高效液相色谱法测定头孢呋辛赖氨酸原料药的含量

毛 新

（吉林省药品检验所化学室，吉林 长春 130033）

头孢呋辛是临床常用的二代头孢类抗菌素，具有广谱的抗菌作用。头孢呋辛对于革兰氏阴性菌导致的呼吸系统感染、生殖系统感染以及皮肤、软组织感染等疾病中应用广泛。且相较于头孢呋辛钠而言，头孢呋辛赖氨酸具有溶解度高、稳定性好的特点。虽然头孢呋辛赖氨酸在临床用途良多，但是关于其原料药测定的相关报告却比较少[1]。本次研究中采用HPLC测定头孢呋辛赖氨酸原料药的含量，为评价其品质和质量控制提供依据，现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

安捷伦的Agilent 1100型高效液相色谱仪、G1314A检测器以ChemStations色谱数据工作站，梅特勒-托利多公司的AB135s电子天平。

1.2 试药

头孢呋辛赖氨酸原料药由深圳清大中生物科技有限公司提供，批号：20180415、20180838、20180927。头孢呋辛对照品由中国食品药品检定研究院提供，批号：130739-201811。冰醋酸和乙腈为色谱纯，醋酸钠为分析纯，水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

选用Kromasil C8（4.6 mm×250 mm×5 μm）色谱柱，流动相选择84:16的醋酸盐缓冲液（0.68 g醋酸钠+5.8 g冰醋酸+1 L水，PH调整为3.4）-乙腈溶液，检测波长275 nm。柱温设定35℃。

2.2 溶液制备

2.2.1 对照品溶液制备

称取适量的头孢呋辛对照品加入100 mL量瓶，使用水溶解并稀释至刻度，摇匀制备成1 ml含0.5 mg头孢呋辛的对照品储备液。

2.2.2 供试品溶液制备

取50 mg的头孢呋辛赖氨酸原料药样品，加入100 mL量瓶中，在110℃条件高温水浴2 h，加水进行溶解定容后即得供试品溶液。

2.3 系统适应性考察

分别吸取20 μL的对照品溶液和头孢呋辛赖氨酸原料药供试品溶液，在同样色谱条件进行进样测定，结果显示头孢呋辛赖氨酸的主峰保留时间在9.2 min，理疗塔板数在3000以上。

2.4 线性关系考察

分别精密量取对照品储备液1、2、4、6、8、10 mL加至100 ml量瓶中，加入水稀释至刻度并摇匀。分别取样20 μL注入色谱仪测定。以峰面积为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线经得到头孢呋辛赖氨酸的线性回归方程为Y=150471.35X-2674.62，在0.00192～0.03815 mg/mL浓度内呈良好的线性关系（r=0.99995）。

2.5 稳定性试验

将供试品溶液在室温下放置0、2、4、6、8、12 h后，依次进行加样并测定峰面积。头孢呋辛赖氨酸峰面积变化小，RSD为1.37%，稳定性较好。

2.6 精密度试验

精密量取头孢呋辛赖氨酸对照品溶液20 μL，在相同色谱条件下连续进行测定6次，结果峰面积无明显变化，RSD为1.29%，精密度良好。

2.7 重复性试验

重复称取20180838批号的头孢呋辛赖氨酸供试品6份，1 g/份，制成6份供试品溶液，分别进行进样测定峰面积，RSD为1.03%，重复性佳。

2.8 加样回收实验

精密称取20180838批号的头孢呋辛赖氨酸供试品6份，1 g/份，分别加入头孢呋辛对照品适量，其含量为供试品已知含量的80%、100%、120%，制备成加样回收供试品溶液并进行加样测定计算加样平均回收率，结果为98.92%(RSD=0.97%）。

2.9 样品含量测定

分别精密称取1 g三个不同批号的头孢呋辛赖氨酸供试品，制备成三份供试品溶液，进样测定三批头孢呋辛赖氨酸的含量，结果平均含量分别为97.53%、96.86%、99.02%，RSD分别为1.07%、1.12%、1.14%。

3 讨 论

头孢呋辛属于二代头孢类抗菌素，在感染性疾病的临床治疗中应用广泛。而头孢呋辛赖氨酸是一种新型的头孢呋辛盐，稳定性更好。本次研究对头孢呋辛赖氨酸原料药的含量采用HPLC法进行测定。经对头孢呋辛对照组品溶液在不同波长处进行扫描，发现波长275 nm处最为最大吸收波长，故设此为检测波长。经过对比不同流动相条件下，头孢呋辛赖氨酸原料药供试品的色谱法分离情况、头孢呋辛的保留时间和理论板数的对比，发现84:16的醋酸盐缓冲液-乙腈溶液作为流动相的效果最佳[2]。本次实验中应用HPLC法测定头孢呋辛赖氨酸原料药含量，结果准确，重复性佳，可用作其质量控制方法。