血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平在多发性骨髓瘤病情和预后中的临床价值*

范小红，王雪莲，孟亚红

复旦大学附属中山医院青浦分院血液科，上海 201700

多发性骨髓瘤是一种B细胞恶性肿瘤，主要以浆细胞增殖为主，占血液恶性疾病的13%，其发病率呈上升趋势。多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤常见的并发症之一，严重影响患者的生存质量，骨质损害程度与多发性骨髓瘤患者的生存质量密切相关[1]。早诊断、早治疗多发性骨髓瘤骨病，对于改善患者预后具有重要临床意义。虽然影像学检查给多发性骨髓瘤骨病提供了直观的证据，但不能进行早期和定量精准评价[2]。骨代谢标记物是评价骨代谢的指标，在多发性骨髓瘤骨病中的研究较少。多发性骨髓瘤能够分泌巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)，从而下调骨保护素的表达水平，具有刺激破骨细胞和抑制成骨细胞活性的功能[3]；抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)主要来源于活化的破骨细胞，参与骨质代谢过程，具有促进骨吸收的作用[4]；骨硬化蛋白可以通过Wnt信号通路调节破骨细胞的活性，从而影响骨代谢异常[5]。本研究对多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平与多发性骨髓瘤骨病病情和预后的关系进行探讨，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年1月至2020年12月在本院就诊的125例多发性骨髓瘤患者作为观察组，其中男67例，女58例；年龄35～79岁，中位年龄59岁；按照国际分期体系进行分期：Ⅰ期36例，Ⅱ期51例，Ⅲ期38例；根据骨质破坏程度进行分级：无骨质破坏为0级(35例)，普遍存在骨质疏松或者有1处骨质破坏为1级(19例)，有2～3处骨质破坏为2级(43例)，有3处以上骨质破坏或者存在病理性骨折或者压缩性骨折为3级(28例)。另选取同期在本院体检的75例健康体检者作为对照组，其中男41例，女34例；年龄 38～79岁，中位年龄58岁。两组研究对象性别、年龄等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有研究对象均知情同意并签署知情同意书，本研究经医院伦理委员会审核通过。

1.2纳入和排除标准

1.2.1纳入标准 多发性骨髓瘤[6]和多发性骨髓瘤骨病[7]分别符合相应的诊断标准；病例资料完整；依从性良好。

1.2.2排除标准 合并其他恶性肿瘤；其他血液性疾病；骨关节疾病和内分泌性疾病，如甲状腺功能亢进、甲状腺功能减退和糖尿病等；创伤性骨折病史；入组前1个月内接受过激素、钙剂和双磷酸盐治疗者；智力下降或者精神性疾病患者。

1.3方法

1.3.1治疗方法 所有患者入院后进行常规化疗前的检查，按照硼替佐米+沙利度胺+地塞米松(VTD)方案或硼替佐米+脂质体阿霉素+地塞米松(VAD)方案或硼替佐米+来那度胺+地塞米松(VRD)方案予以化疗，所有患者未接受过骨髓移植和造血干细胞治疗。除此之外，诊断为多发性骨髓瘤后2年内使用唑来膦酸4 mg治疗，每个月1次，2年后每3个月一次。出现双膦酸盐相关性颌骨坏死病例则暂停使用至少3个月。

1.3.2血清学指标检测 所有研究对象入组时抽取空腹肘静脉血5 mL，放置在抗凝管中，以3 000 r/min离心10 min，将上清液置于-70 ℃冰箱中用于血清学指标水平检测。采用酶联免疫吸附试验检测血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平，试剂盒购自上海联迈生物工程有限公司。

1.3.3观察指标 比较观察组和对照组血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平，以及观察组患者治疗前后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平；比较不同肿瘤分期、不同骨质破坏程度分级多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平；进行多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的单因素和多因素分析；比较血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白单项及3项指标联合检测对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的预测效能。

2 结 果

2.1观察组和对照组血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较 观察组治疗前后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明显高于对照组，且观察组患者治疗后血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明显低于治疗前，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 观察组和对照组血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较

2.2不同肿瘤分期多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较 Ⅲ期多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明显高于Ⅰ期和Ⅱ期，Ⅱ期多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均高于Ⅰ期，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 不同肿瘤分期多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较

2.3不同骨质破坏程度分级多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较 随着多发性骨髓瘤骨质破坏程度分级升高患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平均明显升高，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 不同骨质破坏程度分级多发性骨髓瘤患者血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平比较

2.4多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的单因素分析 所有患者均随访1年，死亡40例，存活85例。死亡组患者肿瘤分期、骨质破坏程度分级、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平与存活组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；而存活组和死亡组患者性别、体质量指数(BMI)和化疗方案比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表4。

表4 多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的单因素分析[n(%)或n或

组别nMIP-1α(pg/mL)TRACP-5b(ng/mL)骨硬化蛋白(pg/mL)存活组85119.39±31.4429.78±8.170.60±0.08死亡组40162.33±34.3438.21±10.520.74±0.11χ2/t6.9154.8936.947P<0.001<0.001<0.001

2.5多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的影响因素分析 对单因素分析差异有统计学意义的指标进行多因素分析发现，肿瘤分期、骨质破坏程度分级、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平是多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的独立影响因素(P<0.05)。见表5。

表5 多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的多因素分析

2.6血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的预测效能 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡具有较高的预测效能，根据1年内是否发生死亡进行多因素Logistic回归分析得方程Y=0.04×XMIP-1α+0.11×XTRACP-5b+13.88×X骨硬化蛋白-19.31得综合检测指标，3项指标联合检测的灵敏度为90.0%，特异度为87.1%，曲线下面积(AUC)为0.934，明显高于MIP-1α(Z=3.068，P=0.002)、TRACP-5b(Z=3.622，P<0.001)和骨硬化蛋白(Z=2.576，P=0.010)单独检测，而3项指标之间的AUC比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表6、图1。

