血清脂蛋白相关磷脂酶A2和超氧化物歧化酶在脑小血管病患者轻度认知障碍中的临床价值

满春露， 杨青松

（新乡医学院附属商丘市第一人民医院神经内科，河南 商丘 476100）

脑小血管病（cerebral small vessel disease，CSVD）是认知障碍相关疾病[1]，但伴认知障碍的CSVD的诊断和分类较为困难。目前，临床尚无生物标志物可用于诊断和评估伴认知障碍的CSVD[2]。CSVD患者的认知障碍症状会逐步加重，早期诊断和有效治疗有助于延缓病情进展及转归，因此寻找预测CSVD认知障碍发生的生物标志物具有重要价值。有研究结果显示，系统性炎症介质，如超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein-related phospholipase A2，Lp-PLA2）与认知障碍有关[3-5]，但其在CSVD认知障碍中的作用机制尚不明确。Lp-PLA2可作为心脑血管疾病中的炎症标志物，反映血管的炎症程度[6]。CAI等[7]的研究结果显示，Lp-PLA2是2型糖尿病患者合并认知障碍的危险因素，Lp-PLA2水平越高，发生认知障碍的风险越大。SOD是一种催化超氧化物自由基转化为过氧化氢和氧气的酶，具有很强的抗炎活性[8]。有研究结果显示，SOD是精神分裂症患者疾病早期认知障碍的影响因素[9]。SUN等[10]的研究结果显示，SOD水平升高与老年人群认知障碍发生风险增加有关。本研究拟通过检测CSVD患者血清Lp-PLA2和SOD水平，分析其对轻度认知障碍（mild cognitive impairment，MCI）的预测价值，为MCI的预防和早期治疗提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2018年1月—2021年3月新乡医学院附属商丘市第一人民医院CSVD患者120例。根据患者入院时的蒙特利尔认知评估量表（Montreal Cognitive Assessment，MoCA）评分结果，将MoCA评分＜26分的患者归入MCI组[65例，其中男36例、女29例，年龄（61.2±7.1）岁]，MoCA≥26分的患者归入对照组[55例，其中男34例、女21例，年龄（59.6±6.1）岁]。MoCA评分评分越低，代表认知障碍越严重。本研究经新乡医学院附属商丘市第一人民医院伦理委员会批准，所有患者均签署知情同意书。

1.2 纳入和排除标准

纳入标准：（1）CSVD的诊断符合《中国脑小血管病诊治共识》[11]和《脑小血管病相关认知功能障碍中国诊疗指南（2019）》[12]标准；（2）磁共振成像提示脑白质病变、腔隙性脑梗死或脑微出血、血管周围间隙扩大等，患者伴有认知减退、步态障碍、情绪和行为障碍、膀胱功能障碍等；（3）MCI患者存在1个或多个认知功能下降；（4）预计患者生存时间＞1年。排除标准：（1）合并恶性肿瘤及肝功能、肾功能不全；（2）合并帕金森病、中毒性脑病、阿尔茨海默病、精神性疾病、脑外伤、脑积水等；（3）不能配合相关检查。高血压的诊断符合《高血压基层诊疗指南（2019年）》[13]，糖尿病的诊断符合《中国老年2型糖尿病防治临床指南（2022年版）》[14]。

1.3 方法

收集患者的一般资料[年龄、性别、体质量指数（body mass index，BMI）、吸烟、饮酒和文化程度]、既往病史（高血压、糖尿病、高脂血症和冠心病）。采集所有患者入院次日晨起空腹肘静脉血5 mL，离心分离血清。总胆固醇（total cholesterol，TC）、三酰甘油（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）检测试剂盒购自安诺伦（北京）生物科技有限公司，检测仪器为cobas c501全自动生化分析仪（瑞士罗氏公司）。采用免疫荧光干式定量法检测C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）水平，试剂盒购自日本和光纯药工业株式会社，检测仪器为Getein16000全自动荧光免疫定量分析仪（南京基蛋生物科技股份有限公司）。采用羟胺法测定总SOD水平，试剂盒购自上海高创化学科技有限公司，检测仪器为Evolution 201/220紫外可见分光光度仪（美国ThermoFisher Scientific公司）。

另采集所有患者入院次日静脉血3 mL，离心分离血清，-80 ℃保存待测。采用酶联免疫吸附试验检测Lp-PLA2水平，试剂盒购自英国Abcam公司，最低检测限为45 pg/mL，线性范围为0.16～10.00 ng/mL，批间变异系数（coefficient of variation，CV）＜10%，批内CV＜5%，标准曲线r2值为0.981，检测仪器为Multiskan SkyHigh全波长酶标仪（美国ThermoFisher Scientific公司）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 21.0软件进行统计分析。呈正态分布的计量资料以±s表示，2个组之间比较采用t检验。计数资料以例或率表示，组间比较采用χ2检验。采用Pearson相关分析评估Lp-PLA2、SOD与MoCA评分的相关性。采用多因素Logistic回归分析评估MCI的危险因素。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价Lp-PLA2、SOD诊断MCI的价值。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MCI组与对照组一般资料比较

