不同产地乌梅理化指标和枸橼酸含量的分析和比较*

陈 蕾，张 倩，朱育凤，邱明鸣，赵林钢，2**

1 南京中医药大学附属医院/江苏省中医院 药学部，南京 210029；2 南京市六合区中医院/江苏省中医院江北院区，南京 211599

乌梅为蔷薇科植物梅Prunus mume（Sieb.）Sieb.et Zucc.的干燥近成熟果实经加工制成，具有敛肺、涩肠、生津驱虫的功效[1]。乌梅是重要的药食两用品，应用广泛[2]。近年来本院门诊乌梅年均用量已达9 吨，且随着中药制剂蓬勃发展，投料的乌梅饮片用量也日益增长[3]。为保障其优质稳定的质量，建设乌梅种植基地、从源头把控是最有效的措施[4]。

《中国药材学》记载，“乌梅主产于福建、四川、浙江、湖南、广东等地。以浙江产品质佳，四川产量最大”[5]。

药材和饮片的质量，理化指标、特别是有效成分含量是其重要内容。本研究收集了来自四川、浙江、福建、云南的乌梅样品，检测其主要理化指标和有效成分含量，并进行统计和分析，以评价不同产地的样品质量优劣，旨在为本院乌梅道地药材种植基地的合理布局以及内控标准的制定提供依据[6]。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 乌梅样品 于2019 年6～12 月收集乌梅样品共36 批次，样品来自于药材的主要产地（四川、浙江、福建、云南）和主要流通市场，经鉴定（江苏省中医院）均为蔷薇科植物梅Prunus mume（Sieb.）Sieb.et Zucc.的干燥近成熟果实经过加工而成。样品信息见表1。

表1 乌梅样品信息

1.1.2 仪器和药品、试剂 Agilent 1260 型高效液相色谱仪（含G1312B 型二元泵，G1367E 型高性能自动进样器，G1316A 型柱温箱，G4212B 型DAD 检测器，G1322A 型脱气机）；X224ZH/E 型十万分之一电子天平（常州奥豪斯仪器有限公司）；DHG-910A电热鼓风干燥箱（常州超群干燥设备有限公司）；BWS-5 电热恒温水浴锅（上海捷呈实验仪器有限公司）；H5201 热风循环式马弗炉（苏州贯旭仪器有限公司）。

枸橼酸对照品（上海源叶生物科技有限公司，批号：B20035-20 mg，纯度≥98%）；乙腈、磷酸二氢铵为色谱纯；水为纯化水。

1.2 理化指标测定

1.2.1 水分 按照《中国药典》2015 版（四部）通则0832 第二法（烘干法）[7]，对乌梅36 个批次样品进行水分含量的测定。

取乌梅样品粉末4 g，精密称定，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定，打开瓶盖在105 ℃干燥5 h，将瓶盖盖好，移置干燥器中，冷却30 min，精密称定，再以上述温度干燥1 h，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5 mg 为止。根据减失的重量，计算乌梅样品中的含水量（%）。

1.2.2 总灰分 按照《中国药典》2015 版（四部）通则2302[7]法，对乌梅36 个批次样品进行总灰分的测定。

取乌梅样品粉末3 g（过2 号筛），精密称定，置经炽灼恒重的坩埚中，称定重量（准确至0.01 g），缓慢炽热（注意避免燃烧），至样品完全炭化，逐渐升高温度至550 ℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算乌梅样品中总灰分的含量（%）。

1.2.3 浸出物 按照《中国药典》2015 版四部通则2201 法项下“水溶性浸出物测定法”[7]，对乌梅36个批次样品进行浸出物测定。

取乌梅样品粉末约4 g（过3 号筛），精密称定，置于100 mL 锥形瓶中，加水50 mL，密塞，称定重量，静置1 h，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取滤液25 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，精密称定重量，计算乌梅样品中水溶性浸出物的含量（%）。

1.3 枸橼酸含量测定

1.3.1 色谱条件 色谱柱：Agilent ZORBAX SBAq（4.6 mm × 250 mm，5 μm）；流 动相：乙腈（A）-0.5%磷酸二氢铵溶液（B）3∶97（用磷酸调节pH 值至3.0），等度洗脱；柱温：35 ℃；检测波长：210 nm；流速：1 mL·min-1；进样量：10 μL。

枸橼酸对照品与乌梅样品色谱图见图1。

图1 枸橼酸对照品（A）与乌梅样品（B）的HPLC 图

1.3.2 对照品溶液的制备 精密称取枸橼酸对照品适量，以1 mL 纯水溶解，倍比稀释为系列浓度标准品溶液，离心5 min（8000 r·min-1），取上清液，过0.20 μm 微孔滤膜，作为对照品溶液。

