呼和浩特地区表观健康成年人群血清同型半胱氨酸水平分析和参考区间建立

王美英，韩艳秋（内蒙古医科大学附属医院检验科，呼和浩特 010000）

同型半胱氨酸( homocysteine, Hcy )水平过高形成高同型半胱氨酸血症( hyperhomocysteinemia,hHcy )，进而导致心血管疾病、老年痴呆、骨折、肾脏疾病、神经系统疾病等[1-5]疾病的发生。近年研究表明，血清Hcy浓度变化与性别、年龄等相关，同时与地理位置、种族、饮食习惯等因素也相关联[6]，导致不同地区hHcy误判的发生。呼和浩特地区由于地理环境特殊，存在少数民族生活、饮食习惯等特殊性，这些差异性是否会影响该地区Hcy水平未见报道。故本研究分析呼和浩特地区表观健康人群Hcy水平和hHcy检出情况，探究呼和浩特地区Hcy水平与性别、年龄、种族的相关性，建立呼和浩特地区Hcy的参考区间，报道如下。

1 材料与方法

1.1 研究对象 经医院伦理委员会批准，选取2019年1～12月期间内蒙古医科大学附属医院25 678例健康体检者的人员资料，排除标准：①体检资料不全人员；②年龄＜18岁；③肝肾功能不全人员；④糖尿病、高血压、高脂血症人员；⑤具有心血管疾病史人员。最终符合研究标准的共25 678例，其中男性15 064例( 占总数的58.67% )，女性10 614例( 占总数的41.33% )，男女性别比1.42∶1。年龄21～97岁，总体平均年龄为50.93±13.24岁，其中男性平均年龄48.30±13.53岁，女性平均年龄54.64±11.87岁。种族分布为汉族24 741例，其中男性14 567例，女性10 174例，平均年龄为50.91±13.25岁；蒙古族937例，其中男性497例，女性440例，平均年龄为50.85±12.94岁。本研究通过了我院伦理委员会批准。

1.2 仪器与试剂 全自动生化分析仪( 贝克曼，AU5831 )；同型半胱氨酸检测试剂盒(循环酶法，安徽伊普诺康生物技术股份有限公司)。

1.3 方法 收集健康体检者的基本资料，包括性别、年龄、种族等，于体检当天空腹10 h以上，晨起采集肘静脉血5 ml，3 000 r/min离心7 min，取上层血清，进行血清Hcy水平检验（循环酶法，安徽伊普诺康生物技术股份有限公司），使用贝克曼AU5831全自动生化分析仪检测，具体操作严格按照仪器SOP文件《AHCL-ZY1-SH-004贝克曼库尔特AU5831分析系统操作程序SOP》，以及项目SOP文件《AHCL-ZY2-SH-075同型半胱氨酸测定SOP》操作。根据国际参考指标，在空腹10 h以上情况下测定Hcy水平≥15.4 μmol/L为hHcy阳性。

1.4 统计学分析 采用SPSS24.0软件进行统计分析。正态性检验选用Kolmogorov-Smirnov检验；偏态分布或方差不齐计量资料以中位数（四分位间距）即 [M(P25, P75)] 表示，其余正态分布计量资料以均数±标准差(±s)表示；组间水平两两比较采用Mann-WhitneyU秩和检验并计算Z值，多组间比对采用Kruskal-Wallis秩和检验，以P＜0.05为差异有统计学意义；组间检出率统计以率( % )表示，多组间比较采用F检验，两组比较采用χ2检验；相关性分析采用Spearman相关分析；影响因素分析采用logistic线性回归分析；采用百分位数法取双侧参考值区间( P2.5，P97.5)建立参考值范围。

