外周血TAP联合HPV、ICAM-1预测围绝经期宫颈癌变患者术后复发价值及与预后相关性

杨雅楼 何明欣 李 珑 胡 璇

1.海南医学院(海口，571199)；2.海南医学院第二附属医院；3.湖北省天门市第一人民医院

宫颈癌为女性生殖系统恶性肿瘤疾病，临床对围绝经期宫颈癌变患者多采用根治术，术后予以放/化疗辅助治疗，但仍存在部分患者病情不稳定导致术后复发。探寻有效的肿瘤标志物对患者预后进行有效评估至关重要[1]。宫颈癌变细胞增殖、迁移导致恶性肿瘤复发这一过程中存在多种肿瘤标志物的异常表达，临床上肿瘤标志物较多且尚无统一标准，探寻并明确肿瘤标志物对术后复诊监测及提升预后评估准确度临床意义重大[2]。近年来相关研究显示，肿瘤异常糖链糖蛋白(TAP)与肿瘤发生发展息息相关，细胞间黏附分子-1(ICAM-1)对肿瘤细胞与淋巴细胞的黏附具有较高的介导效用，提示其对肿瘤癌变细胞的增殖、迁移活性提升具有促进作用，但二者在腹腔镜宫颈癌根治术后评估复发应用较少[3-4]。人乳头瘤病毒(HPV)尤其是高危型检测在子宫颈疾病筛查中有较高预测价值[5]。为进一步明确宫颈癌患者术后复发的有效肿瘤标志物，本研究通过检测腹腔镜宫颈癌根治术患者血清TAP、ICAM-1及HPV指标，术后随访1年，监测各指标水平变化对术后复发的影响机制，为临床评估术后复发提供新的肿瘤标志物选择。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年1月-2021年1月入本院接受宫颈癌根治术治疗的围绝经期患者132例纳入宫颈癌组，接受妇科检查的健康女性77例纳入健康对照组。纳入标准：①宫颈癌患者术前经临床病理诊断后符合宫颈癌变诊断标准[6]；②临床病理资料完整；③均接受宫颈癌根治术，同意并配合本研究调查及随访工作直至研究结束；④术后定期入院复查并接受外周血TAP、HPV、ICAM-1指标检测。排除标准：①合并其他恶性肿瘤疾病；②HPV疫苗接种；③癌变临床分期为IIb期及以上；④术前因各种原因中途退出本研究。本研究经院伦理委员会审批，纳入对象均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1调查方法对纳入本研究的所有宫颈癌患者进行为期1年随访调查，检测外周血TAP、ICAM-1及阴道分泌物HPV，随访期间若确诊患者复发立即停止检测。

1.2.2血清TAP检测对照组于入组后完成血清TAP指标检测，宫颈癌组患者于术前、术后出院时及术后12个月内入院复查时进行检测。取受检人员食指末端梢血两滴置于两片涂片上，风干后利用TAP检测试剂均匀间隔相同滴入两片涂片上，加凝聚助剂干燥，做成血液标本即表面有圆形斑点，利用生物显微镜、摄像机图像传感器、计算机TAP检测系统进行观察和检测TAP聚物面积。

1.2.3HPV检测受检者膀胱截石位，常规收集阴道分泌物，采用Cobas HPV检测试剂盒检测，采用聚合酶链反应扩增和荧光检测技术，由专科技术人员严格按照试剂盒说明书处理标本提取DNA后进行PCR扩增并判定结果。每次实验均设置阴性、阳性对照作为质量控制。对照组人员于入组后完成阴道分泌物HPV标本检测，宫颈癌组于术前、术后3个月及术后12个月内入院复查时完成阴道分泌物HPV检测。

1.2.4ICAM-1指标检测对照组入组后取空腹静脉血离心分离上清，置ICAM-1酶标板上，加待测标本40μg，充分混匀后放置于37℃室温环境，45 min后洗涤并加抗体工作液，加底物工作液40μg，置于37℃暗处反应15 min，加终止液混匀；450 nm处测吸光度值，根据标准曲线计算每管组织液中ICAM-1水平，所有标本采用双孔检测，数值采取复孔均值。宫颈癌组于术前、术后出院时及术后12个月内入院复查时进行检测，检验步骤均同上。

1.3 观察指标

对比宫颈癌组术前及对照组各项检测指标水平；分析宫颈癌组术后复发情况并对比临床资料，对比复发组及未复发组各时间段指标检测水平；分析外周血TAP、HPV、ICAM-1检测诊断效能，各指标水平与围绝经期宫颈癌变患者预后的相关性。

1.4 评估标准

手术后复发指宫颈癌经手术彻底切除，手术标本切缘无肿瘤，术后1年内出现新发肿瘤，且与原肿瘤细胞一致，最终确诊依据为病理组织学，若无法行病理诊断则为PET/CT等影像学检查共同诊断[7]。按部位复发分为中心性复发(包括宫颈、阴道或宫体)，宫旁复发(包括盆壁)，中心性复发和宫旁复发统称为盆腔复发；远处复发(或转移)指盆腔外全身不同部位的肿瘤转移(包括淋巴结转移、肺转移、肝转移、骨转移、脑转移等)。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 两组临床基线资料