MCI组与对照组之间吸烟比例、高血压比例差异均有统计学意义（P＜0.05）；年龄、性别、BMI、饮酒比例、糖尿病比例、高脂血症比例、冠心病比例和文化程度差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 MCI组与对照组一般临床资料比较

2.2 MCI组与对照组各项指标检测结果比较

MCI组与对照组之间CRP、Lp-PLA2、SOD和MoCA评分差异均有统计学意义（P＜0.05）；TC、HDL-C、LDL-C和TG差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 MCI组与对照组各项指标检测结果比较

2.3 MCI的危险因素分析

多因素Logistic回归分析结果显示，Lp-PLA2是MCI的危险因素[比值比（odds ratio，OR）=3.241，95%可信区间（confidence interval，CI）为2.014～5.362]，SOD是MCI的保护性因素（OR=0.652，95%CI为0.407～0.964）。见表3。

表3 MCI危险因素分析结果

2.4 MCI组Lp-PLA2、SOD与MoCA评分的相关性分析

Pearson相关分析结果显示，Lp-PLA2与MoCA评分呈负相关（r=-0.535，P=0.017），SOD与MoCA评分呈正相关（r=0.684，P=0.008）。

2.5 Lp-PLA2和SOD单项及联合检测诊断MCI的效能

采用Logistic回归分析得出Lp-PLA2和SOD的联合检测方程为Logit（P）=-16.215+2.325×Lp-PLA2-0.762×SOD。Lp-PLA2、SOD单项检测和联合检测诊断MCI的曲线下面积（area under curve，AUC）（95%CI）分别为0.813（0.741～0.796）、0.738（0.712～0.784）、0.903（0.914～0.968），最佳临界值分别为145.3 mg/L、136.2 kU/L、0.722，敏感性分别为77.6%、75.6%、90.7%，特异性分别为76.4%、64.1%、84.5%。Lp-PLA2和SOD联合检测诊断MCI的效能优于单项检测（Z=3.758，P=0.015；Z=4.593，P=0.006）。见图1。

图1 Lp-PLA2和SOD单项及联合检测诊断MCI的ROC曲线

3 讨论

炎症在脑缺血的发病机制中起着至关重要的作用，血浆Lp-PLA2和SOD是缺血性脑卒中脑血管炎症的特异性指标[4]。Lp-PLA2是公认的评估系统性血管、神经炎症及心脑血管疾病发生风险的标志物，与缺血性卒中和血管性痴呆密切相关[15]。在缺血性CSVD早期，血浆Lp-PLA2水平会发生改变[16]。有研究结果显示，短暂性脑缺血发作和卒中急性期患者血浆Lp-PLA2水平升高，说明Lp-PLA2与脑缺血和卒中的发生有关[17-18]。本研究结果显示，MCI组Lp-PLA2水平高于对照组（P＜0.05）；多因素Logisitc回归分析结果显示，Lp-PLA2是MCI的危险因素（OR=3.241，95%CI为2.014～5.362），且与MoCA评分呈负相关（r=-0.535，P=0.017），提示Lp-PLA2与认知障碍的发生及严重程度有关。分析原因，可能与Lp-PLA2参与炎症反应的重要过程有关，Lp-PLA2可促进单核细胞转变为巨噬细胞，再转变为泡沫细胞，进而损伤血管内皮，促进粥样斑块形成，导致动脉粥样硬化，加速脑血管的损伤[19]。然而，ZHU等[4]的研究结果显示，发生认知障碍的CSVD患者Lp-PLA2水平降低，是血管性认知障碍的保护性因素。造成此差异的原因可能是研究设计、受试者、数据收集方式及检测方法有所不同。ZHU等[4]检测的Lp-PLA2是与高密度脂蛋白相关的Lp-PLA2，这种Lp-PLA2是Lp-PLA2中的一部分，已有研究证实其对心血管有保护作用[20]。

本研究结果显示，MCI组SOD水平低于对照组（P＜0.05），推测SOD水平降低可能会促进CSVD患者发生认知障碍，多因素Logistic回归分析结果显示，SOD是MCI的保护性因素（OR=0.652，95%CI为0.407～0.964），且与MoCA评分呈正相关（r=0.684，P=0.008）。MCI患者SOD水平下降的程度与认知障碍的严重程度有关，提示发生认知障碍的患者可能存在抗氧化防御机制的缺陷。MCI患者由于无法去除循环中的超氧阴离子，因此会增加由活性氧和神经炎症引起的小血管损伤，提示血浆SOD水平较低与血管损伤增加有关[21]。

本研究ROC曲线分析结果显示，Lp-PLA2、SOD单项检测和联合检测诊断MCI的AUC分别为0.813、0.738、0.903，最佳临界值分别为145.3 mg/L、136.2 kU/L、0.722，敏感性分别为77.6%、75.6%、90.7%，特异性分别为76.4%、64.1%、84.5%；Lp-PLA2和SOD联合检测诊断MCI的效能优于单项检测（P＜0.05）。提示Lp-PLA2和SOD或可作为CSVD患者MCI的辅助诊断指标。

综上所述，CSVD患者发生MCI时，Lp-PLA2和SOD均会发生变化，这2项指标是MCI发生的影响因素。Lp-PLA2和SOD或可作为CSVD患者MCI的辅助诊断指标。