ABO血型不合新生儿溶血病与血液检测指标关系及其诊断价值

李 怡 任晓桃 郭 静

四川省绵阳市妇幼保健院(621000)

新生儿溶血病(HDN)为母子血型不合溶血病，不仅可破坏胎儿红细胞，引发溶血，还可伴随肝脾肿大、贫血、黄疸等一系列病理损害[1]。需尽早诊断，为临床提供防治依据[2]。产前免疫血液学是常用检测方式，通过检测母体血型抗体效价和致敏红细胞，可预测HDN患病率，但两种测定条件有限，无法在基层医院推广，延误治疗最佳时机[3]。而如何利用基本常规检查正确判断HDN是当前研究热点。血液检查具有操作简便、性价比高、适应性广等优势，近年有学者[4]将其推广在HDN检测中，可预测HDN患病率，为临床诊治提供依据，但血液检查与ABO血型不合新生儿溶血病相关性仍处于探索阶段。本文分析了HDN血型分布情况，探索血液检查指标预测ABO血型不合新生儿溶血病效能和相关性。

1 资料和方法

1.1 资料

回顾性分析2016年4月-2021年4月本院分娩孕妇的2565例基本资料。孕妇年龄(27.9±3.6)岁，孕周(36.5±2.2)周，体重(65.4±5.5)kg；剖宫产1112例，顺产1453例。纳入标准：①父亲为非O型血，母亲不规则抗体筛查为阴性；②新生儿出现黄疸等症状。排除标准：①合并严重脑缺氧、缺血性疾病；②存在先天性心功能不全。本研究符合《赫尔辛基宣言》的伦理审查。

1.2 检测方法

抽取新生儿脐带血和夫妻双方抗凝血分离红细胞和血清，进行孕妇不规则抗体筛查和血型鉴定。新生儿溶血进行血清红细胞抗体稀释实验、直接抗球蛋白实验、游离抗体测定，在检测孕妇体内IgG抗A(B)抗体效价时使用微柱凝胶抗球蛋白技术。血液指标检测：对新生儿进行常规血常规、凝血功能监测，使用XT-2000I型号全自动血细胞分析仪(Sysmex公司)、半自动免疫比浊仪(Orion公司)检测总胆红素、平均红细胞血红蛋白浓度、红细胞和血小板体积、直接胆红素、血小板、血红蛋白、中性粒细胞。新生儿溶血病判定标准[5]：①抗体释放试验阳性或直接Coombs试验阳性；②ABO系统母子血型不合；③血清胆红素水平升高，部分人群出现苍白、皮肤瘀斑、胸腔积液、全身水肿、腹水。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 HDN阳性率分布

2565例分娩孕妇，发生HDN 109例(溶血组)，4.2%；其中O-A-A型，3项阳性16例、2项阳性2例)；O-B-B型均为3项阳性；O-AB-A型3项阳性20例，2项阳性3例；O-AB-B型3项阳性17例，2项阳性2例。各血型组合检测阳性率存在差异(χ2=7.531，P=0.0006)。见表1。

表1 不同AB0血型组合不同抗体检测HDN阳性分布[例(%)]

2.2 抗价效价与HDN发生关系

IgG抗A(B)抗价效价≥1024者中检测出的HDN阳性率高于其他抗价效价者(P<0.05)。见表2。

表2 不同ABO抗价效价孕妇HDN阳性分布

2.3 HDN与血液指标

溶血组与非溶血组直接胆红素、血小板、血小板平均体积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量、血小板分布宽度比较无差异(P>0.05)，溶血组总胆红素、平均红细胞血红蛋白浓度、中性粒细胞均高于非溶血组，血红蛋白低于非溶血组(均P<0.05)。见表3。

表3 两组血液检测指标水平比较

2.4 HDN发生因素分析

以新生儿是否发生溶血为因变量，将单因素筛查有意义的指标为自变量，采用二元logistic回归分析。总胆红素、平均红细胞血红蛋白浓度、血红蛋白、中性粒细胞异常为影响因素(P<0.05)。见表4。

表4 发生HDN时各血液指标二元logistic分析

2.5 相关性分析

经Spearman法分析，HDN与血红蛋白含量呈负相关性(r=-0.166)，与中性粒细胞、平均红细胞血红蛋白浓度、总胆红素呈正相关性(r=0.297、0.255、0.349)(P<0.001)。

