尾穗苋体外细胞毒活性成分的研究

刘贤贤，覃丽清，张 业，刘玮欣，何瑞杰

（1. 桂林师范高等专科学校，广西 桂林 541199；2. 桂林医学院，广西 桂林 541100；3. 神州细胞工程有限公司，北京 100041；4. 广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所 广西植物功能物质与资源持续利用重点实验室，广西 桂林 541006）

尾穗苋（Amaranthus caudatusL.）为苋科（Amaranthaceae）苋属（AmaranthusL.）一年生草本植物，具有药食两用的特性，在我国大部分地区均有种植。尾穗苋营养丰富[1-2]，同时因其富含黄酮[3]、有机酸[4]、多糖[5]等化学成分而具有抗氧化[3,6-7]、抗肿瘤[8]、增强免疫力[9]等作用。为充分发掘该植物的药食两用价值，本研究以尾穗苋为研究对象，分别用不同溶剂对尾穗苋进行提取，分离出单体化合物，单体化合物的结构经多种核磁共振谱、熔点及高分辨质谱数据鉴定，随后采用MTT法研究单体化合物的细胞毒活性，以冀为尾穗苋的进一步研究开发提供支持。

1 仪器与材料

1.1 仪器

M1000酶标仪（Tecan公司）；KQ5200DE 型数控超声波清洗器，FB224自动内校电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪器）；RE2000B旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器）；ZF-8型暗箱四用紫外分析仪（上海嘉鹏科技）；500 MHz Bruker Avance Ш HD核磁共振波谱仪（瑞士布鲁克公司）；依利特P270半制备高效液相（大连依利特）；MAT 95XP高分辨质谱（美国Thermo）；SP-MAX3500FL多功能荧光酶标仪（上海闪谱）。

1.2 材料

尾穗苋全草由贵州省特色生物科技有限公司提供，经广西植物研究所韦发南研究员鉴定为苋科苋属植物尾穗苋（Amaranthus caudatusL.），标本（编号：20120926）被保存于桂林师范高等专科学校化学系实验室。RPMI Medium 1640，胎牛血清，DMEM（Gibco）；噻唑蓝（Sigma-Aldrich）；甲醇，乙醇，石油醚，乙酸乙酯，正丁醇，二甲基亚砜（分析纯，西陇化工）；5-氟尿嘧啶（上海阿拉丁）。

1.3 细胞

肝癌SMMC-7721细胞，HepG2细胞（中科院细胞研究所）。

2 方法

2.1 提取与分离

称取干燥尾穗苋200 g，粉碎，分别以甲醇、70 %乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水为提取溶剂，在温度为50～55 ℃，频率为80～100 Hz条件下超声提取，第一次超声提取2 h，料液比为1:3，第二，三次物料比超声提取1 h，物料体积比为1:2，合并三次提取液并减压浓缩，得各溶剂粗提物，提取率分别为：16 %，26 %，12.5 %，14 %，15 %，12 %。

取干燥的尾穗苋粉末1 kg，分别用70 %乙醇超声提取3次，提取的条件为：温度50～55 ℃，频率80～100 Hz，第一次用3 L 70 %乙醇超声提取2 h，第二、第三次用2 L 70 %乙醇超声提取1 h，一共提取3次，合并3次的提取液，浓缩，得浸膏145 g。随后取140 g浸膏上大孔树脂D101（10.0 cm×50.0 cm），以乙醇-水（0:100，10:90，40:60，70:30，100:0，v/v）为流动相进行洗脱，得到5个组分Fr-1～Fr-5。组分Fr-3（52 g）用少量甲醇溶解，55 g硅胶（100目）拌样，过硅胶柱层析（500 g，200～300目，6.0 cm×50.0 cm），依次用氯仿-甲醇（l00:0～100:50，v/v）常压下进行梯度洗脱，合并相同流份，得到10个亚组分Fr-3-1～Fr-3-10。Fr-3-3部分（4.9 g）过聚苯乙烯基反相树脂（MCI）层析柱（3.0 cm×20.0 cm），用甲醇-水（0:100～100:0）梯度洗脱，得到Fr-3-3-1～Fr-3-3-10亚组分。Fr-3-3-1（1.1 g）通过半制备液相（Amethyst，10 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-水（20:80～30:70，v/v；流速2 ml/min）洗脱，得化合物4（tR= 20.5 min，16.0 mg）和10（tR=30.5 min，1.2 mg）。再将Fr-3-3-2（1.3 g）通过半制备液相，以甲醇-水（20:80～16:84，流速2 ml/min）洗脱，得化合物3（tR=23.1 min，10.0 mg）和化合物5（tR=25.8 min，24.1 mg）。Fr-3-4（5.1 g）过MCI柱（3.0 cm×20.0 cm），用甲醇-水（0:100～100:0）梯度洗脱，得Fr-3-4-1～Fr-3-4-10亚组分。Fr-3-4-4（1.8 g）通过半制备液相，以甲醇-水（45:55，v/v，流速2 ml/min）洗脱，再上凝胶色谱柱，以氯仿-甲醇（7:3）洗脱，得化合物1（9.0 mg）、化合物2（6.1 mg）。Fr-3-4-6（2.1 g）上半制备液相，以甲醇-水（60:40～70:30，v/v；流速2 ml/min）洗脱，得化合物6（tR=10.5 min， 1.6 mg）、7（tR32.5 min， 1.4 mg）、8（tR=24.5 min， 1.8 mg）、9（tR=26.2 min， 1.1 mg）。

