多指标综合加权评分法结合正交试验优选参仁安神无糖颗粒的制备工艺

陈 程，东泳杉，闫梦茹，罗国平，李伟泽,

（1. 西安医学院 药学院，陕西 西安 710021；2. 江苏微纳医药科技有限公司，江苏 扬中 212218）

参仁安神颗粒（Shenren Anshen Granules，SRG）来源于临床经验方剂，由西洋参、酸枣仁、莲子心、甘草四味药材组成，方中君药为西洋参，臣药为酸枣仁，具有补气养阴、宁心安神的功效。该方以汤剂长期应用于临床，效果良好。但汤剂存在一定的不足之处，一是临时煎煮使用不便，二是口感差，三是质量不稳定不易保存[1-3]。因此拟开发为颗粒剂，可保持传统汤剂的特点，且服用量减小，安全有效，质量可控[4-6]。本文将方中西洋参全粉入药，酸枣仁、莲子心、甘草三味药采用煎煮法进行提取，选取煎煮时间、煎煮次数、加水倍量为考察因素，以酸枣仁总皂苷含量和干膏得率为评价指标，采用正交试验法优选提取工艺。按优选提取工艺条件得到煎煮液，将煎煮液浓缩至浸膏，将方中西洋参细粉加入得到稠膏。以药辅比例（稠膏:辅料）、混合辅料比例、乙醇浓度为考察因素，以外观评价、颗粒合格率、颗粒休止角、颗粒吸湿性和颗粒堆密度为评价指标，采用正交试验法优选成型工艺。

1 仪器与试药

1.1 仪器

UV-2012PSC型紫外可见分光光度计（尤尼柯仪器有限公司）；ACC22104电子天平（北京赛多利斯科学仪器有限公司）；DZKW-D-2型水浴箱（北京市永光明医疗仪器厂）；KQ3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DHG9140B型电热鼓风干燥箱（上海安亭科技仪器有限公司）。

1.2 试药

处方中药材均购自陕西诚合药业有限公司并由中药教研室教师鉴定；酸枣仁皂苷A对照品（上海源叶生物科技有限公司，批号：20210433）；淀粉，糊精（安徽山河药用辅料有限公司）；木糖醇（山东福田药业有限公司）；乙醇（食品级）；水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 酸枣仁总皂苷的含量测定

2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取酸枣仁皂苷A 2.5 mg，置于10 ml量瓶，加甲醇配制成浓度为0.25 mg/ml的对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液的制备 称取处方量酸枣仁、莲子心和甘草，加适量水，煎煮，将水煎液浓缩至50 ml，采用水饱和正丁醇多次萃取，合并正丁醇层，用甲醇定容至10 ml，摇匀，作为供试品溶液。

2.1.3 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 ml，分别置于10 ml量瓶中，水浴挥干溶剂，分别加入5 %香草醛冰醋酸溶液0.2 ml，再加入高氯酸溶液0.8 ml，60 ℃水浴加热15 min，取出，立即冰浴冷却10 min，加冰醋酸5 ml，摇匀，随行试剂为标准空白，采用紫外分光光度计于540 nm处测定吸光度。以对照品量（X）为横坐标，吸光度（Y）为纵坐标绘制标准曲线，计算回归方程：Y=0.974X+0.1112（r=0.9996），结果表明酸枣仁总皂苷在0.025～0.125 mg范围内线性关系良好。

2.1.4 样品含量测定 准确吸取适量供试品溶液，按2.1.3项下方法操作，测定吸光度值，并计算酸枣仁总皂苷含量（mg/g）。

2.2 干膏得率的测定[7]

按处方量称取药材，采用水煎煮法提取，将水煎液浓缩至50 ml，精密吸取浓缩液10 ml至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干并于105 ℃干燥6 h，将其置于干燥器中冷却1 h，迅速称重，按下式计算干膏得率。

式中，W为浸膏质量，M为药材质量。

2.3 提取工艺的考察[8-10]

根据预实验结果和文献资料，本次试验中以加水倍数（A）、煎煮次数（B）、煎煮时间（C）为考察因素，分别选取3个水平，按L9（34）正交表进行试验。因素水平表见表1，正交试验结果见表2，方差分析见表3。

