2019—2021 年广西梧州市羊传染病的检测与分析

李晓玲，谢丽华 *，肖萍，王健文，莫奇初，严珮珊，吴颖航，黄治权，林嘉敏

（1.藤县埌南镇水产畜牧兽医站 广西梧州 543304；2.梧州市动物疫病预防控制中心 广西梧州 543002；3.藤县岭景镇水产畜牧兽医站 广西梧州 543309；4.藤县新庆镇水产畜牧兽医站 广西梧州 543307；5.梧州市渔业资源养护中心 广西梧州 543002）

羊主要传染病有口蹄疫（foot and mouth Disease，FMD）、小反刍兽疫（peste des petits ruminants，PPR）、布鲁氏菌病（brucellosis）等。口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的以偶蹄类动物为主的急性、热性、高度传染性疫病，临床以唇舌、齿龈、蹄踵、乳房等部位出现水疱为特征。小反刍兽疫，是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性病毒性传染病，临床以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征。FMD、PPR 均是我国一类动物疫病和强制免疫的病种。布鲁氏菌病是由细胞内寄生的布鲁氏菌引起的一种人兽共患病，该菌侵害淋巴系统和生殖系统，导致母畜流产和公畜睾丸炎。上述三种羊病不仅对羊健康危害巨大，同时也是其他偶蹄、小反刍动物甚至人类传染病的感染来源，严重威胁畜牧业或人体健康，加强监测具有重要意义。

1 材料与方法

1.1 材料

1）免疫疫苗。口蹄疫O 型灭活疫苗、小反刍兽疫弱毒疫苗，均为政府采购疫苗。

2）样品数量。采集2019—2021 年梧州市七个县（市、区）养殖场户、屠宰场羊血清8,691 份，羊眼结膜棉拭子和淋巴结、脾、肺等组织样品1,920 份。

3）仪器设备。帝肯Sunrise 酶标仪、ABI Q5 实时荧光PCR 仪、赛默飞二级生物安全柜等。

4）检测试剂。O 型口蹄疫液相/固相阻断ELISA 抗体检测试剂盒（兰州所/金诺）、小反刍兽疫竞争ELISA 抗体检测试剂盒（青岛立见）、布病虎红平板凝集试验抗原（青岛立见）、布病竞争ELISA抗体检测试剂盒（青岛立见）、小反刍兽疫病毒实时荧光RT-PCR 检测试剂盒（深圳梓健）。

1.2 方法

1）口蹄疫免疫和抗体检测。规模场羔羊28～35 日龄首免，一个月后二免，以后每隔4 个月免疫一次。散养户每年春秋两季集中免疫，每月对新增补栏免疫。免疫21d 后，采集血清检测抗体。参照GB/T18935-2018 口蹄疫诊断技术液相阻断ELISA 检测方法，羊血清抗体效价≥27 判定为免疫合格个体；或使用固相阻断ELISA 检测方法，血清抗体阳性，判定为免疫合格个体。免疫合格个体数量占群体总数的70%（含）以上，判定免疫合格群体。

2）小反刍兽疫免疫和抗体、病毒检测。新生羔羊1 月龄以后免疫1 次。免疫1～3 个月内，采集血清检测抗体。参照GB/T27982—2011 小反刍兽疫诊断技术竞争ELISA 检测方法，结果阳性判定为免疫合格个体。免疫合格个体数量占群体总数的70%（含）以上，判定免疫合格群体。病原学样品参照GB/T27982—2011 小反刍兽疫诊断技术实时荧光RT-PCR 方法检测小反刍兽疫病毒。

3）布鲁氏菌病非免疫检测和阳性剔除。采集血清，参照GB/T 18646—2018 动物布鲁氏菌病诊断技术及虎红平板凝集试验初筛检测，阳性样品用竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）进行复核。确诊阳性动物按照农业农村部布鲁氏菌病防治技术规范予以扑杀、无害化处理。

