ApoB/ApoA1、25-（OH）D预测原发性胆汁性肝硬化病情的临床意义*

刘欣，延威，赵雨

（河南大学淮河医院 消化内科，河南 开封 475000）

原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis,PBC）是由于长期肝内胆汁滞留引起的，该病多发于女性，早期症状为轻度疲乏、间歇性瘙痒等[1-2]。据相关研究报道，终末期PBC 患者多表现为肝性脑病、腹水、肝衰竭等，需通过肝移植治疗[3]。早期准确评估PBC 患者病情，对患者的临床治疗及预后改善具有重要意义。但目前临床中尚缺乏对PBC 患者病情进行评估的理想生物学指标，亟须进行寻找。

载脂蛋白B（Apolipoprotein B,ApoB）、载脂蛋白A1（Apolipoprotein A1,ApoA1）主要由肝脏、小肠合成，当机体发生肝硬化，肝细胞出现肿胀、变性及坏死，ApoB、ApoA1 合成能力降低，进而致使ApoB/ApoA1 值异常偏高[4]。维生素D 为一种脂溶性类固醇激素前体，在人体中主要以25-羟基维生素D［25-hydroxyvitamin D，25-（OH）D］形式存在；其半衰期长、稳定性高，可反映机体中维生素D 的水平[5]。ApoB/ApoA1、25-（OH）D 在PBC 的发病过程中发挥重要作用，但既往报道未显示ApoB/ApoA1、25-（OH）D 与PBC 患者病情严重程度的相关性。故本研究以河南大学淮河医院收治的PBC 门诊和住院患者作为研究对象，探讨ApoB/ApoA1、25-（OH）D 在PBC 患者中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2017 年6 月—2021 年10 月河南大学淮河医院收治的145 例患者作为PBC 组，另选取同期在本院体检的100 例健康者作为对照组。PBC 组中男性38 例，女性107 例；年龄23～72 岁，平均（56.02±8.65）岁。对照组中男性19 例、女性81 例，年龄21～73 岁，平均（54.68±10.32）岁。纳入标准：①PBC 组符合《原发性胆汁性肝硬化(又名原发性胆汁性胆管炎)诊断和治疗共识（2015）》[6]诊断标准；②年龄>18 岁。排除标准：①合并病毒性、药物性或酒精性肝病或肝内占位性病变；②合并肝脏恶性肿瘤；③自身免疫性疾病；④近3 个月服用免疫抑制剂、皮质醇类固醇激素或维生素D。依据Child-Pugh 肝功能分级标准[7]，将PBC 患者分为重度病情组（C 级，43 例）和轻中度病情组（A、B 级，102 例）。本研究经医学伦理委员会批准，研究对象签署知情同意书。

1.2 ApoB/ApoA1、25-（OH）D检测

所有研究对象入院24 h 内采集静脉血5 mL，以3 200 r/min 离心8 min，离心半径10 cm，分离血清；采用全自动生化分析仪（c701 型，上海罗氏公司）测定ApoB、ApoA1 水平；并计算ApoB/ApoA1；采用酶联免疫吸附试验[8]测定25-（OH）D 水平（试剂盒购于上海酶联生物有限公司）。

1.3 临床资料收集

收集PBC 患者临床资料，包括性别、年龄、体质量指数（body mass index,BMI）、是否合并基础疾病（高血压、糖尿病及高脂血症）、吸烟史、饮酒史、总胆红素、谷氨酰转肽酶（glutamyl transpeptidase,GGT）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、谷氨酸转氨酶（glutamate aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、透明质酸（hyaluronic acid,HA）、层黏蛋白（Laminin,LN）、Ⅲ型前胶原（type Ⅲ procollagen,PCⅢ），血样采集同1.2，HA、LN 及PCⅢ均采用化学发光法测定，试剂盒均购于上海信裕生物科技有限公司。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 21.0 统计软件。计量资料以均数±标准差（）表示，比较用t检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较用χ2检验；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线；影响因素的分析采用逐步多因素Logistic 回归模型；P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床资料和ApoB/ApoA1、25-（OH）D比较

