血常规参数联合SAA检测在甲型流感诊断中的临床价值*

刘小晴,凌利芬,邹小红,王慧婷,李振华

中山大学附属第八医院检验科,广东深圳 518033

流行性感冒(以下简称流感)是流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,每年呈季节性流行,目前感染人的甲型流感病毒主要是H1N1和H3N2亚型[1]。流感起病急,主要以发热(体温可达39～40 ℃)、头痛、畏寒、全身肌肉酸痛、乏力、食欲减退等症状为主,也可表现为咽喉痛、干咳、鼻塞、流涕、胸骨后不适、颜面潮红、眼结膜充血等症状。虽然大多为自限性症状,但部分患者出现肺炎并发症或基础疾病加重发展成重症病例,少数患者病情进展快,可因急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、急性坏死性脑病或多器官功能不全等并发症而死亡[2]。流感发病48 h内进行抗病毒治疗可减少并发症、降低病死率、缩短住院时间,但应避免盲目或不恰当使用抗菌药物。本研究通过检测所有研究对象的血常规和血清淀粉样蛋白A(SAA)水平,探讨血常规参数中性粒细胞绝对值(NEU)、淋巴细胞绝对值(LYM)、NEU/LYM比值(NLR)和血清SAA对甲型流感的辅助诊断价值,为甲型流感的诊断和临床合理用药提供一定的参考依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2019年1-6月中山大学附属第八医院收治的113例上呼吸道感染患者,其中有73例甲型流感患者(甲型流感组)和40例非流感患者(非流感组)。甲型流感组中男34例、女39例,年龄14～74岁、平均(36.18±14.83)岁;非流感组中男18例、女22例,年龄18～81岁、平均(36.05±11.48)岁。另选择同期到本院体检的健康体检者50例作为健康对照组,其中男26例、女24例,年龄18～66岁、平均(34.46±11.97)岁。3组研究对象性别、年龄比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。本研究经本院医学伦理委员会审批通过。

甲型流感纳入标准:(1)符合《流行性感冒诊疗方案:2020年版》[2]中的相关诊断标准,有发热、肌肉酸痛、乏力并伴有咽喉痛等临床症状。(2)有流行病学史,发病前7 d内在无有效个人防护下与疑似或确诊流感患者有密切接触,或属于流感样病例聚集发病者之一,且排除其他引起流感样症状的疾病。(3)流感抗原检测甲型流感病毒阳性且乙型流感病毒阴性。非流感组纳入标准:有发热,流感样上呼吸道症状且流感病毒抗原检测均为阴性。健康对照组纳入标准:无发热,无流感样症状,门诊体检健康且近期无感染史。排除标准:因肿瘤、寄生虫、药物治疗等因素引起的上呼吸道感染。

1.2方法 患者、体检者分别于门诊、体检时采集2 mL乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝静脉血通过自动化血液分析仪进行血常规检测。同时用分离胶管采集静脉血3 mL,3 000 r/min离心10min,取血清于-20 ℃冻存统一检测SAA,采用AFS-1000 干式荧光免疫分析仪(广州蓝勃生物科技有限公司)及其配套血清SAA 检测试剂(广州微米生物科技有限公司)检测SAA,所有定标品、质控品均为原装配套,且仪器设备均在质控在控下进行检测。检测人员严格按照试剂盒说明书的要求进行操作。血常规NEU正常值为(1.8～6.3)×109/L,LYM正常值为(1.1～3.2)×109/L,SAA正常值为<10 mg/L。

1.3统计学处理 采用统计学软件R语言3.6.3对数据进行分析。非正态分布的计量资料以中位数(四分位数)[M(Q1,Q3)]表示,多组间比较采用Kruskal-Wallis检验,多组间两两比较使用Nemenyi检验;计数资料以例数、百分率表示,组间比较采用χ2检验;采用受试者工作特征(ROC)曲线判断各指标对甲型流感的诊断效能。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.13组血常规中 NEU、LYM、NLR和血清SAA水平比较 甲型流感组与非流感组NEU、NLR、SAA水平均明显高于健康对照组(P<0.05),而LYM水平均低于对照组(P<0.05)。甲型流感组患者LYM低于非流感组(P<0.05),但NLR、NEU、血清SAA水平与非流感组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。见表1和图1。

注:*P<0.05;ns表示P>0.05。图1 各项指标的BoxPlot图水平比较

表1 3组各项指标的水平比较[M(Q1,Q3)]

