不同免疫缺损状态下HIV-1感染者病毒载量与CD4+/CD8+T淋巴细胞比值相关性*

吴亚云，孙怡华，虞 莹，季霄雷

（南通市疾病预防控制中心微生物检验科，江苏 226007）

人类免疫缺陷病毒（HIV）感染人体后主要攻击CD4+T 淋巴细胞，造成CD4+细胞数量降低，CD8+T淋巴细胞异常扩增，CD4+/CD8+细胞比例下降或倒置[1]，检测HIV 病毒载量（VL）可以了解HIV 感染者体内病毒拷贝数量。准确、及时的实验室数据为疾病进程确定、免疫状态判定及抗病毒治疗提供依据[2]。本文对本地区2019年1月—6月150 例新发现HIV-1 感染者首次病毒载量及外周血T 淋巴细胞进行分析，探讨免疫细胞水平与病毒载量的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 经本中心艾滋病实验室确证HIV-1阳性并由中心性病艾滋病防治科确认为新发现HIV-1 感染者150 例，年龄16～76 岁，平均44.07±13.97岁；男性126 例，女性24 例，男女比例4.9∶1。均符合《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》（WS293-2019）中获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的诊断标准[3]。根据CD4+T 淋巴细胞检测值分组，CD4+T 淋巴细胞≥500/mm3为无免疫缺陷，350～500/mm3为轻度免疫缺陷，200～349/mm3为中度免疫缺陷，≤200/mm3为重度免疫缺陷。

1.2 检测方法

1.2.1 样本采集：采集研究对象2 管EDTA-K2 抗凝管静脉血4 mL，1 管用于流式细胞分析实验，另1管以3 000 r/min 离心15 min，吸取血浆1 mL 存于EP 管内，-80 ℃冰箱保存备测。

1.2.2 CD4+、CD8+T 淋巴细胞检测：采用流式细胞微球计数法，仪器为BD FACSCalibur 流式细胞仪（美国BD 公司），试剂为原装配套试剂。

1.2.3 HIV-1 病毒载量检测：使用美国雅培公司m2000 仪器及配套试剂，按仪器说明书操作，检测范围40～9 999 999 CPs/mL。病毒载量以每毫升血浆中HIV-1 RNA 拷贝数（CPs/mL）表示。

1.3 统计学处理 应用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析。病毒载量数值（CPs/mL）转换为对数值（log/mL），采用Spearman 相关性分析。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同特征人群血浆HIV-1 病毒载量 150 例中未出现“未检出”或“低于/高于检测限”的情况。VL＜103CPs/mL 占3.3%，103～104CPs/mL 占15.3%，104～105CPs/mL 占59.3%，105～106CPs/mL 占16.7%，106～107CPs/mL 占5.3%。不同特征人群血浆HIV-1病毒载量见表1。

表1 不同特征人群血浆HIV-1 病毒载量构成情况 n（%）

2.2 首次外周血T 淋巴细胞检测结果 CD4+、CD8+T 淋巴细胞计数及其比值不符合正态分布。150 例新发现HIV-1 感染者CD4+T 淋巴细胞计数为4～1 174/mm3，其中＜200/mm338 例（25.3%），200～349/mm368 例（45.3%），350～499/mm334 例（22.7%），≥500/mm310 例（6.7%），＜500/mm3者共占93.3%，CD4+T 淋巴细胞计数中位数（四分位数间距）为275.50（197.25～372.25）/mm3。CD8+T 淋巴细胞计数为50～6 338/mm3，中位数（四分位数间距）716.50（496.75～977.5）/mm3。CD4+/CD8+比值正常（1.0～2.0）[4]6 例（4.0%）。

2.3 首次病毒载量与外周血T 淋巴细胞相关性分析 Spearman 相关性分析显示，无免疫缺陷组CD4+T 淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值与VL 无相关性（P＞0.05）；各免疫缺陷组CD4+/CD8+比值与VL 均呈负相关（P＜0.05），重度免疫缺陷组CD4+T 淋巴细胞计数与VL 负相关（r=-0.361，P＜0.05），中度、轻度免疫缺陷组CD4+T 淋巴细胞计数与VL 无相关性（P＞0.05），见表2。

表2 不同免疫缺陷程度CD4+T 淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值与病毒载量相关性

3 讨论

HIV 感染后能够特异性识别带有CD4 受体的细胞如CD4+T 淋巴细胞、单核巨噬细胞和树突状细胞，CD4 细胞的破坏导致免疫系统崩溃，增加发生机会性感染和恶性肿瘤的可能性[5-6]。CD8+T 淋巴细胞在病毒感染后增殖为具有细胞毒性的效应T 细胞，清除被感染细胞，但是病毒复制速度领先于效应T细胞清除被感染细胞的速度，导致无法完全清除HIV病毒[7]。

免疫细胞基线检测与HIV 病毒载量检测是艾滋病确诊后重要的检测内容[2，8]。免疫细胞基线检测可了解患者当前的免疫缺陷状态，病毒载量反映患者每毫升血浆中HIV-1 RNA 拷贝数，二者结合一方面可以帮助临床医师了解患者机体大致情况，选择合适的治疗[9]，如患者处于严重免疫缺陷状态可考虑机会性感染的预防用药[10-11]；另一方面，通过用药前后指标的变化判断抗病毒治疗效果及耐药[9-12]。本研究结果显示，93.3%患者CD4+T 淋巴细胞＜500/mm3，即大多数患者在发现艾滋病时已处于不同程度免疫缺陷状态。

有研究表明，病毒载量与CD4+T 淋巴细胞呈负相关关系[13-15]。本研究结果显示，病毒载量水平与CD4+T 淋巴细胞计数仅在重度免疫缺陷时表现为负相关（r=-0.361，P＜0.05），而免疫状态未缺损或轻度、中度缺损时，CD4+T 淋巴细胞计数与HIV 病毒载量无相关性（P＞0.05）；当CD4+T 淋巴细胞计数降到500/mm3以下，HIV 病毒载量与CD4+/CD8+比值始终呈负相关（P＜0.05），与李莉等[16]研究一致。本研究中，CD4+/CD8+比值与病毒载量相关性较CD4+T 淋巴细胞更强，其原因是感染HIV 后免疫系统的改变不仅表现为CD4+T 淋巴细胞计数下降，同时CD8+T 淋巴细胞绝对值和相对比例也会有变化。

HIV 在人体内的复制水平在感染窗口期急剧增高，而后在免疫系统抗争降至一定水平波动，直到机会性感染或其他原因打破病毒复制与免疫机能的平衡，免疫系统破坏崩溃，病毒量再次持续上升[4]。由于新发现HIV 感染人群实际感染时间未知，CD4+T 淋巴细胞与病毒载量并非呈单一显著的负相关关系，不能单纯根据CD4+T 淋巴细胞计数估算患者体内病毒载量，或根据病毒载量推测患者免疫缺陷状况。

综上所述，HIV 感染者不同免疫状况下，CD4+T淋巴细胞计数与病毒载量的相关性不一致，免疫状况受损时CD4+/CD8+比值与病毒载量呈负相关，提示CD4+/CD8+比值对指导艾滋病临床用药和病情监测具有重要意义。