两组性别、年龄、BMI 比较，差异无统计学意义（P>0.05）。两组ApoB/ApoA1、25-（OH）D 比较，差异有统计学意义（P<0.05），PBC 组ApoB/ApoA1 高于对照组，25-（OH）D 低于对照组。见表1。

表1 两组临床资料和ApoB/ApoA1、25-（OH）D比较

2.2 轻中度病情组与重度病情组临床资料和ApoB/ApoA1、25-（OH）D比较

轻中度病情组与重度病情组性别、年龄、BMI、合并高血压、合并糖尿病、吸烟史、饮酒史、总胆红素比较，差异无统计学意义（P>0.05）。轻中度病情组与重度病情组合并高脂血症、GGT、ALP、ALT、AST、HA、LN、PCⅢ、ApoB/ApoA1 及25-（OH）D 比较，差异有统计学意义（P<0.05），重度病情组合并高脂血症、GGT、ALP、ALT、AST、HA、LN、PCⅢ及ApoB/ApoA1 高于轻中度病情组，25-（OH）D 低于轻中度病情组。见表2。

表2 轻中度病情组与重度病情组临床资料和ApoB/ApoA1、25-（OH）D比较

续表2

2.3 影响PBC 患者病情严重程度的逐步多因素Logistic回归分析

以合并高脂血症（是=1，否=0）及GGT（赋值为实际测量值）、ALP（赋值为实际测量值）、ALT（赋值为实际测量值）、AST（赋值为实际测量值）、HA（赋值为实际测量值）、LN（赋值为实际测量值）、PCⅢ（赋值为实际测量值）、ApoB/ApoA1（赋值为实际测量值）、25-（OH）D 为自变量（赋值为实际测量值），PBC 患者病情严重程度为因变量（重度=1，轻中度=0），进行逐步多因素Logistic 回归分析（引入标准0.05，排除标准0.10），结果显示：合并高脂血症[=3.053（95% CI：1.288，7.237）]、ApoB/ApoA1 [=3.184（95% CI：1.343，7.548）]及25-（OH）D [=3.377（95% CI：1.424，8.006）]是影响PBC 患者病情严重程度的影响因素（P<0.05）。见表3。

表3 影响PBC患者病情严重程度的逐步多因素Logistic回归分析参数

2.4 ApoB/ApoA1、25-（OH）D及两者联合对PBC患者病情严重程度的诊断效能

ROC 曲线分析结果显示，ApoB/ApoA1、25-（OH）D及两者联合诊断PBC 患者病情严重程度的敏感性分别为74.42%（95% CI：0.585，0.860）、72.09%（95% CI：0.561，0.842）、69.77%（95% CI：0.537，0.823），特异性分别为66.67%（95% CI：0.566，0.755）、70.59%（95%CI：0.606，0.790）、98.04%（95% CI：0.924，0.997），AUC 分别为0.668（95% CI：0.585，0.744）、0.727（95%CI：0.647，0.797）、0.883（95% CI：0.820，0.931）。见表4 和图1。

图1 ApoB/ApoA1、25-（OH）D及两者联合诊断PBC患者病情严重程度的ROC曲线

表4 ApoB/ApoA1、25-（OH）D及两者联合对PBC患者病情严重程度的诊断效能

3 讨论

PBC 是一种自身免疫性慢性胆汁淤积性肝病，发病可能与病毒性肝炎、营养障碍等有关[9-10]。PBC 早期可通过药物进行治疗，但随着肝内胆汁长时间地持续淤积，发展至终末期则需进行肝移植；故对PBC 患者的病情进行准确评估，有利于临床治疗[11-13]。通过对ApoB/ApoA1、25-（OH）D 在PBC 患者中的临床意义进行探讨，对临床PBC 患者的病情评估和临床治疗方案的制订具有重要作用。

