IL-6、IL-8、IL-18、VEGF诊断活动性肺结核的价值

陈玉芊，王世军，王 欣，徐修礼

1.西安区域医学检验中心，陕西西安 710116；2.兰州市肺科医院检验科，甘肃兰州 730046；3.甘肃省人民医院检验中心，甘肃兰州 730013

肺结核已经成为导致全球人类死亡的十大常见病因之一[1]，保守估计每年因该病死亡的人数超过170万，并且其中超过1/3的活动性肺结核患者并未得到及时确诊及治疗[2]。痰液显微镜检查在活动性肺结核诊断中十分常用，但检查结果严重依赖于检验人员的自身技术水平，并且采用的固体或者液体培养方法耗时长，使其难以在医疗条件较差的地区得到广泛应用[3]。感染了人类免疫缺陷病毒的患者难以获得痰液标本，即便是获得了痰液标本也会因细菌量不足而得出错误的诊断[4]。近年来，与活动性肺结核有关的外周血蛋白标志物引起了医学界及临床的高度重视，临床上纷纷开展研究[5]。活动性肺结核起病后患者普遍伴有不同程度的肺部炎症渗出，由此导致炎症因子持续释放，而目前临床上与活动性肺结核炎症活动有关的指标包括白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-18等，其水平升高往往反映出炎症的严重程度[6]。血管内皮生长因子(VEGF)全程参与结核分枝杆菌的增殖，并且随着结核分枝杆菌数量的增加，由细胞壁中的糖脂、其他组分刺激单核细胞与巨噬细胞将会源源不断地释放该物质[7]。因此，在理论上检测IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平有助于活动性肺结核的临床诊断，但目前涉及此方面内容的临床研究较少，故本研究围绕IL-6、IL-8、IL-18、VEGF在活动性肺结核诊断中的应用效果展开分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年6月至2021年6月兰州市肺科医院和甘肃省人民医院收治的80例活动性肺结核患者作为活动性肺结核组，73例非活动性肺结核患者作为非活动性肺结核组，另选取同期80例健康体检者作为对照组。活动性肺结核组男45例，女35例；年龄48～69岁，平均(56.87±2.43)岁；病程1～3个月，平均(1.85±0.25)个月；有吸烟史44例，无吸烟史36例；有饮酒史35例，无饮酒史45例；有胸腔积液45例，无胸腔积液35例；有空洞48例，无空洞32例。非活动性肺结核组男43例，女30例；年龄49～68岁，平均(56.62±2.52)岁；病程1～3个月，平均(1.80±0.23)个月；有吸烟史40例，无吸烟史33例；有饮酒史37例，无饮酒史36例。对照组男48例，女32例；年龄50～66岁，平均(56.82±2.51)岁；有吸烟史47例，无吸烟史33例；有饮酒史32例，无饮酒史48例。纳入标准：(1)活动性肺结核符合相关的诊断标准[8]，结核分枝杆菌检测阳性。或者结核分枝杆菌检测阴性但具有以下情形之一：影像学检查提示肺部渗出性病变；原结核分枝杆菌检测阳性，正在接受规范的抗结核治疗但尚未完成疗程；新发现活动性病变、病变较之前增多、新发空洞、结核分枝杆菌转阳。(2)非活动性肺结核诊断标准：细菌学检查为阴性，无活动结核体征及相关症状，影像学检查有结节性病灶、空洞、胸膜粘连或增厚等。(3)认知功能良好，能够配合标本采集者。排除标准：(1)具有活动性肺结核相似症状的肺癌、支气管扩张、肺炎、慢性阻塞性肺疾病患者。(2)合并严重精神障碍并伴有攻击倾向的患者。(3)标本采集前服用过抗菌药物或抗VEGF的患者。(4)合并终末期恶性肿瘤或未经控制的重度感染患者。所有研究对象均知情同意并签署知情同意书。本研究通过医学伦理委员会审批。活动性肺结核组、非活动性肺结核组和对照组性别、年龄、吸烟史、饮酒史比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 活动性肺结核组、非活动性肺结核组和对照组均采集空腹静脉血3 mL，置于山东博科生物产业有限公司生产的TD-5M-I医用离心机中以3 000 r/min离心10 min，收集上清液。采用上海卡努生物科技有限公司生产的VEGF定量检测试剂盒以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测VEGF水平。采用英国Abcam公司生产的检测试剂盒以ELISA检测IL-6、IL-8、IL-18水平。所有检测步骤均严格按照试剂盒说明书执行。入院后活动性肺结核患者均按照《肺结核基层诊疗指南(2018年)》[9]内容予以2HRZE/4HR方案治疗，总疗程9个月。