2 结果

2.1 口蹄疫免疫和抗体检测情况

2019—2021 年累计免疫羊口蹄疫9.13 万只次，每年应免免疫密度达100%。平均群体免疫合格率为91.18%，个体免疫合格率为89.05%（表1）。

表1 羊口蹄疫免疫和抗体检测情况

2.2 小反刍兽疫免疫和抗体、病毒检测情况

2020—2021 年累计免疫羊小反刍兽疫7.75 万只次，每年应免免疫密度达100%。平均群体免疫合格率为96.52%，个体免疫合格率为95.01%。病原学检测样品1920 份病毒均为阴性（表2）。

表2 小反刍兽疫免疫和抗体、病毒检测情况

2.3 布鲁氏菌病非免疫抗体检测情况

2019—2021 年累计监测羊布鲁氏菌病场点154 个次、羊血清3,319 份，群体阳性率为0.65%，个体阳性率为0.03%（表3）。

表3 布鲁氏菌病非免疫抗体检测情况

3 讨论

本研究采用最新国家标准诊断方法，使用权威机构或进口诊断试剂开展羊病检测。其中，兰州所口蹄疫改进型液相阻断ELISA试剂盒、韩国金诺口蹄疫固相阻断ELISA 试剂盒在广西疫控机构广泛使用，检测时间短，试剂稳定，必要时采用液相、固相互相验证，确保准确性。青岛立见小反刍兽疫竞争ELISA 试剂盒是诊断国家外来性疫病-小反刍兽疫的可靠试剂，小反刍兽疫病毒荧光RT-PCR 方法较常规RT-PCR 方法更为敏感、快速。布鲁氏菌病检测采用平板凝集初筛、竞争ELISA 复核方式，既能提高效率，又能实施确诊，且布病ELISA 确诊方法相对于传统试管凝集试验，减少人为主观误差，缩短反应时间。本研究检测数据可靠，为广西梧州市口蹄疫、小反刍兽疫、布病防控提供科学支撑。

当前，口蹄疫、小反刍兽疫防治采用强制免疫方法，免疫密度和抗体水平是防控效果的重要指标。梧州市2019—2021 年羊饲养量介于2.97～3.86 万只之间，口蹄疫、小反刍兽疫免疫数量分别达到2.55～3.39 万只和2.15～3.01 万只，个体免疫抗体合格率分别为85.42%～91.74%和90.98%～97.3%，群体免疫合格率分别为88.37%～94.29%和95.0%～97.67%，小反刍兽疫病毒检测均为阴性。除去免疫保护期内、未达免疫日龄或因病不宜免疫等客观因素外，免疫密度均达到100%，免疫抗体合格率均远超过国家规定的70%最低保护线要求。监测结果表明，梧州市羊口蹄疫和小反刍兽疫免疫效果良好，政府采购疫苗效果确切，可以阻断相应病种的大面积流行。但也需要注意，口蹄疫、小反刍兽疫每年都有免疫不合格的场群，特别是口蹄疫的个体和群体合格率不稳定，仍然存在散发感染传播的潜在风险。

近年来，我国布鲁氏菌病流行呈上升趋势。根据《国家布鲁氏菌病防治计划》（2016—2020 年）显示，2015 年全国布病重点地区22 个县248 个定点场群的羊布鲁氏菌病个体阳性率达到3.3%、群体阳性率达到34%。广西梧州市2019 年监测羊1,647 只，布病阳性1 只，个体阳性率为0.06%，群体阳性率为1.56%。监测结果表明，2019 年以来梧州市羊只出现布病感染情况，但数量不多，以零星个体阳性为主，2020—2021 年未发现感染情况，羊群布病处于稳定控制标准（个体阳性率0.1%）以内。随着广西大力发展牛羊产业政策出台，牛羊跨区域调运将愈发频繁，不按规定调运、检疫和隔离观察可能成为输入性布鲁氏菌病的主要因素。因此，持续加强布鲁氏菌病监测，防止布病输入和传播扩散显得尤为重要。