血清IL-32、PRL、MMP-9 在子宫内膜异位症合并不孕患者中的表达及意义分析

徐逸尘 王智慧

子宫内膜异位症患者因内分泌、免疫、胚胎发育等多方面原因导致盆腹腔微环境、子宫内膜容受性及输卵管运输能力等改变,造成该类患者不孕几率增加,报告指出约50%的子宫内膜异位症患者可发生不孕,是导致育龄期女性不孕的重要因素之一［1］。故探寻可能影响子宫内膜异位症患者不孕的生物学指标,是现阶段临床医学研究重点。泌乳素(prolactin,PRL)是常规生殖激素之一,可促进乳腺腺泡发育；基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)可降解细胞基底膜与外基质；血清白细胞介素-32(interleukin-32,IL-32)属于新型促炎细胞强诱导物,在炎症反应调节中具有重要作用［2,3］。既往研究指出,子宫内膜异位症合并不孕的发生机制与生殖激素、内分泌紊乱等密切相关,由此考虑上述血清指标是否在子宫内膜异位症合并不孕发生与进展调控中具有某种作用,搜索临床相关文献,更多的是研究上述血清单个指标或其中两种指标联合在子宫内膜异位症合并不孕患者中的意义,并未发现上述三种指标联合评估［4,5］。鉴于此,本研究通过观察子宫内膜异位症合并不孕患者的血清IL-32、PRL 及MMP-9 表达情况,并分析子宫内膜异位症患者发生不孕症的相关因素,旨在评估子宫内膜异位症患者不孕发生风险。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020 年2 月～2021 年12 月期间在苏州市相城人民医院妇科住院治疗的40 例单纯子宫内膜异位症患者作为A 组,年龄26～37 岁,平均年龄(31.48±1.15)岁；美国生育学会修订的子宫内膜异位症分期标准(R-AFS)分期［6］：Ⅰ～Ⅱ期23 例,Ⅲ～Ⅳ期17 例。另选取同时期36 例子宫内膜异位症合并不孕患者作为B 组,年龄26～35 岁,平均年龄(31.37±1.11)岁；R-AFS 分期：Ⅰ～Ⅱ期21 例,Ⅲ～Ⅳ期15 例。两组一般资料比较,差异均无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。见表1。所有纳入患者均无体外受精(IVF)史、子宫内膜异位症手术史。

表1 两组一般资料比较(,n)

表1 两组一般资料比较(,n)

注：两组比较,P＞0.05

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准 子宫内膜异位症诊断参照《子宫内膜异位症的诊治指南》［7］中相关标准；不孕诊断参照《子宫腺肌病伴不孕症诊疗中国专家共识》［8］中相关诊断；入组前6 个月内未服用激素类药物；患者临床资料保存完善。

1.2.2 排除标准 子宫内膜异位症手术史,或合并其他子宫内膜病变,如子宫内膜癌；合并其他妇科疾病,如盆腔炎、卵巢囊肿等；合并其他可能导致患者不孕的因素,如精子异常、排卵障碍等；防治宫内节育器；合并免疫性或高泌乳素血症等内分泌疾病。

1.3 方法 入院次日,采集两组患者空腹静脉血5 ml,高速离心(3000 r/min,10 min)后,取上层清液,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-32、MMP-9(试剂盒由武汉优尔生商贸有限公司提供,批号：20202220282)水平,采用免疫荧光法检测血清PRL(试剂盒由上海新波生物技术有限公司提供,型号：AutoDelfia 型)水平。

1.4 观察指标 比较两组患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平,分析子宫内膜异位症患者发生不孕的相关因素及血清IL-32、PRL、MMP-9 表达预测子宫内膜异位症患者发生不孕的价值。

1.5 统计学方法 采用SPSS24.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差()表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。绘制ROC 曲线图分析血清IL-32、PRL、MMP-9 表达预测子宫内膜异位症患者合并不孕的价值,AUC＜0.5 无预测价值,0.5～0.7 预测价值较低,0.7～0.9 预测价值中等,＞0.9 预测价值较高；检验水准α=0.05。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平比较 B 组患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平分别为(49.02±6.75)ng/L、(22.56±5.48)μg/L、(394.12±72.15)ng/ml,均高于A 组的(28.23±4.15)ng/L、(18.56±4.42)μg/L、(270.56±42.12)ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平比较()

表2 两组血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平比较()

注：与A 组比较,aP＜0.05

2.2 子宫内膜异位症患者发生不孕的多因素回归分析将子宫内膜异位症患者是否合并不孕情况作为因变量(1=合并,0=未合并),将血清IL-32、PRL、MMP-9 表达作为自变量并赋值。见表3。经Logistic 回归分析结果显示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表达均是子宫内膜异位症患者发生不孕的影响因素(OR＞1,P＜0.05)。见表4。