2.2NEU、LYM、NLR、SAA对甲型流感的诊断效能 以非流感患者为对照,绘制ROC曲线,结果显示,NEU、LYM、NLR、SAA诊断甲型流感的AUC分别为 0.628、0.852、0.794、0.822,NEU+LYM+NLR+SAA联合诊断甲型流感的AUC为0.884,联合诊断性能优于单项检测。见表2和图2。

图2 NEU、LYM、NLR、SAA单项及4项联合诊断甲型流感的ROC曲线

表2 各项指标对甲型流感的诊断效能

3 讨 论

流感病毒是直径为80～120 nm的球形或丝状的单股负链RNA正黏病毒科的病毒[3]。根据核蛋白和基质蛋白不同分为甲、乙、丙、丁4型流感病毒,甲型流感病毒宿主众多且血清型复杂,可以经过基因重组和适应性突变而跨宿主传播[4]。人类对甲型流感病毒缺乏持久的免疫力而普遍易感,是引起流行性感冒最主要的病原体[5]。甲型流感病毒传播速度快,发病率高,冬春季节易高发[6],但在临床表现上易与有发热、流感样上呼吸道症状的感染相混淆[7]。

本研究中甲型流感组与非流感组NEU、NLR和SAA水平均高于健康对照,LYM水平低于健康对照,说明NEU、NLR、SAA和LYM的变化可以反映出机体的感染状况。血常规是临床上比较常用的检测项目之一,理论上NEU和LYM可以区分细菌和病毒的感染,但是在临床上影响因素较多。

甲型流感患者的LYM水平低于非流感患者,说明LYM是区分甲型流感与非流感的有价值的指标,与部分研究报道的甲型流感患者NLR升高、淋巴细胞下降一致[8-9]。而甲型流感组和非流感组的NEU、NLR和SAA无差异,这与FU等[10]报道的在甲型流感患儿早期诊断中SAA和NLR的高诊断价值结果不一致,其原因可能是调查对象不同,儿童的造血功能较成人旺盛。血常规的NEU是通过“呼吸爆发”、脱颗粒、胞外杀菌网络(NETs)等途径抵抗外界感染的重要免疫细胞,当机体发生细菌感染时,白细胞(WBC)和NEU%一般在2～6 h开始升高,对细菌性感染具有更高的诊断价值[11]。也有研究报道,甲、乙型流感患者WBC多以正常为主,甲型流感患者WBC与NUE高于乙型流感患者,提示甲型流感比乙型流感更易合并细菌感染[6]。NLR是比值,综合了NEU和LYM两种炎症参与细胞,是一种新型的炎症指标,在RUSSELL等[12]报道中确定NLR与菌血症之间存在一定的关联。但是NLR在甲型流感的临床效用尚不清楚且绝对差异有时候太小而无临床意义。SAA是一种高度保守的急性期蛋白,主要由肝脏合成,SAA充当趋化因子和诱导细胞因子,当强烈的感染或者炎症持续存在下,肝脏会产生更多的SAA,通过作为细菌调理素和干扰宿主细胞的病毒感染发挥抗菌和抗病毒的作用[13]。有研究表明,与C反应蛋白等其他指标比较,细菌或病毒感染下SAA升高明显。这些结果表明NEU、NLR和SAA在区别甲型流感与非流感时缺乏特异性,说明仅靠NEU、NLR和SAA这些指标不能诊断甲型流感。但是可作为甲型流感的辅助诊断指标,其水平变化也可动态观察病情,可作为病毒感染诊断及监测的指标,指导临床用药[14-15]。

ROC曲线分析结果显示,NEU、LYM、NLR、SAA单项和4项联合诊断甲型流感的AUC分别是0.628、0.852、0.794、0.822和0.884,SAA的诊断效能高于NLR和NEU且灵敏度最高,LYM的诊断效能高于SAA且特异度最高,但4项联合指标的诊断效能最高,灵敏度和特异度都较高,可作为甲型流感较好的辅助诊断指标,对甲型流感的发生起着预警并辅助诊断的作用。

综上所述,NEU、LYM、NLR、SAA 4项联合对甲型流感诊断具有较高的辅助诊断价值。本研究局限性在于样本量较小,仅探讨了这4项指标在甲型流感辅助诊断中的应用,未来可扩大样本量,进一步探讨这4项指标在甲型流感人群治疗过程中的动态变化。