北京地区老年人群血浆维生素A，D和E水平检测结果分析

李 敏，孙江漫，孟祥兆，邵 燕，韩玉霞，于洪远（北京航天总医院检验科，北京 100076）

脂溶性维生素在人体生长、代谢、发育、免疫调节等过程中均发挥着重要作用，常见的种类有维生素A，D，E。与碳水化合物、脂肪、蛋白质缺乏所形成的营养不良不同，维生素缺乏常常无显著的临床症状[1]。随着我国人口老龄化趋势的加重，老年人的营养状态应引起医务工作者的重视。本研究通过对北京地区2 043例60岁以上老年人群血浆维生素A，D，E水平进行回顾性分析，初步了解老年人维生素的分布情况，旨在为维生素合理的补充提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选择2020年12月～2021年11月在北京航天总医院就诊并进行维生素A，D，E检测的60岁及以上老年人2 043例，其中男性 956例，女性1 087例；年龄60～95岁，按年龄分为60～65岁，65～70岁，70～75岁，75～80岁和80岁以上共5组。按季节分为春季（3～5月），夏季（6～8月），秋季（9～11月）和冬季（12～2月）共4组。所有研究对象身心健康，排除患有遗传病、先天性疾病等基础疾病及近期有发热、感染、肝肾功能异常的老年人。所有研究对象的监护人对检测均知情同意。本研究为回顾性研究，无任何患者个人特征信息暴露，符合赫尔辛基宣言的伦理准则。

1.2 仪器与试剂

1.2.1 仪器：Waters TQD串联ACQUITY UPLC液相色谱质谱联用仪，Agela氮吹仪，Eppendorf移液器，Eppendorf高速冷冻离心机，Milli Q超纯水机。

1.2.2 试剂：各化合物的标准品（Sigma公司）；维生素A，E的内标（Sigma公司）；维生素D2，D3的内标（CIL公司）；甲醇、甲酸、正己烷（美国ThermoFisher公司）。

1.3 方法

1.3.1 样本采集：研究对象空腹静脉采血，2 h内离心分离血浆，－20 ℃保存。

1.3.2 样本处理：取200μl待测样品转移至对应的1.5ml离心管，加 20μl混合内标溶液,涡旋混匀。往上述离心管中加入200μl甲醇，振荡混匀。蛋白质沉淀后加入800μl正己烷，涡旋混匀10min。在4℃及13 000r/min的条件下离心10min，吸取600μl上清液于新的离心管中，氮气吹干。加入100μl 75 g/dl甲醇复溶，4℃, 4 200r/min的条件下离心 5min，取80μl上清液上机检测。

1.3.3 判断标准：本实验室维生素A，E的正常参考值分别为：300～1 200ng/ml，5 500～18 000 ng/ml，因国内对维生素A，E缺乏的评价标准不一致，本研究将低于实验室的正常参考值下限的判定为缺乏/不足，高于正常参考值上限的判定为过量。目前国际、国内多数机构和专家认为，25OHD≤20.0 ng/ml为维生素D缺乏，20.1～30 ng/ml为维生素D不足，30.1～100ng/ml为维生素D充足[2-3]。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0进行数据分析。用Kolmogorov-Smirnov test进行正态性检验，正态分布的计量数据采用均数±标准差（±s）表示，非正态分布数据采用中位数（四分位数范围）[M（P25，P75）]表示。两独立样本的比较用Mann-WhitneyU检验，多个独立样本的比较用Kruskal-WallisH检验。组间比较采用卡方检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 总体检测情况 见表1。共检测2 043例60岁以上老人血浆维生素A，D，E水平，其缺乏/不足率分别为19.43%，92.61%，10.13%。

表1 2 043例老人的血浆维生素A，D，E营养情况 [n(%)]

2.2 不同性别血浆维生素水平比较 见表2、表3。不同性别的维生素A，E水平及缺乏/不足率差异均无统计学意义（均P＞0.05）。女性维生素D水平低于男性（Z=-6.72,P＜0.01）, 缺乏/不足率高于男性，差异有统计学意义(χ2=4.38,P＜0.05)。

表2 不同性别老人血浆维生素A，D，E水平比较 [M（P25～P75）ng/ml]

表3 不同性别老人血浆维生素A，D，E缺乏/不足率比较 [n(%)]

2.3 不同年龄血浆维生素水平比较 不同年龄组间的维生素A，D水平差异均具有统计学意义（均P＜0.05），70岁以上老人维生素A，D水平随着年龄增长呈下降趋势。维生素E水平在不同年龄组差异无统计学意义（P＞0.05），见图1，表4。维生素A，D，E的缺乏/不足率在不同年龄组间的差异均有统计学意义（P＜0.05），70岁以上老人维生素A，D的缺乏/不足率明显升高，见表5。