表3 自变量说明与赋值

表4 子宫内膜异位症患者发生不孕的多因素回归分析

2.3 血清IL-32、PRL、MMP-9 表达预测子宫内膜异位症患者发生不孕的价值分析 将子宫内膜异位症患者是否合并不孕症的情况作为状态变量(1=合并,0=未合并),将患者入院时血清IL-32、PRL、MMP-9 表达作为检验变量,绘制患者ROC 曲线,得到AUC,其中血清IL-32、PRL、MMP-9、联合检测的AUC 分别为0.907、0.727、0.915、0.960＞0.7,均有一定的预测价值。见表5,图1。

表5 血清IL-32、PRL、MMP-9 表达预测子宫内膜异位症患者发生不孕的价值分析

图1 血清IL-32、PRL、MMP-9 表达预测子宫内膜异位症患者发生不孕的ROC 曲线图

3 讨论

子宫内膜异位症是育龄期女性常见疾病之一,近年来发病率呈逐年上升且年轻化趋势,也是导致育龄期女性发生不孕的主要因素［9］。故探寻可能影响子宫内膜异位症患者发生不孕的有效指标,对降低患者不孕率尤为重要。

血清IL-32 是新近发现的前炎症细胞因子,可由T细胞、单核细胞自然杀伤细胞(NK 细胞)等产生,在自身免疫性疾病、感染性疾病中的研究较多,其在体内生物学作用体现：参与诱导各种趋化因子与细胞因子、诱导T 细胞凋亡、增强宿主防御［10,11］。目前有关血清IL-32 在子宫内膜异位症相关疾病中研究较少。血清PRL 是由子宫内膜、垂体等组织分泌的神经肽激素,非妊娠状态下机体血清PRL 表达＜20 ng/ml,当其表达升高时,下丘脑-垂体-性腺生殖轴抑制垂体促性腺激素分泌,继而影响卵巢周期,导致患者月经紊乱、排卵异常等症状［12,13］。血清MMP-9 属于基质金属蛋白酶家族中分子量最大的明胶酶,被激活的MMP-9 可降解细胞外基质胶原,活化整合素,增加细胞间粘附作用,此外其在促进新血管生成方面价值显著［14,15］。本研究结果显示,B 组患者血清IL-32、PRL、MMP-9 表达水平分别为(49.02±6.75)ng/L、(22.56±5.48)μg/L、(394.12±72.15)ng/ml,均高于A 组的(28.23±4.15)ng/L、(18.56±4.42)μg/L、(270.56±42.12)ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05)。由此提示血清IL-32、PRL、MMP-9 表达可能在子宫内膜异位症患者发生不孕症过程中发挥作用。但这一关系并未明确,较缺乏临床相关研究证实,仍需进一步观察验证。

为验证上述猜测,经Logistic 回归分析结果显示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表达均是子宫内膜异位症患者发生不孕的影响因素(OR＞1,P＜0.05)。研究结果还显示,血清IL-32、PRL、MMP-9 表达对预测子宫内膜异位症合并不孕患者有一定的价值。分析原因可能与下列因素有关：当血清IL-32 过表达时,其通过P38有丝分裂原蛋白激酶磷酸化途径、核因子κB 途径、半胱氨酸天冬蛋白酶(caspase)-1 途径及caspase-3 途径激活慢性免疫系统,继而诱导并加重炎症反应,影响患者卵泡发育,导致不孕［16］。血清PRL 过表达则会引起下丘脑-垂体轴生殖内分泌紊乱综合征,即高泌乳素血症,导致黄体生成素与卵泡刺激素活性下降,对卵泡刺激作用减弱,导致优势卵泡发育、排卵,一方面黄体是卵泡发育的重要基础条件,优势卵泡发育不良后导致黄体生成受阻,而黄体功能不全将直接影响机体受孕,另一方面血清RPL 高表达抑制孕酮与雌二醇分泌,间接影响黄体功能,降低受孕成功几率［17,18］。细胞外基质降解是子宫内膜异位症患者子宫内膜细胞转移与定植的重要环节,血清MMP-9 通过将细胞外基质降解,加强细胞间粘附,帮助子宫内膜细胞的异位定植与增殖［19,20］。鉴于上述原因考虑,针对子宫内膜异位症患者可通过监测血清IL-32、PRL、MMP-9 表达,评估患者发生不孕的风险,并通过给予血清IL-32、PRL、MMP-9 高表达患者给予针对性干预手段,降低子宫内膜异位症患者不孕发生风险。

综上所述,血清IL-32、PRL、MMP-9 表达对子宫内膜异位症患者合并不孕有一定的预测价值,临床可通过对血清IL-32、PRL、MMP-9 高表达的子宫内膜异位症患者采取针对性的干预措施,旨在降低患者不孕症发生率。但本研究因纳入样本数量有限,且回顾性分析时局限性较大,故研究所得结论的真实性与可信度还需在未来开展大样本的前瞻性研究加以验证。