表1 因素水平表

表2 L9（34）正交表及试验结果

表3 方差分析

由正交试验结果和方差分析可知，影响因素主次为B＞C＞A，其中B（煎煮次数）、C（煎煮时间）因素对试验结果有显著性影响。综合考虑，确定最佳组合为A1B2C3，即6倍量水煎煮2次，每次90 min。称取处方量药材，按最佳组合提取3份，经计算平均酸枣仁总皂苷含量为19.11 mg/g，干膏得率为15.32 %（n=3）。

2.4 成型工艺的研究

2.4.1 颗粒的制备 按上述最优提取工艺，称取处方量酸枣仁、莲子心和甘草，煎煮，煎煮液浓缩至相对密度1.12～1.15（80 ℃）浸膏，将西洋参粉碎过80目筛，加入浸膏中混合均匀，即得稠膏，备用。按试验设计称取各物料，混合，过14目筛制湿颗粒，60 ℃烘干2 h，整粒，即得。

2.4.2 颗粒评价指标 查阅文献[11-13]，选取外观评价、颗粒合格率、颗粒休止角、颗粒吸湿性和颗粒堆密度5个参数，采用多指标综合加权法进行颗粒成形工艺的评价，权重系数分配和综合评分计算结果见表4。

表4 颗粒评分标准

2.4.2.1 外观评价 以10分制为标准对颗粒的均匀度、色泽进行外观评价。

2.4.2.2 颗粒合格率 按《中国药典》2020年版四部[14]0104颗粒项下粒度检查方法测定，筛选合格颗粒（能通过1号筛而不通过5号筛的颗粒为合格颗粒）。合格率（%）=合格颗粒质量/总颗粒质量×100。

2.4.2.3 颗粒休止角 采用固定漏斗法[15]进行测定，计算休止角（α）。

2.4.2.4 颗粒吸湿性（率） 取干燥且恒定质量的称量瓶，置于盛有NaCl过饱和溶液的干燥器中。取约0.5 g样品颗粒，精密称定（M1）后平铺于扁形称量瓶。称量瓶盖打开放于干燥器，恒温恒湿（25 ℃，相对湿度 75 %）条件下吸湿至质量不变时，称定颗粒质量M2。吸湿性=（M2-M1）/M1。

2.4.2.5 颗粒溶化率 取合格颗粒5 g，加热水100 ml，搅拌5 min，离心5 min，取上清20 ml，置于恒定质量蒸发皿中，水浴蒸干，60 ℃真空干燥至恒定质量，称重并计算溶化率，溶化率=溶化颗粒质量/颗粒质量。

2.4.3 成型工艺的考察[16]以药辅比例（A，稠膏:辅料）、混合辅料比例（B，木糖醇:糊精）、乙醇浓度（C）为考察因素，根据预试验结果分别选取3个水平，按L9（34）正交表进行试验。因素水平见表5，正交试验结果见表6，方差分析见表7。

表5 因素水平表

表6 L9（34）正交表及试验结果

表7 方差分析

由正交试验结果和方差分析可知，影响因素主次为B＞A＞C，即其中A（药辅比例）、B（混合辅料比例）因素对试验结果有显著性影响。综合考虑，确定最佳组合为A3B2C1，即药辅比例（稠膏:辅料）1:2，混合辅料比例（木糖醇:糊精）1:1.3，以75 %乙醇为润湿剂制软材（手握成团，触之即散），过14目筛制湿颗粒，60 ℃烘干2 h，整粒。按最佳组合制备颗粒3份。本品为淡黄色颗粒，色泽一致，颗粒大小均匀，无吸潮结块现象，经计算平均颗粒合格率为92.1 %，吸湿率为7.88 %，休止角30.12°（n=3），颗粒熔化率为92.28 %。

3 讨论

参仁安神颗粒以汤剂长期应用于临床，但存在一定的不足之处，因此拟开发为颗粒剂。从方中各药味的理化性质、药理作用和节省辅料等方面考虑，本研究将方中君药西洋参全粉入药，其余3味药水煎煮并浓缩至浸膏，采用部分药材细粉与稠浸膏混合湿法制粒。酸枣仁为本方臣药，考虑到中药成分多、靶点多的特点，选取酸枣仁总皂苷和干膏得率为提取工艺的评价指标。颗粒剂的成型工艺考察，立足于该疾病发病的年龄特点，考虑该人群可能存在高血糖症，故选择无糖型辅料；另本文充分考虑到单一采用颗粒合格率作为成型工艺评价指标的缺点，选择颗粒合格率、颗粒休止角、颗粒吸湿性和颗粒堆密度物理属性参数作为评价指标，采用多指标综合加权法对成型工艺进行评价。