血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF对早发型重度子痫前期的预测价值*

罗 敏，徐晓都，王 维，周 隽

1.成都市龙泉驿区第一人民医院/四川大学华西医院龙泉医院检验科，四川成都 610100；2.成都市龙泉驿区妇幼保健院检验科，四川成都 610100；3.成都市龙泉驿区第一人民医院/四川大学华西医院龙泉医院产科，四川成都 610100

早发型重度子痫前期(EOSP)可反映孕周与妊娠结局的关系，以及胎盘存在的分子水平的差异，EOSP发病越早，病情越严重，母婴并发症越多，预后越差[1]。既往研究显示，孕早期胎盘功能受损会引起子痫前期，而EOSP作为严重的表型之一，多因胎盘源性的大量损伤因子进入血液而导致[2]。血管内皮生长因子(VEGF)是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子，可诱导新生血管的生成，在胎盘血管生成、分化等方面起着重要作用。血小板反应蛋白(TSP-1)可作用于胚胎发育及血管形成。目前研究表明，子痫前期孕妇的TSP-1及VEGF水平均存在异常变化，即TSP-1水平升高[3-4]，VEGF水平降低[5-6]；但也有部分研究显示，TSP-1水平降低，VEGF水平升高，且与缺氧刺激有关[7-8]。本研究通过分析TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF对EOSP的预测价值，以期为EOSP的临床诊断提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年8月至2020年8月成都市龙泉驿区第一人民医院/四川大学华西医院龙泉医院(下称本院)收治的38例EOSP孕妇作为病例组，同期门诊产检的40例孕28～33+6周健康孕妇为对照组，收集病例组不良妊娠结局相关指标(新生儿出生体重、Apgar 1 min评分等)。另选取同期在本院行孕中期唐氏筛查并最终在本院分娩的90例孕妇为验证组，其中妊娠结局为EOSP的30例孕妇为EOSP组，正常分娩的60例孕妇为非EOSP组。纳入标准：(1)年龄20～45岁；(2)孕28～33+6周；(3)单活胎妊娠；(3)病例组符合谢幸等主编的《妇产科学》第9版EOSP的诊断标准。排除标准：(1)双胎或多胎妊娠；(2)有糖尿病、高血压、肾病、冠心病等并发症，以及研究外其他产科并发症；(3)孕期曾服用阿司匹林、钙离子拮抗剂、抗菌药物。病例组与对照组年龄、孕周、孕次等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)；病例组体质量指数(BMI)高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 病例组和对照组一般资料比较

1.2方法 病例组在入院当天抽取空腹肘静脉血5 mL，室温静置1 h后3 000 r/min离心10 min，分离血清，标记后放入-80 ℃冰箱保存。对照组在门诊采血中心收集当天离心后的空腹静脉血血清500 μL放入-80 ℃冰箱低温保存。验证组为本院产前诊断中心实验室保存的行孕中期唐氏筛查孕妇的血清。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组VEGF及TSP-1水平。试剂盒购自Bio-Swamp公司(货号：HM10057、HM100868)。

2 结 果

2.1两组血清TSP-1、VEGF水平及TSP-1/VEGF比较 病例组血清TSP-1水平、TSP-1/VEGF高于对照组，病例组血清VEGF水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.001)。见表2。

表2 病例组和对照组血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比较

2.2血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF对EOSP的预测价值 ROC曲线分析结果显示，血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF均对ESOP有一定预测价值，对应截断值分别为2.44 ng/mL、319.21 pg/mL、9.13，且TSP-1/VEGF比VEGF、TSP-1单独检测预测价值稍高。见表3和图1。

表3 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF对EOSP的诊断价值

图1 血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF诊断EOSP的ROC曲线

2.3血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF与不良妊娠结局的相关性分析 相关性分析显示，血清TSP-1与VEGF呈负相关(r=-0.265，P<0.001)，与新生儿出生体重、Apgar 1 min评分、Apgar 5 min评分呈负相关(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，血清VEGF与新生儿出生体重、Apgar 1 min评分、Apgar 5 min评分呈正相关(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF与新生儿出生体重、Apgar 1 min评分、Apgar 5 min评分呈负相关(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)。

2.4EOSP组与非EOSP组血清TSP-1、VEGF、TSP-1/VEGF比较 验证组中，EOSP组TSP-1水平高于非EOSP组，VEGF水平低于非EOSP组，TSP-1/VEGF高于非EOSP组，差异均有统计学意义(P<0.001)。见表4。