2 结果

2.1 Hcy数据的正态性检验 Hcy数据正态性检验结果表明，W=0.235，P=0.000。Hcy数据呈偏态分布，采用M(P25, P75)进行描述。

2.2 不同性别、年龄、种族血清Hcy水平分析

2.2.1 不同性别、年龄血清Hcy水平分析：见表1。血清Hcy总水平为12.29(10.49, 14.88) μmol/L，其中男性为12.43(10.62, 14.54) μmol/L，女性为12.10(10.31, 14.54) μmol/L，年龄组间男性血清Hcy水平均高于女性，差异具有统计学意义(均P＜0.05)。体检者血清Hcy水平随着年龄的增加而增加，其中男性年龄组间比对Z= -2.417～4.657，P=0.000～0.269，女性年龄组间比对Z=1.970～3.896，均P＜0.05。

表1 呼和浩特地区不同性别、年龄血清Hcy水平[M（P25, P75）μmol/L]

2.2.2 不同种族Hcy水平分析：蒙古族人血清Hcy水平[12.28(10.53, 15.05) μmol/L] 与汉族人血清Hcy水平 [12.25(10.47, 14.86) μmol/L]比较，差异无统计学意义(Z=-1.086，P=0.127 )。

2.3 Hcy水平与性别、年龄、种族相关性分析 Spearman相关性分析结果表明，Hcy血清浓度与性别、年龄因素均呈正相关(r=0.057，0.086，均P＜0.05)，与种族因素无相关性(r=0.031，P=0.069)。这表明建立呼和浩特地区健康人群Hcy参考区间需要考虑性别、年龄等相关因素。

2.4 不同性别、年龄、种族hHcy检出情况

2.4.1 不同性别、年龄hHcy检出情况：见表2。hHcy总检出率为21.79%，其中男性23.83%，女性18.89%；不同总检出率随年龄增长而升高，各年龄组总检出率、男性检出率、女性检出率比较差异有统计学意义（F=4.142，5.444，7.100；P=0.042，0.020，0.008）；各年龄组间男性hHcy检出率均高于女性，差异具有统计学意义（均P＜0.05）。

表2 呼和浩特地区不同性别、年龄hHcy检出情况（%）

2.4.2 不同种族hHcy检出情况：蒙古族人群hHcy检出率( 22.63% )高于汉族人群(21.76% )，且差异具有统计学意义 (χ2=46.148，P=0.000 )。

2.5 hHcy检出率影响因素分析 见表3。将性别、年龄、种族作为hHcy检出率的影响因素进行分析，其中性别( 男=1，女=0 )、年龄( 21～50岁=0，＞50岁=1 )、种族( 蒙古族=1，汉族=0 )为自变量。单因素分析表明hHcy检出率与年龄、性别相关联( 均P＜0.05 )，与种族关联性不大(P＞0.05)。多因素分析表明年龄、性别因素是hHcy检出的独立影响因素( 均P＜0.05 )。

表3 hHcy检出率影响因素分析

2.6 呼和浩特地区健康人群血清Hcy参考范围的建立 本研究中，血清Hcy数据呈偏态分布，因此采用百分位数法建立参考值范围。依据表1中组间分析结果，将男性、女性年龄分组中血清Hcy水平无统计学意义的年龄组合并，详细分组和结果见表4。

表4 呼和浩特地区健康人群Hcy参考范围

2.7 参考区间的验证 重新招募选取20例健康成年人群，重新测定其Hcy水平，对建立的参考区间进行验证，其中男性10例，年龄25～91岁；女性10例，年龄24～83岁，检测结果表明20例血清Hcy水平测定值均在建立的参考区间±10%范围之内，验证本研究所建立的参考区间可以用于临床。

3 讨论

Hcy是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中所产生的中间代谢物，正常情况下水平较低，但随着心脑血管、肾脏、神经系统等疾病的发生，Hcy代谢受到影响，导致hHcy的发生，因此检测血清Hcy水平对有关疾病的预防与诊断有重要意义，由于Hcy水平可能受区域、年龄、性别、种族等因素的影响[7-8]，本院所处的呼和浩特地区由于其地理位置特殊、民族种类多，其Hcy水平的参考范围可能需要考虑年龄、性别、种族等因素，而以Hcy水平国际参考区间诊断hHcy，可能造成误诊，为避免呼和浩特地区hHcy的误诊，对呼和浩特地区健康人群血清Hcy水平分析和参考区间建立十分重要。

