格列齐特缓释片的制备及体外释放研究

刘正平 ，杨雪华 ，陈倩倩，毛楷凡 ，薛 松 ，李大伟 ,

（1. 山东省药学科学院 新型缓控释制剂与药物靶向递送系统山东省工程研究中心，山东 济南 250101；2. 山东省化学药物缓释制剂工程技术研究中心，山东 济南 250101；3. 国家药监局药物制剂技术研究与评价重点实验室，山东 济南 250101）

2019年国际糖尿病联盟（IDF）发布的全球糖尿病地图（第9版） 显示，2019年全球约4.63亿20～79岁成人患糖尿病（11个人中有1个为糖尿病患者）。糖尿病患者数正以惊人的速度在迅速增长，糖尿病尤其是2型糖尿病目前已成为严重影响人类身心健康的主要公共卫生问题。轻度糖尿病患者可通过饮食控制，坚持运动及控制体重等来控制血糖水平，但血糖控制不良患者需结合口服降糖药或胰岛素来维持足够的血糖水平[1]。我国现阶段所使用的口服降糖药包括双胍类、磺酰脲类、α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷酮类等[2-3]。

格列齐特（gliclaizide）属于第二代磺酰脲类长效口服降糖药物，临床可用于单用饮食疗法不足以控制血糖的非胰岛素依赖型糖尿病（2型）患者的一线用药，也可与其他降血糖药物一起或与胰岛素配伍使用[4]。口服后2～6 h血药浓度达高峰，t1/2约10～12 h，主要由肾排出。对成年型糖尿病人有降血糖作用，能降低血小板黏附力，降低血浆比黏度，减少ADP诱导的血小板聚集，改善甲皱微循环。普通格列齐特片每日服用160 mg，分2次口服，存在使用频次高，临床使用不方便，血药浓度波动大，生物利用度低等问题。将格列齐特制备成缓释片，临床使用具有缓慢释放，减少患者服药量和服药次数，血药浓度相对稳定，从而提高患者用药安全性和依从性。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent 8454 UV-Vis分光光度计（美国安捷伦公司）；G10实验型湿法混合制粒机（深圳市信宜特科技有限公司）；ZP10A型旋转压片机（北京国药龙力科技有限公司）；YD-20KZ片剂硬度仪（天津市天大天发科技有限公司）；Logan 860DL溶出自动取样系统[禄根仪器（镇江）有限公司]；Seven Excellence pH计[梅特勒托利多仪器（上海）有限公司]。

1.2 试药

格列齐特原料药（浙江九州药业有限公司，批号：14W18091501）；格列齐特对照品（中国食品药品检定研究院，批号：1969-9701）；羟丙甲纤维素K4M（HPMC K4M，上海卡乐康包衣技术有限公司，批号：PDR480737）；羟丙甲纤维素K100LV（HPMC K100LV，上海卡乐康包衣技术有限公司，批号：PDR484708）；二水磷酸氢钙（德国瑞登梅尔父子公司，批号：18J/225-P2X）；麦芽糊精（连云港ROQUETE公司，批号：1642C）；二氧化硅（SH-CD1，安徽山河药用辅料有限公司，批号：181206）；硬脂酸镁（SH-YM-M，安徽山河药用辅料有限公司，批号：190126）；格列齐特缓释片[达美康，施维雅（天津）制药有限公司，规格：30 mg，批号：2013982]。

2 方法与结果

2.1 格列齐特缓释片的制备

称取处方量格列齐特、二水磷酸氢钙、麦芽糊精、羟丙甲纤维素于湿法混合制粒机中，开启搅拌和剪切，混匀物料；再向湿法混合制粒机中加入纯化水制软材，过20目筛制粒；将湿颗粒置60 ℃烘箱中干燥，过20目筛整粒，加入处方量的二氧化硅和硬脂酸镁，混匀，压片，即得，每片含主药30 mg。

2.2 格列齐特缓释片释放度测定方法

依据《中国药典》2020年版四部通则0931溶出度与释放度测定法第二法[5]，以900 ml pH 7.4磷酸盐缓冲液作为溶出介质，转速为100 r/min，温度为（37±0.5）℃。依法操作，于2，4，6，8，10 h和12 h分别取溶液10 ml，经0.45 μm滤膜滤过，并及时补液10 ml，弃去初滤液，取续滤液适量，以溶出介质稀释至一定浓度，作为供试品溶液。另精密量取格列齐特对照品约13.00 mg，置500 ml量瓶中，加乙腈5 ml振摇使溶解后，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置10 ml量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。取供试品溶液和对照品溶液，照《中国药典》2020年版四部通则0410紫外-可见分光光度法[5]在228 nm和290 nm波长处分别测定吸收度，求出二者之差，分别计算格列齐特的累积释放度。

2.3 制备工艺研究

缓释片释药行为的重要影响因素包括缓释材料的种类、型号、用量，填充剂种类及用量等，其中以缓释材料的遴选和制备工艺的研究尤其重要。本研究以HPMC作为格列齐特缓释片的骨架材料，考察不同型号HPMC组合对缓释片释放度的影响；在此基础上，对填充剂和润湿剂进行了比较研究，最终确定格列齐特缓释片的处方和制备工艺。

