临床微生物检验中细菌耐药性监测分析

钱王燕，陈访，吉丽娟

上海交通大学医学院苏州九龙医院检验科，江苏苏州 215000

细菌感染属于临床常见、多发病，近年来因环境变化、药物使用等因素影响，各类细菌感染问题越发突出，且侵袭力不断增强，给患者的健康带来明显威胁[1-2]。而随着抗菌药物使用范围的持续性扩大以及用药频率的提升，部分微生物对抗菌药物的耐药性有一定增加，不少患者在使用抗菌药物治疗后疗效不佳，且如抗菌药物使用剂量、类别等不合理，甚至可能导致多重耐药感染，进而导致治疗难度进一步增加[3-4]。而耐药菌株的蔓延、传播也可能导致变异耐药菌流行，对此临床应当加以重视[5]。为了明确细菌感染现状及常见细菌的耐药性，各级医院应当积极落实微生物检验以及耐药性检测，以指导临床工作的开展[6-7]。基于此，本研究就上海交通大学医学院苏州九龙医院2021年1月—2022年10月收集的2 880株病原菌监测样本细菌种类分布情况及药敏实验结果进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择本院收集的2 880株病原菌监测样本为研究对象。该2 880株病原菌标本主要源于：血液标本10 383份、痰液标本5 830份、尿液标本3 796份、分泌物标本1 118份。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：①留取标本操作规范；②标本未被污染；③及时检测。排除标准：①重复性病原菌检测标本；②未进行药敏试验标本。

1.3 方法

对采集的标本开展细菌培养工作，在培养完成后使用全自动微生物鉴定仪（仪器型号为VITEK-2）开展细菌鉴定，并开展药敏实验。在药物耐药性分析上，采用动态比浊法测定药物最小抑菌浓度，配套使用GP67、GN67、GNXNO4药敏板条，另外开展补充药敏实验，方法为纸片扩散法，常规进行耐药性鉴定。

1.4 观察指标

①分析分离病原菌的分布情况，计算每种菌株的例数及构成比。②分析药敏实验结果，选择排名前5位的病原菌进行分析。其中将凝固酶阴性葡萄球菌分为耐甲氧西林与甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌（methicillin-resistant/sensitive coagulasenegative Staphylococcus, MRCNS/MSCNS），金黄色葡萄球菌分为耐甲氧西林与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant/sensitive staphylococcus aureus, MRSA/MSSA），而后进行分析。

1.5 统计方法

采用EXCEL处理数据，计数资料以频数及百分率表示。

2 结果

2.1 病原菌分布情况分析

该2 880株病原菌占比排名前5的依次为：大肠埃希菌（23.26%）、肺炎克雷伯菌（16.15%）、铜绿假单胞菌（10.35%）、金黄色葡萄球菌（8.82%）、凝固酶阴性葡萄球菌（6.98%）。见表1。

表1 病原菌分布情况分析

2.2 细菌耐药性监测分析

金黄色葡萄球菌中MRSA计90株，MSSA计164株。凝固酶阴性葡萄球菌中MRCNS计147株，MSCNS计54株。经检验大肠埃希菌耐药性前3位：环丙沙星（57.9%）、左氧氟沙星（52.2%）、头孢呋辛（50.4%）。肺炎克雷伯菌耐药性前4位：环丙沙星（50.1%）、头孢呋辛（47.5%）、头孢噻肟（44.5%）、左氧氟沙星（43.2%）。铜绿假单胞菌耐药性前3位：头孢呋辛（81.2%）、亚胺培南（36.9%）、左氧氟沙星（36.6%）。MRSA耐药性前3位：青霉素（100.0%）、红霉素（52.2%）、克林霉素（35.6%）；MSSA则分别为：青霉素（81.1%）、红霉素（40.2%）、左氧氟沙星与环丙沙星（均为12.2%，并列第3）。MRCNS耐药性前3位：青霉素（98.6%）、左氧氟沙星（74.8%）、红霉素（69.4%）；MSCNS则为：青霉素（70.4%）、红霉素（48.1%）、左氧氟沙星（14.8%）。见表2。

表2 细菌耐药性监测分析[n(%)]

3 讨论

细菌对抗菌药物产生耐药性的原因在于其遗传基因突变，产生耐药基因，而这一变异存在遗传性，随着耐药性的形成，可表现为长期耐药[8-9]。耐药细菌在患者体内持续性的繁殖，可造成抗生素作用目标菌种水平进一步降低，而耐药细菌可逐渐成为优势菌种，进而机体可产生对某种抗菌药物的耐药性[10-11]。而随着目前临床使用广谱抗生素的增加，耐药菌株不断产生，多种抗菌药物治疗效果逐渐降低[12-13]。在该情况下，盲目使用抗生素可增加多重耐药细菌感染的风险，患者的生命健康受到严重威胁，对此临床应当积极开展微生物检验以及耐药性监测，指导临床合理使用抗菌药物[14-15]。而从本研究2 880株病原菌的分析来看，排名前5的分别为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌以及凝固酶阴性葡萄球菌，其占比分别为：23.26%、16.15%、10.35%、8.82%、6.98%，另鲍氏不动杆菌也有较高占比，为4.83%，提示该类细菌感染在临床中较为常见。朱江[16]研究中，对193株致病菌菌种进行分析发现，排名前6的分别为凝固酶阴性葡萄球菌（33.7%）、金黄色葡萄球菌（16.1%）、铜绿假单胞菌（10.4%）、大肠埃希菌（8.8%）、不动杆菌（7.7%）、克雷伯菌（6.2%），虽构成比有一定差异，但常见致病菌种类与本研究基本一致，证实了这些类致病菌感染在临床中占比较高。

而在耐药性检测上，大肠埃希菌对环丙沙星（57.9%）、左氧氟沙星（52.2%）、头孢呋辛（50.4%）有较高耐药性，而对亚胺培南、美罗培南、阿卡米星等耐药性较低，故对大肠埃希菌推荐采用这些药物治疗。而肺炎克雷伯菌对环丙沙星（50.1%）、头孢呋辛（47.5%）、头孢噻肟（44.5%）、左氧氟沙星（43.2%）均耐药性较高，对其他常用抗菌药物也存在不同程度耐药，则考虑对应结合药敏实验结果灵活选择抗菌药物。铜绿假单胞菌对头孢呋辛（81.2%）耐药性最高，对阿卡米星、庆大霉素耐药性较低。另外本研究中金黄色葡萄球菌（MRSA、MSSA）、凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS、MSCNS）均对青霉素、红霉素有较高耐药性，MRCNS对左氧氟沙星也有较高耐药性，达74.8%，故不宜采用该类药物治疗，应综合考虑患者病情、过敏反应以及机体状态，选择适宜的抗菌药物。李振起[17]研究中，大肠埃希菌对环丙沙星、头孢呋辛耐药性分别为73.68%、78.95%；铜绿假单胞菌对头孢呋辛耐药性达100.00%；肺炎克雷伯菌对头孢呋辛、环丙沙星耐药性分别为53.33%、33.33%，均处于较高水平；而程庆妮等[18]研究中，MRSA、MSSA、MRCNS、MSCNS对青霉素耐药性分别为98.15%、96.75%、95.19%、98.97%，对红霉素耐药性分别为91.98%、87.80%、87.01%、83.51%，另MRCNS对氧氟沙星耐药性达84.13%，其研究结果与本研究基本一致，也佐证了本次耐药性分析结果。

综上所述，目前常见感染致病菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌等，对各类抗菌药物的耐药性不一，应加强细菌耐药性监测，以指导临床合理用药。