本研究旨在分析呼和浩特地区健康人群Hcy水平与年龄、性别、种族的相关性，根据年龄、性别、种族等因素建立呼和浩特地区Hcy水平参考区间，为临床诊断提供一定的参考。Hcy水平分析表明，Hcy水平随着年龄的增加而增加，男性Hcy水平均高于女性，报道表明可能因多方面原因所致，比如机体代谢能力变化、激素水平的差异、维生素水平的差异、生活习惯的差异等，ZHANG等[10]人研究表明雌激素可以在人群水平上对hHcy和高血压患者发挥保护作用，与Hcy浓度呈负相关，因此男性Hcy水平高于女性。同时有研究表明，成年后随着年龄的增加，人体代谢能力不同，机体维生素水平的差异性等均会导致Hcy浓度的增加[11-12]，蒙古族人与汉族人Hcy水平组间比较差异无统计学意义，这仅能初步表明，呼和浩特地区人群的Hcy水平与年龄、性别可能具有相关性，与种族相关性不大。为验证这一猜想进行相关性分析，spearman相关性分析结果显示，呼和浩特地区健康人群的Hcy水平与性别、年龄因素相关，与种族因素无相关性。

为探究血清Hcy水平与年龄、性别间的相关性是否会导致hHcy的误判，本研究根据hHcy检出的国际参考范围，分析了呼和浩特地区健康人群不同年龄、性别、种族hHcy检出情况，结果表明hHcy检出率随着年龄的增加而增加，男性hHcy检出率远远高于女性，其hHcy检出率在性别、年龄中的变化与Hcy水平变化一致，表明性别、年龄因素可能影响hHcy检出率的变化。

蒙古族人群hHcy检出率高于汉族人群，而蒙古族与汉族间血清Hcy水平不具有差异性，因此种族因素是否会导致hHcy检出率变化还是未知，为进一步探究，将年龄、性别、种族作为hHcy检出率的影响因素进行线性回归分析，结果表明年龄、性别因素是hHcy检出的独立影响因素。hHcy检出情况及影响因素分析验证了以上猜想，即由于Hcy水平与年龄、性别具有相关性，以国际hHcy检出参考范围来检测呼和浩特地区的hHcy患病情况，其检测结果受年龄、性别的影响，导致临床上的hHcy误判，因此依据Hcy水平与性别、年龄的相关性，建立呼和浩特地区的Hcy参考范围意义重大。

本研究我们通过呼和浩特地区25 678例健康体检者的血清Hcy水平分析，综合年龄、性别因素，建立了呼和浩特地区男女性不同年龄段的血清Hcy参考区间，与以往研究中的血清Hcy参考区间均有差异性[9,13-14]，旦曲等[9]人研究拉萨地区血清Hcy参考区间最高上限为22.41 μmol/L，该研究是采用百分位法单侧95%参考值区间建立的参考值范围，与本研究使用的双侧方法有所差异。其余的两项报道[13-14]中血清Hcy参考区间明显低于本研究，一方面是因为地理位置的差异性，另一方面是样本数据来源不同或样本数据大小因素，同时验证结果表明检测水平均在建立的参考区间±10%范围之内，因此本研究所建立的参考区间可用于临床诊断及鉴别。

综上所述，血清Hcy水平浓度与性别、年龄因素相关，同时呼和浩特地区血清Hcy的参考范围设置应考虑性别、年龄因素，我们通过呼和浩特地区25 678例健康体检者的Hcy水平分析，综合年龄、性别因素，建立了呼和浩特地区男女性不同年龄段的Hcy参考区间，为呼和浩特地区人群心脑血管疾病、神经性疾病、肾脏疾病等相关疾病的预防、诊断、治疗和临床研究等提供了数据基础和参考意见。本研究仍存在一定的局限性：①蒙古族人群样本量过少，主要是由于医院所处的所在地汉族人群居多。②缺少21岁以下研究样本，同时81岁以上研究样本较少，存在一定的局限性。