对照组患者年龄(47.0±3.7)岁(40～55岁)，体质指数(BMI)(21.7±2.6)kg/m2(18.6～26.8kg/m2)；宫颈癌组年龄(46.7±3.9)岁(43～54岁)，BMI(21.6±2.5)kg/m2(18.4～27.1kg/m2)。两组对比无差异(t=-0.533、-0.300，P=0.594、0.764)。

2.2 两组各指标检测水平

宫颈癌组血清TAP、ICAM-1水平及高危型HPV阳性率均高于对照组(均P<0.001)。见表1。

表1 术前两组各项指标检测水平对比

2.3 宫颈癌组术后1年复发情况

随访1年，统计围绝经期宫颈癌患者预后情况，分为复发组(37例)及未复发组(95例)，两组临床基线资料对比未见差异(P>0.05)。见表2。

表2 宫颈癌术后1年不同预后患者临床基线资料对比

2.4 宫颈癌组术后不同时期随访指标检测水平

血清TAP、ICAM水平及高危型HPV阳性率，术前、术后3个月复发组与未复发组未见差异(均P>0.05)；术后12个月，复发组均高于术后3个月，未复发组均低于术前及术后3个月，且复发组各指标水平均高于未复发组(均P<0.001)。见表3。

表3 两组不同时期各指标检测水平对比

2.5 外周血TAP、ICAM-1及HPV预测术后复发效能

ROC曲线分析显示，血清TAP、ICAM-1及HPV联合检测曲线下面积(AUC)高于单项指标检测。见表4。

表4 TAP、ICAM-1、HPV预测宫颈癌术后复发价值

2.6 TAP、ICAM-1、HPV与围绝经期宫颈癌变患者手术预后的相关性

Spearman相关系数分析显示，TAP、ICAM-1水平及高危型HPV阳性率与患者手术预后均呈正相关(r=0.788、0.728、0.748，均P<0.001)。

3 讨论

临床数据表明，宫颈癌患者接受手术治疗后5年内再复发率为15%，术后复发是导致患者死亡率上升的重要危险因素，而复发的重要机制及临床特征为恶性肿瘤细胞增殖并迁移，术后复发是导致宫颈癌患者死亡的重要原因[8]。临床中虽然对宫颈癌术式进行不断改良，使其趋向操作简单化、微创化发展，临床疗效也得到有效提升，但对患者而言，体内存在的癌变细胞已丧失正常细胞形态及功能，具有难以抑制和易转移等特点，且多数患者就诊较晚，手术治疗后仍会出现复发现象。寻找有效的预测和诊断标志物，对术后早期预警尤为重要[9-10]。

本研究结果显示，围绝经期宫颈癌变患者术前TAP、ICAM-1水平及高危型HPV阳性率均呈水平异常升高，术后出院时均明显降低水平趋向正常，而1年随访中，复发患者各指标水平与未复发患者存在明显差异，提示TAP、ICAM-1及高危型HPV阳性率与宫颈癌变发生发展有关。分析可能机制：TAP是恶性肿瘤患者机体中癌细胞进行新陈代谢所排放的一类异常糖蛋白与钙-组蛋白的复合物，患者体内正常细胞在癌变过程中，细胞膜表面的聚糖结构受其影响而导致分支增加，这一过程诱导TAP大量释放，因而宫颈癌变术后复发患者TAP指标异常升高，杨双祥等[11]研究结果也证实了这一点。细胞黏附分子(CAM)泛指一类调节细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间相互结合和起黏附作用的膜表面糖蛋白，目前发现有ICAM-1、ICAM-2和ICAM-3[12]。国内一项关于宫颈癌变机制的研究显示，宫颈癌的原发灶及淋巴转移灶中检测到 ICAM-1 表达，转移灶中 ICAM-1表达明显高于原发灶，分析原因可能 ICAM-1能与淋巴细胞功能相关蛋白结合，从而参与机体免疫、炎症及肿瘤的发生和转移等过程[13]。HPV是临床已知能够导致宫颈癌发生的重要因素之一，已感染病毒的患者若不及时采取积极有效的治疗方案，很有可能导致病毒进一步发展，进而促进宫颈癌变，甚至出现浸润瘤[14]。HPV病毒的感染方式具有多样性。相关研究表明，宫颈炎的发生与HPV的感染率关系较低，而宫颈癌变发生受HPV的感染率影响较高，可见，宫颈癌术后复发与HPV感染也具有相关性[15]。本研究对宫颈癌根治术患者随访观察，明确根治术能够有效切除患者的肿瘤病灶，有效抑制了宫颈癌细胞的进一步分化，避免了癌细胞严重恶化，减少患者体内TAP、ICAM-1、HPV等产生。ROC曲线分析，3项指标联合检测预测患者术后复发有较高效用，且3项指标与患者预后均密切相关，表明腹腔镜宫颈癌根治术后监测TAP、ICAM-1、高危型HPV等指标对评估患者复发风险具有重要参考价值。

综上所述，腹腔镜宫颈癌根治术后患者，联合TAP、ICAM-1、高危型HPV可提高疾病复发的预测效能，以尽早预后评估并对复发风险做出针对性处理，提高宫颈癌患者的术后生存率。