表6 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的预测效能

图1 血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白预测多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的ROC曲线

3 讨 论

多发性骨髓瘤骨病是多发性骨髓瘤的并发症之一，多发性骨髓瘤与骨髓基质之间具有密切的联系，骨髓基质支撑着多发性骨髓瘤的发展，而多发性骨髓瘤细胞同样影响着基质的组成，从而导致广泛溶骨性病变发生[8]。正常骨骼代谢与成骨和破骨细胞之间的平衡具有密切联系。本研究结果显示，肿瘤分期、骨质破坏程度分级、MIP-1α水平、TRACP-5b水平和骨硬化蛋白水平是多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的影响因素。有研究显示，多发性骨髓瘤会分泌多种细胞因子，如肿瘤坏死因子、白细胞介素-3和MIP-1α等，对成骨细胞活性具有抑制作用，主要抑制基质细胞转化为成骨细胞[9]。本研究结果显示，观察组治疗前后血清MIP-1α水平明显高于对照组，治疗后血清MIP-1α水平明显低于治疗前，说明MIP-1α与多发性骨髓瘤具有密切联系。本研究结果显示，血清MIP-1α水平随着多发性骨髓瘤肿瘤分期和骨质破坏程度分级升高而升高，说明血清MIP-1α水平是反映多发性骨髓瘤疾病严重程度的指标，与文献[10]报道血清MIP-1α水平与疾病分期和骨质破坏程度相关的结论一致。骨质破坏程度增加促进多发性骨髓瘤增殖和骨质破坏，形成恶性循环，同时MIP-1α与相应受体结合后激活破骨细胞，导致破骨细胞被激活，代谢增强，造成骨质溶骨性破坏[11]。本研究结果显示，死亡组患者血清MIP-1α水平明显高于存活组，说明血清MIP-1α是多发性骨髓瘤预后的评价指标。血清MIP-1α截断值为163.32 pg/mL时，其灵敏度为60.0%，特异度为92.9%，AUC为0.814，说明血清MIP-1α水平对预测多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡具有较高的价值。

骨质代谢与破骨细胞和成骨细胞均具有重要作用，二者平衡受到破坏会引发骨病。TRACP-5b是破骨细胞分泌的细胞因子，当破骨细胞活化时TRACP-5b被分泌到细胞外，故血清TRACP-5b水平是反映破骨细胞活性和溶骨严重程度的重要指标[12]。本研究结果显示，观察组治疗前后血清TRACP-5b水平明显高于对照组，治疗后血清TRACP-5b水平明显低于治疗前，说明TRACP-5b水平与多发性骨髓瘤的发生和发展具有一定的联系。本研究结果显示，血清TRACP-5b水平随着多发性骨髓瘤肿瘤分期和骨质破坏程度分级升高而升高，说明血清TRACP-5b水平是反映多发性骨髓瘤疾病严重程度的重要指标。在多发性骨髓瘤患者中血清TRACP-5b水平升高，是肿瘤转移和溶骨性损伤的早期标记物，与多发性骨髓瘤病情严重程度呈正相关[13]。当肿瘤发生骨转移时，破骨细胞活性明显增加，血清TRACP-5b水平也明显升高，其已被用于前列腺癌发生骨转移的监测，具有较高的灵敏度和特异度，并认为有潜力替代骨扫描检查[14]。本研究结果显示，死亡组患者血清TRACP-5b水平明显高于存活组，并且当血清TRACP-5b截断值为38.78 ng/mL时，预测多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的灵敏度为62.5%，特异度为91.8%，AUC为0.765，说明血清TRACP-5b是多发性骨髓瘤预后的重要预测指标。

骨硬化蛋白是成骨细胞分泌的重要细胞因子，在骨代谢过程中具有重要作用，在多发性骨髓瘤早期通过经典Wnt信号通路对成骨细胞分化起作用，对过程发挥正向调节的作用[15]。随着瘤负荷增加并达到一定水平，促进骨髓瘤细胞分泌硬化蛋白，通过抑制Wnt信号通路，从而引起多发性骨髓瘤骨病发生[16]。本研究结果显示，观察组治疗前后血清骨硬化蛋白水平高于对照组，治疗后血清骨硬化蛋白水平明显低于治疗前，说明骨硬化蛋白与多发性骨髓瘤的发生和发展具有一定的联系。本研究结果显示，血清骨硬化蛋白水平随着多发性骨髓瘤肿瘤分期和骨质破坏程度分级升高而升高，与文献[17]报道的结果类似，说明血清骨硬化蛋白水平与多发性骨髓瘤的负荷具有一定联系，其机制可能与骨硬化蛋白抑制骨髓基质细胞向成骨细胞转化，导致促瘤细胞生长因子增多，促进瘤负荷增加；同时骨硬化蛋白抑制骨修复的同时可促进肿瘤细胞生长[18]。本研究结果显示，死亡组患者血清骨硬化蛋白水平明显高于存活组，并且当血清骨硬化蛋白截断值为0.72 pg/mL时，预测多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡的灵敏度为67.5%，特异度为94.1%，AUC为0.842。本研究结果显示，联合检测血清MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白水平对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡具有更高的预测效能，其灵敏度为90.0%，特异度为87.1%，AUC为0.934，高于单项指标，说明3项指标对预测多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡具有一定的互补性，单项指标均与骨质形成和吸收相关的指标可能存在内在联系，具体机制需要进一步研究。

综上所述，MIP-1α、TRACP-5b和骨硬化蛋白参与了多发性骨髓瘤的发生和发展，对多发性骨髓瘤患者1年内发生死亡具有较高的预测价值。