吴中艳,覃杰
(1.新疆兵团第二师37 团农发中心 新疆巴音郭楞 841900;2.第二师畜牧兽医工作站 新疆铁门关 841005)
肺炎是羊最常见的一种呼吸道疾病。其病因复杂,饲养管理不当以及细菌、病毒、支原体、寄生虫等病原均可引起肺炎。根据临床症状和病理变化肺炎可分为支气管肺炎、大叶性肺炎、化脓性肺炎、异物性肺炎等。羊肺炎的临床症状发展速度大多较慢,但部分羔羊发病迅速,死亡率的高低不定。本实验对巴州地区引起绵羊肺炎的病原进行筛查,旨在找到主要病原,为绵羊肺炎防治提供参考。
2019—2021 年间分别在巴州地区12 家规模羊场和24 家散养户采集肺炎绵羊脏器(肝、肺、心、脾和肾),眼结膜、鼻腔拭子以及相应的血清样品(采集前不对肺炎羊进行任何针对性治疗和免疫),各240 份,共960 份。巴音布鲁克羊、刀郎羊为本地品种,湖羊、小尾寒羊、杜泊羊和萨福克羊为外来品种。
主要培养基:普通营养肉汤培养基、普通琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、血琼脂培养基、脱纤维羊血。细菌微量生化反应管购自杭州滨和微生物试剂有限公司。绵羊支原体检测试剂盒购自雅吉生物(批号202009)、呼吸道合胞体病毒抗体检测试剂盒购自爱德士蒙利埃有限公司(批号20150)、副流感病毒ELISA 抗体检测试剂盒购自爱德士蒙利埃有限公司(批号21046)、小反刍兽疫荧光PCR 检测试剂盒购自北京世纪元亨生物技术公司(批号21030)。
1.3.1 细菌分离鉴定将采集的脏器、鼻拭子样品按照常规划线分离细菌的方法接种于普通营养琼脂、麦康凯琼脂培养基、血平板培养基上,于37℃细菌恒温培养箱中培养18~24h 后挑取单个菌落纯化培养后进行生化鉴定。
1.3.2 血清抗体和眼鼻拭子核酸检测支原体、呼吸道合胞体病毒抗体、副流感病毒抗体ELISA 检测试剂盒分别检测支原体、呼吸道合胞体病毒抗体、副流感病毒抗体,具体操作步骤按试剂盒说明书进行。
1.3.4 数据处理运用统计软件SPSS 19.0 对数据进行分析。
溶血性曼氏杆菌检出率最高达到27.1%,其次为链球菌检出率为21.6%,再次多杀性巴氏杆菌检出率达17.9%,其中溶血性曼氏杆菌的检出率显著高于多杀性巴氏杆菌、支原体、结核分枝杆菌抗体的检出率。多杀性巴氏杆菌、支原体、链球菌检出率显著高于结核分枝杆菌抗体的检出率。小尾寒羊多杀性巴氏杆菌检出率显著高于巴音布鲁克羊、刀郎羊的检出率。详细结果见表1。
表1 细菌检测结果
呼吸道合胞体检出率40.0%,副流感病毒抗体检出率18.8%,小反当兽疫病毒检出率0%。呼吸道胞合体检出率均显著高于副流感抗体。湖羊、小尾寒羊、杜泊羊和萨福克羊副流感病毒抗体检出率显著高于巴音布鲁克羊、刀郎羊。详细结果见表2。
表2 病毒检测结果
肺炎病因复杂,但主要有两个方面:①病原性肺炎由病毒、细菌或寄生虫引起;②非病原性肺炎由营养因素及饲养管理引起。本实验中有20 份样品未检测到任何病原,可能为非病原性肺炎。溶血性曼氏杆菌检出率与冯旭飞等的检出率基本相同,链球菌的检出率与张丹的检出率基本相同。支原体抗体检出率低于剡文亮等的检出率,可能与地域差异有关。
小尾寒羊多杀性巴氏杆菌检出率显著高于巴音布鲁克羊和刀郎羊,巴音布鲁克羊和刀郎羊副流感抗体显著低于其他羊,可能与新疆当地昼夜温差大,本地羊适应当地气候环境有关。
副流感病毒、呼吸道合胞体病毒均属于副粘病毒科,牛、绵羊易感,发病率高,病死率低,如继发细菌或支原体感染可引起病情加重,导致呼吸道疾病综合症,造成宿主的死亡。副流感病毒检出率与朱远茂等检出率基本相同。在加拿大、美国、北爱尔兰和新西兰已在绵羊体内检测到牛呼吸道合胞体病毒抗体,本实验中检测到牛呼吸道合胞体病毒抗体达到40%,说明巴州地区存在比较严重的感染。