2.2 体外细胞毒活性实验

用胰蛋白酶消化80 %～90 %汇合度的单层细胞，将细胞收集到含血清的培养基中。离心细胞悬液，使细胞沉积下来，用培养基重悬细胞。将细胞稀释至2.5×104～50×104个/ml，向96孔板中加入180 μl/孔细胞悬液。将培养板放至培养箱，于5 % CO2、37 ℃ 湿润环境中温育24 h，细胞进入指数生长期时加入药物。

将对数生长期细胞按5×107个/L的密度，接种于96孔板，每孔180 μl。细胞贴壁后，分为阴性对照（等量RPMI-1640）组、阳性药组（5-氟尿嘧啶，10-4mol/L）、5个10倍梯度（0.01，0.1，1.0，10，100 μg/ml）的药物样品组和溶媒对照（含0.5 %乙醇的RPMI-1640）组。每组设5个平行孔。各孔加入相应药物20 μl。于结束培养48 h前4 h加入5 g/L MTT溶液，20 μl/孔。结束培养后，吸上清弃去，加入DMSO，200 μl/孔，待细胞内生成的蓝紫色甲臢完全溶解后，用酶标仪于570 nm处检测各孔的光密度（optical density，OD）值。重复实验3次。

先用100% DMSO助溶药物，然后用无血清高糖DMEM将药物稀释，制备4个药物浓度（使助溶剂DMSO最终浓度为1 %），阴性对照为无血清高糖DMEM（含1%DMSO），阳性对照为5-氟尿嘧啶，所设药物浓度同药物组（均含1 % DMSO），每个浓度重复3孔。细胞贴壁，长至50 %～60 %汇合度时加入20 μl药物，各浓度重复3孔。药物作用48 h后，去除各孔中的培养基（目的是避免药物本身颜色干扰），每孔加入200 μl新鲜的培养基，同加入浓度为5 mg/ml的 MTT 20 μl/孔，于37℃湿润环境中温育4 h，然后弃去孔中的培养基，加入150 μl DMSO，以溶解甲臜结晶，振荡摇匀，10 min内在490 nm处记录吸光值。

按下列公式计算细胞抑制率，用Graphpad Prism 5.0计算IC50值。

抑制率（%）=[（阴性对照孔OD值-实验孔OD值）/阴性对照孔OD值]×100

所得数据以IC50±SD表示，采用单因素方差分析进行组间比较。设定P＜0.05时，具有统计学意义。

2 结果与分析

从尾穗苋70%乙醇提取物中分离鉴定了10个化合物，其结构见图1，其中化合物1～5为首次从该植物中分离到。化合物2对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721具有较强的体外抗肿瘤细胞毒活性。