表4 EOSP组与非EOSP组血清TSP-1、VEGF及TSP-1/VEGF水平比较

3 讨 论

EOSP通常在孕34周前发病，易引起严重的并发症，如胎盘早剥、肺水肿及心力衰竭等，从而造成胎儿宫内窘迫、死亡和低出生体重儿等情况，严重威胁母婴生命安全。为了改善母婴结局，在整个妊娠期对患者进行有效识别、管理及干预等尤为重要[9-10]。因抗血管生成因子与促血管生成因子比值失衡会导致子痫前期的发生，其中TSP-1可发挥抗血管新生、调节内皮细胞功能的作用[11]，VEGF可参与血管重构、滋养细胞浸润等过程，有助于刺激内皮细胞的增殖、迁移[12]。本研究中，孕妇血清TSP-1水平与VEGF水平呈负相关(r=-0.265,P<0.001)。REDMAN[13]研究提出，孕8～18周是胎盘形成的关键时期，HOFFMAN等[14]研究表明，在孕早中期给予小剂量阿司匹林，可有效改善孕妇胎盘病理、生理情况，预防EOSP的发生。

TSP-1是TSPs家族的5个成员之一，可调节VEGF生物活性，通过CD36和Fyn诱导细胞凋亡，抑制血管内皮细胞迁移和增殖，通过CD36和CD47抑制一氧化氮(NO)通路[15]，起到抗血管新生作用。本研究结果显示，病例组血清TSP-1水平高于对照组，提示EOSP患者血清TSP-1升高可加重EOSP的发生和发展，与范徐妃等[4]研究中早发型子痫前期(EOPE)患者血清及胎盘组织TSP-1水平升高一致。而ULU等[7]研究显示，PE患者血清TSP-1水平明显降低。本研究认为，EOSP组和非EOSP组血清TSP-1水平存在差异的可能原因有：(1)TSP-1的相对分子质量较大，结构功能复杂，其受体多样化，使之在不同状态及结构下与不同受体结合，发挥不同的作用；(2)妊娠发病机制的内在差异较大。VEGF有助于发挥诱导抗凋亡蛋白Bcl-2表达、抑制血管内皮细胞凋亡、上调促衰变因子表达及保护血管内皮细胞的作用[16]。本研究中，EOSP组患者血清VEGF水平明显低于非EOSP组(P<0.001)，这与ADU-BONSAFFOH等[5]研究结果类似，提示血清VEGF水平的降低可能会促进EOSP的发生、发展。但刘晓丹[17]的研究结果显示，在缺氧的情况下VEGF水平也会升高。此种差异的原因可能在于：(1)游离VEGF能更准确地反映有效循环VEGF，因检测方法的差异导致了结果的不同；(2)不同研究中妊娠病理发生机制的差异性导致了研究结果的差异；(3)机体在缺氧状态下会引起代偿性VEGF水平的升高。

本研究结果显示，TSP-1/VEGF对EOSP的预测价值比VEGF或TSP-1单独检测稍高，分析作用机制可能是：TSP-1-CD47信号轴抑制VEGF和VEGF受体2(VEGFR2)的活化，抑制VEGF介导的血管内皮细胞的增殖，以及VEGFR2下游的AKT或Src蛋白激酶，从而抑制了新生血管的形成。

目前关于TSP-1水平与妊娠不良结局的相关性的研究较少。SOUZA等[18]研究表明，通过改善循环中NO和VEGF水平可减轻对低出生体重新生儿内皮祖细胞数量和功能的不利影响。本研究结果显示，TSP-1与新生儿出生体重、Apgar 1 min和Apgar 5 min评分呈负相关(r=-0.588、-0.621、-0.593，均P<0.001)，而血清VEGF与新生儿出生体重、Apgar 1 min和Apgar 5 min评分则呈正相关(r=0.728、0.700、0.712，均P<0.001)，血清TSP-1/VEGF与新生儿出生体重、Apgar 1 min评分、Apgar 5 min评分呈负相关(r=-0.817、-0.834、-0.823，均P<0.001)，提示血管生成因子与抗血管生成因子的失衡可造成严重的围生结局，TSP-1水平升高可能是胎儿生长发育的危险因子，VEGF水平升高可能是胎儿生长发育的促进因子。同时，本研究还发现，随着BMI增加，孕妇患EOSP的风险可能升高。

有研究显示，妊娠期高血压孕妇的血清TSP-1水平高于健康孕妇，且TSP-1水平越高，不良妊娠结局风险越大[19]。胡建文等[20]结果发现，子痫前期与健康产妇孕早期、孕中期的血清TSP-1水平差异无统计学意义(P>0.05)。本研究结果发现，在验证组中，EOSP组血清TSP-1水平高于非EOSP组(P<0.05)，提示血清TSP-1水平在孕中期可用于预测EOSP的发生。本研究结论与胡建文等[20]研究的结论存在差异，因此，TSP-1在EOSP孕妇与同孕周健康孕妇的表达情况是否存在差异仍需进行大样本、前瞻性研究证实。

综上所述，TSP-1/VEGF对预测EOSP具有较高的诊断价值，在孕中期可能对预测EOSP有一定的意义，但此结论仍需大数据、多中心、前瞻性研究进一步验证。