张 辉,丁梦圆,许学明,汤龙海
(苏州市中心血站,江苏 215006)
输血作为挽救生命的重要治疗手段,特别对大量出血和严重贫血患者是一种不可替代的治疗方法。有研究表明,红细胞血型意外抗体(以前称不规则抗体)的存在会对临床输血安全构成威胁[1],是导致血液输注无效、溶血性输血及新生儿溶血病等不良反应的主要原因。意外抗体是指正常ABO血型中抗-A、抗-B之外的血型抗体,其产生无规律,不符合Landsteiner规则[2]。存在意外抗体的患者如需输血,应予以对应抗原阴性的血液。相较于常见的CCee表型,献血者红细胞ccEE(即C、e抗原阴性)表型较为少见。本研究通过比较不同筛血策略下C、e抗原阴性表型的筛选情况,旨在为输血实验室高效筛选ccEE表型提供参考。
1.1 标本来源 2020年1月—2021年4月苏州市D抗原阳性无偿献血者血液1 442袋。
1.2 试剂与仪器 单克隆IgM型抗-C、抗-e血清(上海血液生物医药有限公司),KA-2200台式离心机(日本KUBOTA)。
1.3 筛血方法 从1 442袋热合血袋血辫中分别取约10μL红细胞于试管中,随机采取两种筛血策略:(1)先加入1滴抗-C试剂,1 000 g离心15 s后观察结果,如阴性再加入1滴抗-e试剂,再次离心后观察,若阴性即为所需ccEE表型。(2)先加入抗-e试剂,再加入抗-C试剂,方法同上。
1.4 筛血成功标准 筛选的C、e抗原阴性红细胞与检出抗-C、抗-e抗体患者标本主侧交叉配血相合。
1.5 统计学处理 应用SPSS 20.0统计学软件对数据进行分析处理,计数资料以频数和率表示,差异性比较采用χ2检验,P<0.05表示差异具有统计学意义。
2.1 ABO四种血型中C和e抗原阴性率 随机采取两种不同策略进行筛查,1 442袋D抗原阳性血液中筛出C和e抗原均阴性血液107袋(7.42%),其中A型61例(6.43%),B型17例(9.34%),O型21例(8.71%),AB型8例(11.43%),ABO各血型中C和e抗原阴性率的差异无统计学意义(χ2=4.562,P=0.207)。见表1。
表1 ABO四种血型中C和e抗原阴性率 例(%)
2.2 两种筛血策略筛血成功率比较 先筛查出C抗原再筛查e抗原,筛查A、B、O、AB四种血型共904袋,筛到111袋C抗原阴性血液中同时e抗原阴性者68袋,筛血成功率61.26%;其中A型筛查441袋,筛到46袋C抗原阴性血液中同时e抗原阴性者25袋,Ce抗原阴性率5.67%。先筛查e抗原再筛查C抗原,筛查A、O两种血型共538袋,筛到43袋e抗原阴性血液中同时C抗原阴性者39袋,筛血成功率90.70%;其中A型筛查508袋,筛到40袋C抗原阴性血液中同时e抗原阴性者36袋,Ce抗原阴性率7.09%。C抗原阴性时,四种血型出现e抗原阴性率分别为A型54.35%(25/46),B型60.71%(17/28),O型64.29%(18/28),AB型88.89%(8/9);e抗原阴性时,出现C抗原阴性率分别A型90.00%(36/40),O型100.00%(3/3)。A型两种筛血策略筛血成功率比较,差异具有统计学意义(χ2=13.189,P=0.000)。
2.3 两种筛血策略成本比较 在C抗原阴性中筛查e抗原阴性,试剂成本8.71元/袋,平均费时3.13分钟/袋;在e抗原阴性中筛查C抗原阴性,试剂成本9.98元/袋,平均费时2.69分钟/袋。
患者经过输血、妊娠等免疫刺激后,可能产生意外抗体。为保证输血安全,患者产生意外抗体后需再次输血时,应输注相应抗原阴性、交叉配血相容的全血和(或)红细胞[3]。Rh系统是除ABO系统外最具有临床意义的血型系统。如今发现的Rh抗原有54个。其中5种主要抗原在临床上具有十分重要的意义,即D、C、c、E、e抗原[4]。中国人中CCDee表型(C、e抗原阳性)在Rh血型系统中比例最高,聊城市中心血站随机抽取18 317名无偿献血者中,Rh(+)无偿献血者各表型中以DCCee比例最高[5],占比60.58%。浙江省人民医院统计19 252名Rh(D)阳性患者的Rh表型以CCDee最多,占43.79%;11 728名Rh(D)阳性献血员的Rh表型以CCDee最多,占43.91%[6]。南宁市中心血站建立28 205名无偿献血者Rh血型表型库,其中CCDee表型16 794名,占比59.50%[7]。D抗原阳性无偿献血者中C、e抗原阴性率,上海市血液中心统计为7.20%,苏州市为7.42%,宣城市人民医院对2 143名Rh(D)阳性无偿献血者进行Rh分型检测,Rh分型分布为CCDee(44.70%)>CcDEe(34.53%)>CcDee(8.77%)>ccDEE(6.44%)>ccDEe(3.13%)>CCDEe(1.26%)>CcDEE(0.61%)>ccDee(0.51%)>CCDEE(0.05%)[8],福建省血液中心在检测的13 015名Rh(D)阳性献血者中CCee表型比例最高(45.50%),其后依次为CcEe(34.17%)、Ccee(8.89%)、ccEE(6.57%)[9],上述几个地区D抗原阳性无偿献血者中C、e抗原阴性率非常接近。
本研究发现,C、e抗原阴性率在ABO不同血型人群中,差异无统计学意义(P>0.05),其中A型人群中阴性率最低为6.43%,O型为8.71%,B型为9.34%,AB型为11.43%,表明ABO血型系统与Rh血型系统无关联。采取不同筛血策略时,C和e抗原阴性率有所差异。先筛查C抗原阴性后再筛查e抗原时,A型阴性率为5.67%(25/441)。先筛查e抗原阴性后再筛查C抗原时,A型阴性率为7.09%(36/508)。两种策略筛查A型血中C和e抗原阴性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);O型、B型、AB型血液筛查的样本量偏少,暂时未进行比较。
两种筛血策略中C抗原阴性时出现e抗原阴性率与e抗原阴性出现C抗原阴性率比较也有差异:C抗原阴性时,四种血型出现e抗原阴性率分别为A型54.35%(25/46),B型60.71%(17/28),O型64.29%(18/28),AB型88.89%(8/9);e抗原阴性时,出现C抗原阴性率分别A型90.00%(36/40),O型100.00%(3/3)。从两种筛血策略的成功率来看,A型成功率差异明显(χ2=13.189,P=0.00)。因A型两种筛血策略数量接近,一定程度上能代表人群中的实际情况。
综上所述,在实际工作中,如需筛查C和e抗原均阴性血液时,建议先筛e抗原阴性后再筛C抗原阴性,筛查成功率相对更高,平均费时2.69分钟/袋,试剂成本9.98元/袋。而先筛C抗原阴性后再筛查e抗原阴性,平均费时3.13分钟/袋,试剂成本8.71元/袋。各单位可根据实际情况选择适合本单位的筛血策略,以便更好为临床服务。