2.3.1 缓释材料HPMC的影响 本研究选择不同型号的HPMC作骨架缓释材料，保持缓释材料总用量20 %，设计5个方案，分别考察单独使用HPMC K4M或HPMC K100LV，及HPMC K4M与HPMC K100LV的比例为1:3，1:1，3:1时的释放度，试验方案见表1，结果见图1。

表1 缓释骨架材料的选择

图1 缓释材料种类及比例对缓释片释放度的影响

按《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》[6]中非模型依赖相似因子（f2）方法，对自制样品和参比制剂的释放度进行对比研究，结果见表2。

表2 自研产品相似性分析

实验结果表明，保持处方中缓释材料总量不变，HPMC黏度对缓释片释药速率有明显影响。HPMC分子量越大，其黏度越大，药物释放越慢；不同黏度的HPMC进行组合，可以调整其释放度。HPMC K4M和HPMC K100LV比例（1:1），制得的格列齐特缓释片与参比制剂累积释放曲线相似。故最终确定二者比例为1:1。

2.3.2 填充剂用量的影响 固定处方其他辅料的用量不变，分别考察加入二水磷酸氢钙（60 %）、糊精（60 %）、二水磷酸氢钙（50 %）/糊精（10 %）合用时对样品释放度的影响。设计了3个方案，对自制样品和参比制剂的释放度进行了对比研究。结果见表3，图2。

表3 填充剂的选择

图2 填充剂种类对缓释片释放度的影响

采用相似因子法进行相似性判定，结果见表4。

表4 自研产品相似性分析

实验结果表明，填充剂种类对药物释放度略有影响。根据与参比制剂释放度相似性比较，确定填充剂选择二水磷酸氢钙用量为50 %，糊精用量为10 %。

2.3.3 润湿剂的选择 采用湿法制粒工艺，分别选用纯化水、50 %乙醇溶液、70 %乙醇溶液进行湿法制粒，对制得的颗粒性状及片剂的释放度进行考察。方案见表5，结果见表6，表7。

表5 润湿剂的选择

表6 不同润湿剂对颗粒性状的影响

图3 润湿剂对缓释片释放度的影响

采用相似因子法进行相似性判定，结果见表 7。

表7 自研产品相似性分析

根据颗粒性状及累积释放度结果，确定采用50 %乙醇溶液作为润湿剂，效果较好。

2.4 自制样品与参比制剂体外释放行为对比

按确定的处方和工艺制备格列齐特缓释片，按2.2项下方法分别测定其在pH 7.4磷酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液、pH 4.5醋酸盐缓冲液和水中的释放度，与参比制剂释放度进行对比，计算其f2分别为78.9，80.1，79.3，82.2。根据《普通口服固体制剂溶出度试验技术指导原则》，非模型依赖相似因子f2值高于50 时，可认为两条曲线具有相似性，故自制样品与参比制剂体外释放相似。

图4 自制格列齐特缓释片在4种溶出介质中释放度测定结果

2.5 释药机制研究

采用模型拟合来判断自制样品与参比制剂的释放机制是否相同，以此判断两者释放行为的相似性，从而为BE试验提供参考。根据优化后的处方，将自制样品和参比制剂的释放度采用零级方程、一级方程、Higuchi 方程进行曲线拟合，根据相关系数（r）判断其拟合程度，r2越大，拟合效果越好。释药曲线拟合结果见表8。

由表8可见，自制样品与参比制剂的释药曲线均符合Higuchi方程，且相关系数的r2最大，说明自制格列齐特缓释片与参比制剂体外释放均以Higuchi 扩散为主，两者释药机制相同。

表8 释药曲线拟合结果

3 讨论

HPMC是缓释制剂中理想的水凝胶骨架材料，高黏度HPMC可作为亲水凝胶骨架缓释片的阻滞剂，低黏度HPMC可用作缓释片剂致孔剂，用于缓释、控释制剂，可延长有效药物浓度平台期，增加药效持续时间。HPMC遇水时水化形成凝胶层，凝胶扩散、溶蚀后释放药物，从而达到缓释、控释目的[7]。

以HPMC为缓释骨架材料，采用湿法制粒压片的格列齐特缓释片释放机制研究结果表明，HPMC种类和用量对格列齐特缓释片体外释放速率影响显著，其体外释放符合Higuchi方程。

自制格列齐特缓释片最佳处方和制备工艺为：HPMC K4M和K100LV的比例为1:1， 二水磷酸氢钙用量为50 %，糊精用量为10 %，润湿剂为50 %乙醇溶液，湿法制粒。制备的格列齐特缓释片在pH 7.4磷酸盐缓冲液、pH 6.8磷酸盐缓冲液、pH 4.5醋酸盐缓冲液及水4种释放介质中的相似因子f2均大于70，与参比制剂体外释放行为相似。