本研究结果显示PBC 患者ApoB/ApoA1、25-（OH）D 存在明显异常。分析原因可能为，PBC患者由于肝细胞周围发生纤维化，肝窦血流不畅，致使肝细胞缺血缺氧，合成ApoB、ApoA1 能力降低，且ApoA1 的降低幅度更大，致使PBC 患者ApoB/ApoA1 异常偏高[14]。25-（OH）D 稳定性高、半衰期长，可反映机体内维生素D 水平。RHYU 等[15]研究发现，维生素D 可促进钙磷吸收、维持骨代谢平衡，同时在抑制纤维化、免疫反应等过程中发挥着重要作用；25-（OH）D 主要依赖于维生素D 受体以发挥其活性作用，而PBC 患者由于胆汁淤积，不利于维生素D 的吸收，进而降低25-（OH）D 水平。本研究结果表明，重度病情组合并高脂血症占比、GGT、ALP、ALT、AST、HA、LN、PCⅢ及ApoB/ApoA1 高于轻中度病情组，25-（OH）D 低于轻中度病情组；并经逐步多因素Logistic 回归分析显示，合并高脂血症、ApoB/ApoA1 及25-（OH）D 均为影响PBC 患者病情严重程度的影响因素。分析原因可能为合并高脂血症者由于脂代谢异常，可在一定程度上影响患者的肝功能，进而加重PBC 患者的病情。李芳芳[16]研究表明，ApoB/ApoA1 参与PBC的发生、发展，在PBC 发病早期肝细胞损伤时，肝脏可大量分泌血小板衍生生长因子，并作用于肝星状细胞，致使肝细胞进一步发生损害、甚至发生肝纤维化，导致肝脏合成ApoB、ApoA1 的能力降低，致使ApoB/ApoA1 值升高促进PBC 患者病情的加重。25-（OH）D 是维生素D 在机体中的一种活化形式，而维生素D 受体多态性与PBC 的发生密切相关；维生素D 代谢和储存的主要器官为肝脏，25-（OH）D 水平水平降低可致使机体肝脏、肾脏对维生素D 羟基化功能障碍，并降低维生素D 结合蛋白水平[17-18]；故25-（OH）D 水平越低，PBC 患者病情越严重。ROC 曲线分析结果显示，ApoB/ApoA1、25-（OH）D 及两者联合对PBC 患者病情严重程度预测的敏感性分别为74.42%、72.09%、69.77%，特异性分别为66.67%、70.59%、98.04%，AUC 分别为0.668、0.727、0.883，故ApoB/ApoA1、25-（OH）D 可对PBC患者病情严重程度进行预测的可能机制为：当机体早期肝功能遭受损害时，肝脏可分泌大量血小板衍生生长因子并作用于肝星状细胞，致使肝细胞进一步发生损害，肝脏合成ApoB、ApoA1 的能力降低；ApoB 减少的幅度较小、ApoA1 水平降低幅度较大，致使ApoB/ApoA1 值明显升高[19-21]。25-（OH）D 参与PBC 患者病情的机制主要包括遗传机制和代谢机制；在遗传机制方面，25-（OH）D 水平降低可致使机体肝脏的抗氧化应激能力降低；同时由于维生素D 受体基因多态性可影响维生素D受体与25-（OH）D 的结合能力，进而降低肝脏的免疫调节能力；在代谢机制方面，25-（OH）D 水平降低可加速肝细胞的变性坏死，并可通过增加乙醇所引起的脂质过氧化反应，致使机体产生各种黏附分子、趋化因子，进而加重肝脏的脂肪变性、纤维化[22-25]。故ApoB/ApoA1、25-（OH）D 两者联合对PBC 患者病情严重程度的预测价值较高。

综上所述，ApoB/ApoA1、25-（OH）D 与PBC 患者病情严重程度有关，且ApoB/ApoA1、25-（OH）D两者联合对PBC 患者病情严重程度的诊断效能较高。