图1 化合物1～10的化学结构

2.1 化合物结构鉴定

化合物1：黄色晶体（甲醇-水），mp 255～256 ℃，微溶于甲醇，难溶于水。紫外灯（254～365 nm）照射下显黄色，喷AlCl3荧光变成黄绿色，故推断其为黄酮类化合物。HR-ESI-MSm/z：447.0930 [MH]-，结合碳谱数据推断其分子式为C21H20O11。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：6.43（1H，s，H-2），6.73（1H，d，J=2 Hz，H-6），6.79（1H，d，J=2 Hz，H-8），7.40（1H，d，J=2.4 Hz，H-2’），6.88（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），7.44（1H，dd，J=8.4，2.4 Hz，H-6’），12.95（s，5-OH），5.06（1H，d，J=8.8 Hz，H-Glc-1），3.25～3.70 [6H，m，H-Glc-（2-6）]。13C NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：182.0（C-4），164.5（C-7），163.0（C-2），161.1（C-5），156.9（C-9），149.9（C-4’），145.8（C-3’），121.4（C-1’），119.2（C-6’），116.1（C-5’），113.6（C-2’），105.3（C-3），103.2（C-10），99.9（C-Glc-1），99.5（C-6），94.7（C-8），77.2（C-Glc-4），76.4（C-Glc-3），73.1（C-Glc-2），69.5（C-Glc-5），60.6（C-Glc-6）。以上数据与文献[10]中的数据基本一致，故鉴定该化合物1为木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物 2：黄色晶体（甲醇-水），m p 198～199 ℃，溶于甲醇-氯仿，难溶于水，在紫外灯（254 nm）照射下显黄色，喷AlCl3荧光变成黄绿色，故判断其为黄酮类化合物。HR-ESIMSm/z：285.0401[M-H]-，结合碳谱数据推断其分子式为C15H10O6。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：7.42（1H，dd，J=8.4，2.3 Hz，H-6’），7.39（1H，d，J=2.3 Hz，H-2’），6.89（1H，d，J=8.4 Hz，H-5’），6.44 （1H，d，J=1.6 Hz，H-8），6.17（1H，d，J=1.6 Hz，H-6），6.69（1H，s，H-3）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：181.7（C-4），164.1（C-2），163.9 （C-7），161.5（C-9），157.3（C-5），149.7（C-4’），145.7（C-3’），121.5（C-1’），119.0（C-6’），116.0（C-5’），113.4（C-2’），103.7（C-10），103.7 （C-3），98.8（C-6），93.8（C-8）。以上数据与文献[11]中数据基本一致，故鉴定该化合物2为木犀草素。

化合物3：无色晶体（氯仿-甲醇），m p 270～271 ℃，溶于DMSO，甲醇，难溶于乙醇。HR-ESI-MSm/z：136.0620 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C5H5N5。1H NMR（500 MHz，DMSO-d6）δ：7.08（2H，br s，NH2），8.09（2H，br s，H-3，6），12.80（1H，br s，NH）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ： 139.3（C-4，5），152.4（C-3，6），155.3（C-8）。以上数据与文献[12]报道一致，故鉴定化合物3为1H-咪唑并[4,5-D]哒嗪-2-胺。

化合物4：白色晶体（甲醇-水），mp 167～168 ℃，溶于DMSO，甲醇，难溶于水。HR-ESI-MSm/z：245.0770 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C9H12N2O6。1H NMR （500 MHz，DMSO-d6）δ：3.49-4.00 [5H，m，H-Rib-（2’-5’）]，7.83（1H，d，J=8.1 Hz，H-6），5.81（1H，d，J=4.5 Hz，H-1’），5.64（1H，d，J=8.1 Hz，H-5）。13C NMR（125 MHz，DMSO-d6）δ：163.3（C-4），150.9 （C-2），140.8（C-6），101.8（C-5），87.8（C-Rib-1’），84.9（C-Rib-4’），73.7 （C-Rib-3’），70.0（C-Rib-2’），61.0（C-Rib-5’）。以上数据与文献[13]报道一致，故鉴定化合物4为尿嘧啶核苷。

化合物5：白色晶体（氯仿-甲醇），m p 188～189 ℃，易溶于热水、甲醇，难溶乙醇等有机溶剂。HR-ESI-MSm/z：243.0979 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C10H14N2O5。1H NMR（500 MHz，D2O）δ：7.64（1H，s，H-3），6.28（1H，t，J=6.8 Hz，H-6），1.88（3H，s，H-7），4.47（1H，m，H-1’），4.00 （1H，m，H-2’），3.82（1H，m，H-3’），3.76（1H，m，H-4’），2.28（2H，m，H-5’）。13C NMR（125 MHz，D2O）δ：166.6（C=O），151.8（C=O），137.5（C-6），111.5（C-5），86.5（C-1’），85.1（C-3’），70.5（C-2’），61.2（C-4’），38.5（C-5’），11.6（C-7）。以上数据与文献[14]报道的一致，故鉴定化合物5为2-脱氧胸腺嘧啶核苷。