2.6 ROC曲线分析

经ROC曲线分析，总胆红素、平均红细胞血红蛋白浓度、中性粒细胞、血红蛋白早期预测HDN的AUC，将4项指标纳入logistic回归分析，根据回归系数值拟合4项联合诊断的数值计算公式：4项联合=总胆红素+(-0.062)/-0.841)×平均红细胞血红蛋白浓度+(-0.416)/(-0.841)×中性粒细胞+0.176/(-0.841)×血红蛋白，经分析，4项联合早期预测HDN的AUC为0.991。见表5。采用Z检验各项检测的AUC均有差异，4项联合高于总胆红素、平均红细胞血红蛋白浓度、中性粒细胞、血红蛋白单独检测(Z=1.687、6.261、3.966、10.244，P<0.05)。

表5 各指标预测HDN的价值

3 讨论

母婴血型不合所致的HDN是发生在早期新生儿、胎儿中一种免疫溶血性疾病，大多是因母体血型抗体经过胎盘进入胎儿血循环，并作用于红细胞引发的溶血，不仅可出现明显胆红素生成增多，还可在新生儿娩出后24h加重黄疸，常伴有肝脾肿大、水肿、贫血，严重时可诱发胆红素脑病，造成不可逆神经系统后遗症，甚至威胁新生儿生命安全。故需尽早诊断，从而控制疾病发展[6-7]。

经调查[8]，ABO系统引起的HDN多发生于O型母亲，多是因O型血清中含有免疫性抗B和抗A成分，可生成IgG 7S-r球蛋白，此种蛋白可通过胎盘引起HDN。对此，本研究将0型母亲作为调查对象，分析HDN血型分布情况。结果显示，HDN发生率为4.25%，其中HDN患病率最高，其次O-AB-A型，推测是因胎儿红细胞中的抗原决定簇A位点较B位点多，故发生溶血A型较B型多，相应的O-AB-A型患病率也高于O-AB-B型者[9]。同时IgG抗A(B)抗价效价≥1024者HDN发生率高于其他阶段抗价效价，原因是母体内存在破坏胎儿红细胞的血型抗体，虽然新生儿不一定会患有HDN，但当抗体效价超过1024时可造成AB0 HDN。李菁[10]学者研究证明血清IgG抗A(B)抗价效价≥1024，可增加HDN患病率。即便血清IgG抗A(B)抗价效价灵敏性较高，但须在标准条件下完成检测，故限制了该项方法在基层使用[11]。

经二元logistic分析，临床多种血液指标可作为影响HDN患病率的独立因素，其中红细胞血红蛋白浓度、中性粒细胞、总胆红素、血红蛋白4项指标无论经二元回归分析还是Spearman法分析，均呈现相关状态。推测原因是HDN大部分因溶血引起，短时间内可导致红细胞大量被破坏，使得血红蛋白下降，红细胞血红蛋白浓度、总胆红素、中心粒细胞升高[12]。一方面中心粒细胞增高是因大量血细胞被破坏，导致应激反应边缘池内大量细胞进入血液循环，使得中性粒细胞增高，由于此项反应发生在血红蛋白凝聚前，故周围红细胞数和血红蛋白含量呈下降趋势，中心粒细胞却明显增多，因此可将其作为内出血重要依据[13]；另一方面胎儿出现溶血性贫血后，可因血浆容量、红细胞容积减少或扩张，导致血容量稳定性受到影响，干扰血浆容量代偿，使得总胆红素和红细胞血红蛋白浓度增高[14-15]。而直接胆红素作为黄疸重要评价依据之一，本次研究显示，两组新生儿直接胆红素未见差异性，可能是因本次检测的新生儿未结束溶血过程，未出现胆汁淤积，故不会引起直接胆红素明显升高[16]。从预测角度分析，4项联合预测HDN效能最高，证明血液指标在早期预测HDN患病率有临床价值。提示临床尽早开展相关检测，为治疗HDN提供指导依据，以降低或避免HDN发生[17]。

综上所述，AB0血型不合的HDN血型主要以0-A-A型为主。而总胆红素、血红蛋白、红细胞血红蛋白浓度、中性粒细胞等血液指标与HDN存在相关性，具有一定预测价值，可为临床早期诊断提供参考依据。但本次研究仍存在不足之处，首先HDN病例量较少，其次血液指标仅分析了常用几类，未探索其与其他血液指标的相关性，故需扩大样本深入研究。