表4 不同年龄组老人血浆维生素A，D，E水平比较 [M（P25～P75）ng/ml]

表5 不同年龄组老人血浆维生素A，D，E缺乏/不足率比较 [n(%)]

图1 不同年龄组维生素A（ng/ml）、维生素E（ng/ml）、维生素D（μg/ml）水平变化

2.4 不同季节血浆维生素水平比较 按季节分组，不同季节维生素A，D，E水平差异具有统计学意义（均P＜0.05）。维生素A水平春季最高，秋季最低。维生素E水平夏季最高，春季最低。维生素D水平夏季最高，冬季最低，见表6。维生素A，D，E的缺乏/不足率在不同季节间的差异均具有统计学意义（均P＜0.05），维生素A秋季缺乏率最高，维生素E冬季缺乏率最高，维生素D冬季缺乏率最高，夏季缺乏率最低，见表7。

表6 不同季节老人血浆维生素A，D，E水平比较[M（P25～P75）ng/ml]

表7 不同季节老人血浆维生素A，D，E缺乏/不足率比较[n(%)]

3 讨论

维生素A，D，E是维持机体正常代谢和功能的必须营养素。维生素A水平会影响老年人血脂水平，引起代谢综合征和糖尿病的发生[4]。维生素D缺乏不仅会导致骨质疏松，还与血脂异常、心血管疾病、恶性肿瘤、认知功能等密切相关[5]。维生素E水解产物是主要的抗氧化剂之一，可降低冠心病及脑卒中发生的危险。老年人是维生素缺乏的高危人群，本研究通过回顾性分析2 043例60岁以上老年人群血浆的维生素检测结果，了解老年人维生素的分布情况。

对所有维生素的检测结果按照性别、年龄、季节进一步分组分析。按性别分组，女性维生素D水平低于男性，缺乏/不足比例高于男性，差异有统计学意义（P＜0.05），这与国外文献的研究结论一致[6]。绝经后的女性雌激素缺乏，破骨细胞功能增强，骨丢失加速，血钙升高，抑制维生素D的合成[7]，因此老年女性更需要注重维生素D的补充。按年龄分组， 70岁以上老人维生素A，D水平随着年龄增长呈下降趋势，缺乏/不足率明显升高，这与之前国内的报道结论一致[8]。70岁时皮肤中合成维生素D的原料7-脱氢胆固醇只剩下年轻时的25%，加之老年人维生素D受体数量和功能不足，肾脏1α-羟化酶活性也随着年龄的增长而降低，这些因素均会影响维生素D的合成。维生素A，D，E均属于脂溶性维生素，食物中要保证有一定的脂肪摄入才能促进它们的吸收。随着年龄的增长，老年人饮食习惯偏向单一，对不易咀嚼的肉类、动物肝脏等摄入减少，这也可能导致维生素水平的降低。按季节分组，维生素A水平秋、冬季较低。北方地区秋冬季节各种新鲜蔬菜水果的供应相对减少，维生素A在体内不能合成，只能通过膳食补充，这可能导致老年人摄入富含维生素A的食物相对减少。维生素E水平一年四季总体的缺乏率波动不大，这与维生素E在自然界内分布广，植物油、小麦、谷类等人类主食中富含维生素E有关。维生素D水平夏季最高，缺乏率最低，冬季水平最低，缺乏率最高。有研究表明，阳光照射合成的维生素D占人体需要量的93%～95%，食物提供的维生素D不到机体需要量的10%[9]。夏季阳光充足，维生素D合成增加。北方地区冬季气温较低，日照时间相对短，老年人户外活动相对减少，通过紫外线合成和吸收的维生素D减少。

既往研究中，大多采用免疫法对维生素进行检测,特异度低。本文采用的超高效液相色谱串联质谱的方法具备液相色谱的高分离性和质谱强大的分离鉴定能力，不会受到类似物或其他干扰物质的影响，有利于临床精准判断维生素的营养状况并提供治疗方案。本研究有方法学上的优势，但同时也存在不足。首先是纳入的样本仅为北京航天总医院的检测样本，不能代表中国人群，有待进一步多中心研究的证实。其次有研究表明，地区纬度对维生素的水平有较大影响[10]，本文未将不同区域纬度的影响考虑在内，后续研究中将加以补充。此外，对于不同年龄段维生素缺乏和不足的判断标准，国内外可查的相关文献较少。对于现有的判断标准，未具体说明该标准对应的方法学原理，也会造成统计结果的偏差。

随着我国人口老龄化趋势的加重，老年人的保健问题应引起社会的关注。对于维生素的营养状态，国内有许多针对儿童的调查和报道[11-12]，关于老年人的研究相对较少。本研究的结果表明，老年人的维生素营养状况较差，尤其是维生素D缺乏比较严重，需加强对老年人的营养健康指导，合理增加饮食中维生素及相关补充剂的摄入，以满足机体需求。