小反刍兽疫诊断技术及防治

牟国月

（青海省海西州都兰县畜牧兽医站 816199）

小反刍兽疫是小反刍动物疾病病毒引起的，其主要特征为急性、发热、传染性。而且该类疫病的发病率在90%左右，死亡率高达80%。由于该疫病与牛瘟的临床症状较为相似，因此也被称为伪牛瘟。发病时，动物出现体温异常升高，眼睛、鼻腔、口腔分泌物增多，腹泻、肺炎、口腔糜烂等症状，对养羊业造成极大危害。

1 小反刍兽疫概述

1.1 临床症状

一般情况下，小反刍兽疫具有一定的潜伏期，即3～5d 的时间，最长不超过21d。往往突然发病，体温急剧升高，其体温连续5d 维持在41℃，而且在此期间食欲下降，进食量较少，甚至停止进食，受到感染的动物被毛较乱，口鼻干燥，而且分泌物逐渐由流水样转为黏液物质，难以呼吸，呼吸气体较为恶臭；感染动物空腔内黏膜出现充血症状，两颊黏膜出现大面积的破损，而且流出很多涎液，并且出现糜烂、出血症状，甚至发生坏死性病灶，转而对下唇、小齿龈产生感染[1]。发病后期会出现血水样腹泻、脱水、消瘦等症状，体温开始下降；发生伴发性肺炎、咳嗽。一般情况下幼小动物发病率较高，而且该兽疫类型的死亡率相对较高。

1.2 病理变化

在检剖过程中发现感染动物出现结膜炎、坏死性口炎、鼻腔黏膜腐烂；网胃、瘤胃出现溃疡病变，盲肠、结肠出现条状出血，肺坏死，淋巴结肿大，脾坏死。

1.3 流行病学特性

感染源主要是绵阳和山羊，症状出现7d 后，动物体液、粪便中能检测出很多病毒，传染性较强；主要通过直接接触传染，呼吸系统是主要感染途径，还可以通过精液、胚胎、哺乳进行传播；山羊和绵阳是主要的易感动物，牛、猪是亚临床感染，不具备传播性[2]。

2 小反刍兽疫诊断技术

一般情况下，对小反刍兽疫的诊断包含常规诊断和实验室诊断两种。常规诊断主要是结合发病动物的临床症状、病理变化、流行病学特点等对其实施初步判断，然后开展实验室诊断。其中实验室诊断技术主要包含以下几种方式。

2.1 病原学诊断

（1）AGID，该种诊断技术主要是在高免绵阳身上获得抗血清，并通过病体的肠黏膜、淋巴结等组织结构，制作标准性的PPRV 抗原。在琼脂凝胶催化作用下，并创建合适的温度环境，促进可溶性PPR 抗原与抗体的充分反应，如果出现沉淀线，并与阳性对照抗原一致，可以对其进行阳性判断[3]。PPR抗原较为温和，含毒性较少，难以对病毒进行精准检测。

（2）捕获酶联免疫吸附试验，该种技术主要通过不同类型的抗N 蛋白单克隆抗体，可以对PPRV 在短时间内进行鉴别诊断。部分专家学者研发了双抗体夹心ELISA 检测方法，可以直接处理羊粪便，优化检测流程，该种方式具有特异性、敏感性等优势，并能快速获得检测结果，但检测费用较高。

（3）CIEP，该技术可以以最快的速度对病毒抗原进行检测，其主要检测设备为水平电泳槽，并在其内放置凝胶，添加0.1mol/L 的醋酸巴比妥缓冲液，在凝胶每对孔作用下实现正极加血清，负极加抗原，电泳60min 后可以创建强光环境，对每对孔进行观察，如果其出现2、3 条沉淀线，可以判断其为阳性反应，该种技术方法敏感性更强，且检测速度更快，但对PPRV 与牛瘟难以有效甄别[4]。

（4）病毒分离，该种技术主要是通过在田间获得试验样品，并展开快速诊断的方法。PPRV 能使用羔羊原代肾细胞开展分离操作，并利用可疑病科接种单层细胞培养物，动态观察细胞病变，如果样品中存在PPRV，在5d 内就会出现细胞病变现象，主要表现为细胞逐渐圆化，并开始聚集，逐渐汇聚成核环形排列、钟盘外形的合胞体。

（5）反转录聚合酶链式反应。该种方式也是分子生物学检测方法之一，是小反刍兽疫诊断技术最常用的方法。很多专家学者对其进行研究，获得较好的检测结果。该种技术方法特异性较好，且具有较强的灵敏性，检测速度较快，但容易出现漏检。

2.2 血清学诊断

（1）中和试验。该种方式在国家上较为通用，主要是利用羔羊原代肾细胞或者是Vero 细胞，并将其放置在转管内开展试验操作。在此过程中，需要对灭活待检血清进行倍比稀释，并加入103TCID50/ml 病毒悬液，创设37℃的温度环境，对其持续孵育60min，在各个梯度内提取0.2ml 混合物，并将其放置在转子里面，并在箱内添加1ml 的Vero 细胞悬液，将其倒放，持续3d 时间，如果培养管中出现CPE，要对其进行剔除，并更换维持液，持续旋转培养7d[5]。如果检测结果中出现1/8的稀释血清抗体，可以将其判断为阳性。

（2）ELISA，该种方式主要包含竞争ELISA、间接ELISA。在实际应用中，检测快速，质量较高。在PPR 流行病学检测中得到广泛应用，同时该种方式还可以用于免疫效果评估等。

3 小反刍兽疫防治措施

3.1 强化饲养管理

强化检疫管理，严禁从疫区进口易感染动物，避免从该区域进口动物胚胎、蛋类等动物制品，对引入的动物进行有效隔离，采取科学的消毒措施。要进一步提升饲养管理质量，保障养殖场的安全性，在兽疫指导下，制定完善的防疫机制，强化防疫管理效果。对养殖场相关设施设备进行清洗消毒，避免交叉感染。提升动物饲养营养水平，保障饲养环境温度、湿度和通风条件适宜。对动物生存场所进行定期消毒。

3.2 加强免疫管理

该种疾病危害性较大，难以控制，死亡率较高，造成极大的经济损失。因此，要强化对免疫接种的重视，严格按照相关规定对动物接种相关疫苗，提升小反刍动物疫病的预防能力。当前我国主要使用小反刍兽疫弱毒疫苗，具有较好的安全性，保护时间较长，适用性强，可以对孕期母羊、幼龄羔羊进行接种[6]。近年来加强对同源疫苗的研究，并获得良好的免疫效果。四环素、磺胺类药物对该疫病具有较好的预防和治疗效果。如果发生该类疫病，或相邻地区发生疫情，需对羊群实施强制免疫，并设立隔离带；针对发病动物，按照规定对其进行扑杀；加强防疫技术人员的综合素养，保障免疫工作的有效落实。

4 结语

综上所述，小反刍兽疫具有较大的危害性，一旦发病会对养殖业造成极大的经济损失，不利于养殖业的健康稳定发展。因此，要强化对小反刍兽疫诊断技术的深度研究，掌握其临床症状，并对具体的诊断技术进行分析，尤其要强化对实验室诊断技术的深度研究，提升诊断效果，实现对该疫病的快速高效控制，减少其危害性，并为防治措施的科学设计提供依据。