 不同预后患者基线资料对比

2.4多因素Logistic回归分析前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后的影响因素 以前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后为因变量,赋值为预后良好=0、预后不良=1。以表1、表2中两组差异有统计学意义的指标为自变量,吸烟史赋值为有=1、无=0,治疗前PD、治疗前CAL、Shh蛋白、DKK1、HC-gp39以所有患者的均值(7.60 mm、7.00 mm、4.00 μg/L、9.00 μg/L、60.00 ng/mL)分层。经多因素Logistic回归分析发现:有吸烟史、治疗前PD>7.60 mm、治疗前CAL>7.00 mm、Shh蛋白>4.00 μg/L、DKK1>9.00 μg/L及HC-gp39>60.00 ng/mL均是前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后影响因素的多因素Logistic回归分析

2.5龈沟液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39预测前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的ROC曲线分析 龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39单项检测及3项联合检测预测前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.755、0.783、0.721、0.845,3项联合检测预测的效能优于单项检测。见图1和表4。

图1 龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39单项及联合检测预测前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的ROC曲线

表4 龈沟液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39判断前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的效能分析

3 讨 论

牙周炎主要特征包括牙龈炎症以及牙槽骨丧失,是全球范围内成年人牙齿缺失的重要原因之一[9]。重度牙周炎作为牙周炎中的严重类型,影响牙齿支持组织的健康,并可累及牙齿的咀嚼功能,对患者的日常生活产生影响[10]。目前普遍认为牙周炎发病机制为菌斑生物膜引发的宿主免疫炎症反应,且大部分牙周损害的发生与宿主对感染的应答有关,并非单纯微生物感染所致[11-13]。在免疫炎症反应过程中,因存在多种细胞因子、趋化因子以及蛋白酶的大量释放,从而导致组织损伤和牙槽骨吸收破坏程度增加[14-16]。Sonic Hedgehog信号通路广泛介导多种器官急、慢性炎症损伤,前期研究证实种植体周围炎患者龈沟液内存在Shh蛋白的表达,作为Sonic Hedgehog信号通路的关键性蛋白,Shh可通过调控上述信号通路活性,进而影响白细胞介素(IL)-10以及肿瘤坏死因子(TNF)-α等炎症因子水平,进一步介导牙周炎的发生、发展过程[17]。DKK1是Wnt通路经典抑制剂,可通过调控上述信号通路,调控牙周韧带细胞朝成骨细胞方向分化,从而抑制骨形成的作用,促进骨破坏,其表达的升高可能损害牙周组织,介导牙周炎的发生、发展[18]。HC-gp39是急性时相反应蛋白之一,在正常生理状态下低表达,而在感染、炎症以及损伤时,其表达异常升高,会加剧炎症反应程度,促进炎症疾病进展[19]。HC-gp39在龈沟液中的研究较为少见,而龈沟液中炎症因子水平可有效反映牙周状况,因此对龈沟液中HC-gp39水平进行观察,可明确其与牙周炎发生、发展的相关性。

本文结果发现,预后不良组龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平均高于预后良好组。且经多因素Logistic回归分析发现Shh蛋白>4.00 μg/L、DKK1>9.00 μg/L及HC-gp39>60.00 ng/mL均是前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的危险因素,提示龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良密切相关。Shh蛋白可能通过促进IL-6等炎症介质的大量合成、分泌,促进炎症发展,对牙周组织造成更大的损害,不利于预后[20]。DKK1与牙周炎有关,随着牙周组织受损程度的增加,龈沟液中DKK1分泌显著增加,牙周炎患者牙周基础治疗难度增加,预后不良风险增加[21]。HC-gp39水平可在一定程度上反映牙周炎患者病情严重程度以及治疗效果[22]。随着HC-gp39水平的升高,加剧了牙周局部炎症,进而对牙周组织产生进一步损害,导致了预后不良。经多因素Logistic回归分析还发现,有吸烟史、治疗前PD>7.60 mm、治疗前CAL>7.00 mm均是前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的危险因素。究其原因,吸烟所产生的烟雾含有大量有毒物质,可能导致牙周袋内微环境发生异常改变,并增加了牙周致病菌含量,继而引发或加剧炎症,导致牙周袋的持续加深,影响预后[23]。PD、CAL的增加往往反映了牙周炎患者牙周组织炎症明显以及病情严重,预后效果相对较差。

经ROC曲线分析发现,龈沟液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39联合检测预测前牙区重度牙周炎患者预后不良的效能均优于3项指标单项预测,联合检测上述3项指标水平可为口腔科医生判断预后提供辅助参考依据。

综上所述,龈沟液Shh蛋白、DKK1及HC-gp39水平升高均是前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的危险因素,初步研究表明Shh蛋白、DKK1及HC-gp39联合检测判断前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的效能较高。