CYFRA21-1、OPN与子宫颈癌患者放疗敏感性、肿瘤分期的关系

曾峰华

子宫颈癌是女性各种恶性肿瘤中最多见的癌瘤，在女性生殖器官癌瘤中占据首位，近年来发生率逐渐提高，仅次于乳腺癌成为妇科肿瘤第2位[1]。按照病理类型可以分为不典型增生、早期浸润癌、原位癌、腺鳞癌、腺癌等。典型症状是引道接触性出血、出现异常排液，子宫颈癌早期没有明显症状，随着疾病发展，晚期时还会导致其他脏器组织出现浸润转移，伴有消瘦、乏力、贫血等症状。子宫颈癌的发生因素有很多，包括人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染、吸烟、妊娠、性生活等，治疗方法包括手术治疗、放疗、化疗、靶向治疗等，抑制癌细胞的生长，临床治疗失败的原因主要包括患者病灶部位癌细胞发生转移或者局部症状加重[2]。研究表明血清肿瘤标志物的检测对于肿瘤的诊断和治疗都有着重要的参考意义，临床缺乏能够特异性检测子宫颈癌的血清学指标，细胞角蛋白19片段抗原（serum cytokeratin 19 fragment antigen，CYFRA21-1）是细胞中角蛋白的成分，主要存在于正常上皮细胞和上皮癌细胞中，当正常上皮细胞处于凋亡状态时，角蛋白碎片就会出现降解，逐渐溶于血液中，使得血液中角蛋白含量升高，在多种肿瘤中表达量较高，CYFRA21-1显著升高时提示肿瘤的晚期或者预后较差。骨桥蛋白（osteopontin，OPN）是一种糖基化蛋白，广泛存在于细胞外基质中，是一种重要的骨基质蛋白，与骨的形成和发展密切相关，在肿瘤的发生和发展中有着重要作用[3-4]。本研究通过检测血清CYFRA21-1和 OPN的表达情况，探讨两者与化疗敏感性、肿瘤分期及预后的相关性，现将相关情况报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取我院自2018年2月—2021年2月收治的70例子宫颈癌患者，年龄34～67岁，平均年龄（51.4±3.8）岁；选择同时期内接受乳腺癌的70例患者作为对照组，年龄35～68岁，平均年龄（52.3±3.7）岁，两组患者基本资料差异无统计学意义（P＞0.05），医院伦理委员会审核通过。纳入标准：（1）研究组患者术前未经过化疗，术后病理组织检查后确诊为子宫颈癌，符合临床诊断标准[5]。（2）对照组患者符合乳腺癌诊断标准；（3）检查发现两组患者没有远处脏器转移和组织病灶转移。（4）认知功能正常，患者及家属对本研究知情同意。排除标准：（1）对于治疗过程中使用的药物存在过敏史。（2）处于妊娠期或者哺乳期。（3）肝、肾、心功能不全等[6]。

1.2 治疗方法

所有患者在入组24 h后清晨空腹采集新鲜静脉血液5 mL，将其放置于离心管中，使用EDTA抗凝后在高速离心机中离心15 min，速度为2 500 r/min，取上清液储存于-80℃冰箱内备用检查，采用酶联免疫吸附实验法测定血清CYFRA21-1和OPN表达水平，试剂盒采用北京博奥派克生物科技有限公司生产的配套试剂盒。

采用定期门诊检查、电话或者微信的方式对患者进行随访，了解患者的恢复情况，告知患者治疗结束后每隔2个月至少到医院复查1次，随访时间大约为8～26个月，及时对患者出现的各种问题进行健康指导，改善预后[7]。

1.3 观察指标

（1）采用酶联免疫吸附实验法测定两组患者血清CYFRA21-1、OPN表达水平。

（2）分析患者血清CYFRA21-1、OPN水平与分化程度、临床分期以及淋巴结转移的关系。

（3）使用Spearman软件分析血清CYFRA21-1、OPN水平与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移等临床病理因素的相关性[8]。

1.4 统计学分析

所有数据均采用SPSS 20.0软件分析。计数资料以例（%）表示，行χ2检验，计量资料以（±s）表示，行t检验，P＜0.05则差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血清CYFRA21-1、OPN水平对比

研究组患者血清CYFRA21-1、OPN水平均显著高于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者血清CYFRA21-1、OPN水平对比（±s）

表1 两组患者血清CYFRA21-1、OPN水平对比（±s）

2.2 血清CYFRA21-1、OPN水平与子宫颈癌临床病理的关系

在子宫颈癌组织中，血清CYFRA21-1、OPN水平与临床分期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有密切关系（P＜0.05），见表2。

表2 血清CYFRA21-1、OPN水平与宫颈癌临床病理的关系（±s）

表2 血清CYFRA21-1、OPN水平与宫颈癌临床病理的关系（±s）

2.3 血清CYFRA21-1、OPN水平与临床病理因素的相关性分析

血清CYFRA21-1、OPN水平与临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移等均呈正相关（P＜0.05），见表3。

表3 血清CYFRA21-1、OPN水平与临床病理因素的相关性分析

3 讨论

近年来随着人类乳头瘤状病毒（HPV）的传播，吸烟、多孕多产以及其他不良生活习惯等因素导致机体抵抗HPV感染的能力下降，子宫颈癌的发生率越来越高，而且呈现逐渐年轻化的趋势，在女性生殖系统恶性肿瘤中居首位，因此早期发现子宫颈癌对于预后有着重要的诊断意义[9]。子宫颈癌的诊断措施包括宫颈活检、细胞学诊断、三合诊、影像学检查、阴道镜检查、碘实验、氮激光肿瘤固有荧光诊断法等，而子宫颈癌确诊的“金标准”为镜下子宫颈癌组织学诊断。血清肿瘤标记物检查也成为早期诊断和预测肿瘤的重要参考指标。子宫颈癌肿瘤常见的标志物为细胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）、甲胎蛋白（AFP）、血清鳞癌抗原（SCC）、骨桥蛋白（OPN）等[10]。