1.3.3 供试品溶液的制备 取乌梅细粉0.4 g，精密称定，置于100 mL 锥形瓶中，量取100 mL 水，超声提取1 h，放冷，离心5 min（8000 r·min-1），取上清液，过0.20 μm 微孔滤膜，作为供试品溶液。

1.3.4 含量测定 按照高效液相色谱法（《中国药典》2015 版通则0512 法）[7]测定36 个批次样品中枸橼酸的含量。

1.4 数据处理

采用Excel2015 软件进行数据统计分析。

2 结果

由表2 可见，36 个批次的样品中的8 号（产地浙江）、22 号（产地四川）、26 号（产地四川）、34 号（产地四川）和35 号（产地四川）样品，枸橼酸含量低于《中国药典》限定值（不得少于12.0%）为不合格品，共5 个批次，故不再纳入后续的统计分析。

表2 不同产地乌梅的理化指标含量/%

由表3 可见，乌梅的枸橼酸、浸出物、水分和总灰分含量随产地、批次不同均存在一定差异，首先枸橼酸和总灰分变异较大，其次为浸出物、水分。

表3 含量和各乌梅样本理化指标的分类统计

2.1 枸橼酸

在31 个批次乌梅样品中，枸橼酸的含量为12.2%～24.0%，平均值16.1%，变异系数为0.20。其中，8 个浙江样品中枸橼酸含量平均值最高，为17.5%，变异系数为0.22；5 个云南样品中枸橼酸含量平均值为15.9%，变异系数为0.30；14 个四川样品枸橼酸含量平均值为15.7%，变异系数为0.17；4个福建样品枸橼酸含量平均值为15.4%，变异系数为0.11。

2.2 总灰分

在31 个批次乌梅样品中，总灰分的含量为2.6%～5.2%，平均值3.9%，变异系数为0.20。其中，5 个批次云南样品中总灰分含量平均值最低，为3.6%，变异系数为0.25，但其中有一样品（批号20180515）总灰分含量为5.0%，临界《中国药典》 限定值（不得过5.0%）；次低的是4 个批次福建样品中总灰分含量，平均值为3.7%，变异系数为0.33，其中有一样品（批号20180609）总灰分含量为5.0%，临界《中国药典》限定值（不得过5.0%）；8 个批次浙江样品中总灰分含量平均值是3.9%，变异系数是0.19；14 个批次四川样本中总灰分含量平均值是4.0%，变异系数是0.16，但其中有2 个样品（批号1804123、1806123）总灰分含量分别为5.2%、5.1%，超过《中国药典》限定值（不得过5.0%）。

2.3 浸出物

在31 个批次乌梅样品中，浸出物的含量为21.4%～42.4%，平均值33.5%，变异系数为0.13。其中在8 个批次浙江样品中，浸出物含量平均值最高，为35.3%，变异系数为0.11；在5 个批次云南样品中，浸出物含量平均值为33.7%，变异系数为0.09；在4 个批次福建样品中浸出物含量平均值为33.1%，变异系数为0.09；在14 个批次四川样品中浸出物含量平均值为32.6%，变异系数为0.16，但其中有一样品（批号180302）浸出物含量为21.4%，未达到《中国药典》限定值（不得少于24.0%）。

2.4 水分

在31 个批次乌梅样品中，水分的含量为9.1%～12.4%，平均值为10.4%，变异系数为0.08。其中，在8 个批次浙江样品中，水分含量平均值最低，为10.1%，变异系数为0.09；在14 个批次四川样品中，水分含量平均值为10.4%，变异系数0.09；在4 个批次福建样品中，水分含量平均值为10.7%，变异系数为0.03；在5 个批次云南样品中，水分含量平均值为11.0%，变异系数为0.06。

3 小 结

本试验表明，在不同产地、不同批次的乌梅中，枸橼酸、浸出物、水分、总灰分的含量均有差异。枸橼酸作为有效成分是评价乌梅药材质量优劣的主要指标，根据本试验测定结果看出，浙江产乌梅样品枸橼酸平均含量较四川高，但含量均一性并没有四川样品好，这与《乌梅本草考证》所述乌梅产地一致[5]。综合各项测定结果，建议本院发展乌梅药材以枸橼酸及浸出物含量相对较高的浙江地区优先建立基地，同时将四川乌梅优质产区作为候补基地，以满足日益增长的临床需求。

根据本院中药材应用发展战略要求，结合浙江、四川产地乌梅样本的枸橼酸含量测定结果，在本院建立乌梅种植基地后，建议将理化指标的内控标准可稍高于《中国药典》要求，以符合建设高标准、高要求的道地药材基地的需求。

由于本次试验尚无法完全分析所有指标与生态环境、采收时间、炮制程度的相关性，故其试验结果可能与生产实际有所差异，相关成分含量的限定区间还需开展进一步的研究。