化合物6：白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：649.3581 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C35H52O11。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-27），1.31（3H，s，Me-25），1.42 （3H，s，Me-24），3.62（1H，d，J=3 Hz，H-3α），4.12（1H，m，H-2α），5.40（1H，m，H-12），4.65（2H，br s，=CH2），5.39（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’）。13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：44.8（C-1），70.7（C-2），77.5（C-3），54.1（C-4），52.0（C-5），21.8（C-6），33.5（C-7），41.1（C-8），48.0（C-9），37.5（C-10），24.1（C-11），124.2（C-12），144.5（C-13），41.1（C-14），28.8（C-15），24.5（C-16），48.0（C-17），47.8（C-18），43.0（C-19），149.5 （C-20），30.9（C-21），38.5（C-22），177.0（C-23），13.7（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.5（C-27），177.3（C-28），107.5（C-29），95.8 （C-Glc-1’），73.9（C-Glc-2’），78.7 （C-Glc-3’），71.0 （C-Glc-4’），78.3（C-Glc-5’），62.4（C-Glc-6’）。以上数据与文献[15]报道一致，故鉴定化合物6为2β, 3β-二羟基-30-降冰油烷-12, 20（29）-二烯-23, 28-二甲酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯。

化合物7： 白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：781.4735 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C42H68O13。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），0.88（3H，s，Me-24），0.95（3H，s，Me-30），0.97（3H，s，Me-29），0.99（3H，s，Me-23），1.11（3H，s，Me-25），1.19（3H，s，Me-27），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：4.46（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：39.6（C-1），26.7（C-2），90.7（C-3），40.6（C-4），56.7（C-5），19.3（C-6），33.1（C-7），40.1（C-8），48.0（C-9），37.7（C-10），24.4（C-11），123.6（C-12），144.8（C-13），42.6（C-14），28.2（C-15），26.2（C-16），47.8（C-17），42.3（C-18），47.2（C-19），31.5（C-20），34.7 （C-21），33.2（C-22），28.2（C-23），16.4（C-24），16.7（C-25），17.7（C-26），26.1（C-27），178.3（C-28），33.5（C-29），23.8（C-30），C-3位上糖基片段碳的化学位移δ：105.8（C-1’），73.8（C-2’），78.5（C-3’），71.6（C-4’），78.1（C-5’），62.4（C-6’），C-28位上糖片段碳的化学位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），78.8（C-3’’），71.4（C-4’’），78.3（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上数据与文献[15]报道一致，故鉴定化合物7为齐墩果酸3-O-β-D-葡萄糖苷-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。

化合物8： 白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：797.4681[M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C42H68O14。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ：0.94（3H，s，Me-30），1.01（3H，s，Me-26），1.04（3H，s，Me-29），1.18（3H，s，Me-24），1.20（3H，s，Me-23），1.28（3H，s，Me-27），1.34（3H，s，Me-25），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），3.61（1H，d，J=3 Hz，H-3α），4.14 （1H，m，H-2α），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：4.44（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD） δ：44.6（C-1），70.1（C-2），91.2（C-3），39.3（C-4），56.7（C-5），19.3（C-6），33.1（C-7），39.5（C-8），47.5（C-9），37.7（C-10），24.4（C-11），123.4（C-12），144.7（C-13），42.7（C-14），28.4（C-15），25.2（C-16），47.6（C-17），42.3（C-18），46.2（C-19），31.5（C-20），34.7（C-21），33.6（C-22），28.9（C-23），16.4（C-24），17.4（C-25），17.6（C-26），26.1（C-27），178.3（C-28），33.2（C-29），23.7（C-30），C-3位上糖片段碳的化学位移δ： 105.8（C-1’），73.7（C-2’），78.4（C-3’），71.6（C-4’），78.0（C-5’），62.4 （C-6’），C-28位上糖片段碳的化学位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），78.8 （C-3’’），71.4（C-4’’），78.3（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上数据与文献[15]报道一致，故化合物8被鉴定为2β-羟基齐墩果酸3-O-β-D-葡萄糖苷-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯苷。

化合物9：白色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMSm/z：827.4423 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C42H68O14。1H NMR （500 MHz，CD3OD）δ：0.84 （3H，s，Me-26），1.22（3H，s，Me-27），1.31（3H，s，Me-25），1.42（3H，s，Me-24），0.95（3H，s，Me-30），0.97（3H，s，Me-29），2.89（1H，dd，J=13.7，5 Hz，H-18），5.29（1H，m，H-12），C-3位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：4.44（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），C-28位上糖片段端头碳质子的化学位移δ：5.42（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’’）。13C NMR（125 MHz，CD3OD） δ：44.7（C-1），70.6（C-2），77.4（C-3），54.1（C-4），52.0（C-5），21.8（C-6），33.5（C-7），41.1（C-8），48.0（C-9），37.5（C-10），24.4（C-11），123.6（C-12），144.8（C-13），42.6（C-14），28.2（C-15），26.2（C-16），47.8（C-17），42.3（C-18），47.2（C-19），31.5（C-20），34.7（C-21），33.2 （C-22），177.0（C-23），13.7（C-24），17.1（C-25），17.7（C-26），26.1 （C-27），178.3（C-28），33.5（C-29），23.8（C-30），C-3位上糖片段碳的化学位移δ： 105.8（C-1’），73.9（C-2’），78.7（C-3’），71.8（C-4’），78.2（C-5’），62.6（C-6’），C-28位上糖片段碳的化学位移δ：95.6（C-1’’），74.9（C-2’’），79.0（C-3’’），71.5（C-4’’），78.6（C-5’’），62.6（C-6’’）。以上数据与文献[15]报道一致，故鉴定化合物9为3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-2β, 3β-二羟油酸-12-烯-23, 28-二甲酸28-O-β-D-吡喃葡萄糖基酯苷。