CYFRA21-1是细胞角蛋白CK19的一种可溶性片段，也是一种上皮细胞中的肿瘤标志物，广泛分布于子宫内膜，细胞角蛋白是形成中间丝的亚单位，也是构建细胞骨架的重要蛋白质。根据这种物质分子量大小以及在电泳过程中不同等电点，可以将其分为20种类型，一般被分为两个亚群，Ⅰ类(酸性蛋白)，Ⅱ类(碱性蛋白)，细胞角蛋白是由酸性蛋白和碱性蛋白结合而成，属于异聚合体，而CYFRA21-1分子量大小约为40 000 Da，属于Ⅰ类蛋白，并且在角蛋白家族中也是分子量最小的蛋白[11]。细胞角蛋白19广泛分布在很多正常组织表面，例如鳞状上皮、层状上皮，在肿瘤恶性上皮细胞中，蛋白酶被激活后就会使得细胞降解速度大幅度增加，大量角蛋白碎片破裂之后就会释放进入血液，可溶性片段之间相互结合后就形成了CYFRA21-1，该物质在在多种肿瘤细胞中都有表达，尤其在肺鳞癌中呈高表达状态，肿瘤细胞转移或者裂解后它的酸性亚单位就可以释放到血清中，血清中CYFRA21-1的表达可以作为肿瘤标志物，浓度的高低也可以反映病情的严重情况[12]。研究结果显示子宫颈癌患者血清CYFRA21-1表达水平明显高于对照组，与分化程度、淋巴结转移、临床分期等有着密切的关系，而且与分化程度、淋巴结转移、临床分期等呈正相关关系（P＜0.05），子宫颈癌是以鳞状细胞癌为主，蛋白酶可以加速CYFRA21-1的释放，血清中含量明显升高，检测该指标可以作为子宫颈癌诊断及治疗的标志物[13]。CYFRA21-1的血清浓度水平也可以作为患者手术和放化疗后跟踪是否出现早期复发的有效指标。

OPN是一种糖基化蛋白，主要是在机体发育过程中由由间叶组织细胞分泌产生，这种物质广泛存在于细胞外基质中，糖基化修饰以O-聚糖为主，在机体内具有很多生物学调节作用，能够参与组织修复、自身代谢等功能。这种糖基化蛋白在癌细胞的生长、增殖、浸润等发展过程中也发挥着十分重要的作用。该物质相对分子质量约为44 kDa，约含有300个氨基酸残基，其中占据较高比例的氨基酸为丝氨酸、谷氨酸和天冬氨酸，正常情况下表达较低的细胞，例如T淋巴细胞、成纤维细胞、巨噬细胞等在经过一些诱导因素的刺激时就能够大量表达OPN。OPN表达于不同的组织和细胞类型中，由于激素生长因子的产生以及癌基因各种产物的调控使得OPN的表达量存在差异[14]。OPN一般包括两种形式，磷酸化和去磷酸化，其中对于OPN活性能够产生较大影响的主要为磷酸化修饰，蛋白磷酸化之后就能够特异性结合整合素表面受体，而去磷酸化蛋白主要结合CD44受体，从而发挥不同的作用。OPN经过凝血酶剪切之后，C-末端片段可与细胞表面整合素受体结合，N-末端片段与巨噬细胞表面受体结合，在免疫调控过程中，OPN还能够结合T淋巴细胞表面整合素受体，并且促进Th1分化为Th2分化，从而提高细胞免疫能力，对于外界炎症因子的侵袭加强防御，避免出现炎症。OPN具有多种生物学作用，包括细胞黏附、细胞募集、作为一种基质功能性非胶原蛋白，能够与其他物质结合后启动信号转导级联反应，促进基因表达的改变。此外在血管平滑肌由收缩转化为合成时，OPN还能够作为一种标志性因子，并且还是血管细胞中的重要黏附因子[15]。在淋巴细胞中，尤其是NK细胞和T细胞中，OPN被非特异性结合不久后开始表达，另外这种物质对于自身免疫以及抗感染的非特异性免疫也能发挥一定的作用。肿瘤发生和转移过程中将OPN看作血清标志，不同表达水平与机体炎症和创伤反应有密切关系，在肿瘤转移的过程中也能够发挥重要的作用。有研究表明OPN能够激活癌基因的表达，抑制细胞凋亡，促进癌细胞增殖，导致肿瘤发生。本研究通过检测患者血清中OPN的水平发现研究组OPN表达量显著高于对照组，且与临床分期、淋巴结转移、分化程度也呈正相关关系（P＜0.05），这说明OPN的表达与子宫颈癌的发生有着密不可分的关系，也可以作为子宫颈癌预测的重要指标[16]。分析原因是由于OPN作为一种非胶原性骨基质糖蛋白，带有负电荷，能够刺激细胞信号传导，在肿瘤发生过程中能够促进细胞增殖，加速肿瘤恶化，促进转移性肿瘤细胞的生存，但是本研究样本量不足，针对这两个指标在子宫颈癌中的具体作用机制仍需要进一步深入探究[17]。

综上所述，CYFRA21-1和OPN在子宫颈癌组织中表达水平都较高，而且和临床病理因素之间存在着密切关系，能够促进肿瘤发展，本次研究也为子宫颈癌早期诊断以及靶向药物治疗提供了参考依据和新的思路。