1.3观察指标 选取活动性肺结核组、非活动性肺结核组和对照组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF，以及活动性肺结核组内有、无胸腔积液组和有、无空洞组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF作为观察指标。

2 结 果

2.1活动性肺结核组、非活动性肺结核组和对照组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较 活动性肺结核组和非活动性肺结核组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明显高于对照组，且活动性肺结核组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均高于非活动性肺结核组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 活动性肺结核组、非活动性肺结核组和对照组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较

2.2有胸腔积液组和无胸腔积液组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较 活动性肺结核组内有胸腔积液组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明显高于无胸腔积液组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 有胸腔积液组和无胸腔积液组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较

2.3有空洞组和无空洞组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较 活动性肺结核组内有空洞组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明显高于无空洞组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 有空洞组和无空洞组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平比较

3 讨 论

活动性肺结核是指痰涂片阳性，发现结核分枝杆菌排出、病灶处于活动期的肺结核类型[10]。X线片检查能够发现斑片状阴影或结核空洞，或播散病灶，表明此时患者体内的结核分枝杆菌毒力强、繁殖活跃[11]。本研究发现，与无空洞组比较，有空洞组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)。活动性肺结核并非不可治愈，在明确诊断后接受积极、规律抗结核治疗后患者普遍能够取得较好的预后[12]。若未合理、规律抗结核治疗将会导致病情持续加重，甚至播散至其他脏器形成播散性疾病，病情严重者会危及其生命安全[13]。未及时治疗的活动性肺结核患者会形成永久性肺损伤，使其肺功能呈进行性下降[14]。鉴于活动性肺结核有极大的危害，故早发现、早治疗尤为重要。然而，活动性肺结核患者的症状表现存在较为明显的差异，轻者可无任何症状，仅仅在正常体检时被发现，典型患者则表现出咳嗽、咳痰、午后低热、盗汗、消瘦等，女性患者则伴有月经不调，容易被患者忽视[15]。痰涂片镜检虽然能够为临床诊断工作提供较为可靠的参照依据，但灵敏度相对较低且耗时长，难以满足快速检测[16]。并非每个医疗卫生机构均可以开展痰涂片镜检，该方法的限制性较大。故当前诊断迫切需要一种操作便捷、简单可靠、成本低廉、灵敏度高的检测方法。

美国哈佛大学和麻省理工学院的研究团队在Luminex平台基础上应用Simoa超高灵敏蛋白检测技术研发出一种基于血液的活动性结核病快速检测方法，通过分层筛选，最终获得了4种蛋白质标志物，分别是IL-6、IL-8、IL-18和VEGF，连续性数据检测证实以上指标可以作为区分活动性结核病及其他与结核病相似症状疾病的生物标志物[17]。然而，目前国内临床研究中尚无此方面的研究，故该成果是否可以被用于临床尚有待于进一步证实。基于此，本研究对此展开分析，结果显示，与对照组比较，活动性肺结核组和非活动性肺结核组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平更高，且活动性肺结核组高于非活动性肺结核组，差异均有统计学意义(P<0.05)，由此提示，IL-6、IL-8、IL-18、VEGF有助于活动性肺结核的诊断且不失为良好的生物学标志物。其原因在于IL-6、IL-8、IL-18与炎症密切相关，活动性肺结核患者在结核分枝杆菌侵入肺部后将会诱发感染性病变，容易形成胸腔积液，而胸腔积液恰恰属于炎症渗出的重要表现，并且胸腔积液的出现还加重了患者的咳嗽、咳痰等症状[18]。本研究结果显示，活动性肺结核组内有胸腔积液组血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平均明显高于无胸腔积液组，差异均有统计学意义(P<0.05)。VEGF全程参与到细胞的增殖、炎症、新生血管形成等进程中，广泛分布于结核分枝杆菌细胞壁中的糖脂在其增殖活跃时不断刺激单核/巨噬细胞，使巨噬细胞源源不断地释放出VEGF，而随着VEGF水平升高，活动性肺结核的病理进程随之加快。因此，IL-6、IL-8、IL-18、VEGF与活动性肺结核之间存在密切的关联性，在临床中具有一定的推广使用价值，但不足之处在于血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF的特异度相对较低，在今后工作中需继续摸索全新的检测方案。

综上所述，活动性肺结核患者血清IL-6、IL-8、IL-18、VEGF水平较高，可作为生物学标志物推广使用。