化合物10：白色粉末，易溶于甲醇。HRESI-MSm/z：387.2016 [M+H]+，结合碳谱数据推断其分子式为C19H30NO8。1H NMR（500 MHz，CD3OD）δ： 2.42 （1H，d，J=15.0 Hz，H-2a），2.22（1H，d，J=15.0 Hz，H-2b），4.52（1H，s，H-4），6.06（1H，d，J=15.5 Hz，H-7），5.62（1H，dd，J=15.5，6.5 Hz，H-8），4.15（1H，q，J=6.0 Hz，H-9），1.35（3H，d，J=6.0 Hz，H-10），1.11（3H，s，H-11），1.05（3H，s，H-12），1.95（3H，s，H-13），4.36（1H，d，J=7.5 Hz，H-Glc-1’），3.26（1H，dd，J=9.5，7.5 Hz，H-Glc-2’），3.42（1H，t，J=9.5 Hz，H-Glc-3’），3.34（1H，t，J=9.5 Hz，H-Glc-4’），3.29（1H，m，H-Glc-5’），4.01（1H，dd，J=12.0，3.2 Hz，H-Glc-6’a），3.62（1H，dd，J=12.0，5.1 Hz，H-Glc-6’b）。13C NMR（125 MHz，CD3OD）δ：36.5（C-1），50.1（C-2），209.1（C-3），73.0（C-4），128.05（C-5），135.00（C-6），125.83（C-7），138.89 （C-8），76.92（C-9），21.22（C-10），30.02（C-11），28.21（C-12），23.50 （C-13），糖片段碳的化学位移δ：103.97（C-Glc-1’），74.72（C-Glc-2’），78.0 （C-Glc-3’），71.51（C-Glc-4’），77.96（C-Glc-5’），62.42（C-Glc-6’）。以上数据与文献[16]报道一致，故鉴定化合物10为3-氧代-α-紫罗兰醇-β-D-吡喃葡萄糖苷。

2.2 尾穗苋粗提取物对SMMC-7721细胞的体外细胞毒活性

检测尾穗苋甲醇提取物、70 %乙醇提取物、石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提取物对SMMC-7721细胞的体外细胞毒活性，结果见表1。

表1 尾穗苋各溶剂提取物对肝癌7721细胞系的细胞毒活性

由表1的结果可见，尾穗苋70 %乙醇提取物对SMMC-7721细胞体外细胞毒活性高于其他溶剂提取物，因此，对尾穗苋70 %乙醇提取物的化学成分进行进一步研究。分离得到的化合物1～5对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721细胞体外细胞毒活性见表2。

表2 化合物1～5对肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721细胞的细胞毒活性

由表2可见，木犀草素（2）对肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721细胞生长有较显著的抑制作用，其IC50值分别为13.36±1.01 μg/ml和16.70±1.15 μg/ml；对照组5-氟尿嘧啶的IC50值分别为22.3±1.35 μg/ml和12.66±0.98 μg/ml。由此可知，木犀草素具有较好的体外肿瘤细胞毒活性，其可能是尾穗苋主要抗肿瘤活性成分之一。

3 讨论与结论

尾穗苋为药食两用植物，有较高的药用价值和经济价值。本文对尾穗苋70 %乙醇提取物的化学成分进行分离鉴定，从中分离到10个化合物，包括黄酮（1和2），生物碱（3～5）、以及萜类（6～10），其中化合物1～5为首次从该植物中分离到。随后对化合物1～5进行体外肿瘤细胞毒活性研究，结果显示木犀草素（2）对人肝癌细胞系HepG2和SMMC-7721有显著的细胞毒活性，其他化合物对以上两种细胞没有细胞毒活性。本研究可为该植物的深入开发利用提供科学依据。