柳州地区5个民族人群ABO及Rh(D)血型基因频率调查

陆奉科，韦海春

柳州市妇幼保健院(广西科技大学附属妇产医院、儿童医院)输血科，广西 柳州 545001

血型系统由人类遗传因素决定[1]，截止到2021 年2 月，国际输血协会(ISBT)已经确认了43 个红细胞血型系统。而临床工作中，ABO血型系统和Rh(D)血型系统最为重要，与输血诊疗工作密切相关，所以研究ABO 和Rh(D)血型具有极其重要的临床意义。现有的研究表明，ABO血型和Rh(D)血型分布可受种族和地域分布差异的影响[2-3]，因此，有必要对不同区域的血型分布规律特征进行调查研究，以便更好地开展备血工作。然而，目前尚未有针对柳州地区的ABO 及Rh(D)血型分布规律的相关报道。本研究回顾分析在本院2019—2021 年就诊的64 323 例患者的临床资料及其ABO及Rh(D)血型结果，旨在初步调查和掌握本地区不同民族人群ABO血型的分布规律。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年7月1日至2021年7月1日在柳州市妇幼保健院就诊且符合以下纳入和排除标准的64 323例具有ABO血型信息的患者，收集其ABO血型定型结果及临床资料。其中，侗族1 607 例，苗族1 824例，瑶族1 422例，壮族23 123例，汉族36 347例。纳入标准：具有ABO 及Rh (D)血型信息者；年龄不限。排除标准：①血型结果正反不符的患者；②只有ABO 血型结果而没有Rh(D)结果的体检患者。本研究经柳州市妇幼保健院医学伦理委员会批准。

1.2 试剂与仪器 微柱凝胶检测卡(长春博德血液生物医药有限责任公司)；抗D 血型定型试剂、ABO反定型标准红细胞(上海血液生物医药有限责任公司)；KA-2200 免疫血液学专用离心机(日本久保田)；长春博研TD-3A离心机；贝索医用离心机；瑞士Hamilton Bonaduz AG全自动血型仪(瑞士曼哈顿)，所有试剂均在有效期内使用。

1.3 检测方法与质量控制 所有患者分别抽取2 mL静脉血并用EDTA-K2抗凝。血型检测均采用瑞士Hamilton Bonaduz AG全自动血型仪进行ABO血型正反型鉴定和Rh(D)血型鉴定。质控品与受血者标本同时检测，质控品检测结果在控后方可发出受血者检测报告。D 抗原阴性者采用上海血液生物医药有限责任公司的Rh(D)(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体)试剂进行复查确认[4]。所有操作均严格参照相关SOP进行。

1.4 统计学方法 ABO、Rh(D)血型基因频率及Hardy-Weinberg 吻合度检验均采用直接计算法，表型分布的预期值与观察值以及Hardy-Weinberg 吻合度检测均参照文献[5-7]的计算方法进行。所得资料按Bernstein 校正公式计算基因频率，设 A、B、O 基因频率分别为 p、q、r，A、B、O为表现型频率，即：

O、A、B、AB血型的期望值频率分别依照O=r2、A=p2+2pr、B=q2+2qr、AB=2pq公式求得。Hardy-Weinberg吻合度测验：χ2=Σ(期望值－观察值)2/期望值，得到的χ2值查找相对应P值。Rh(D)(阴性)抗原基因频率分布情况用直接计算法；Rh 血型D 基因频率：。各民族间ABO 血型分布差异比较使用SPSS25.0 软件进行行×列表资料的χ2检验，以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同民族人群中ABO 血型的分布及基因频率比较 经Hardy-Weinberg 吻合度检验结果显示，5 个民族的ABO 血型分布规律为O>B>A>AB，基因频率r>q>p，其中r的基因频率较高；对5个民族的ABO 血型观察值和期望值经吻合度检验，差异无统计学意义(P>0.05)，符合Hardy-Weinberg 平衡定律，见表1。

表1 不同民族人群中ABO血型的分布及基因频率

2.2 各民族ABO 血型分布频率比较 对5 个民族ABO血型分布频率之间行χ2检验两两比较，结果显示，汉族与其他4 个民族分别比较差异均有统计学意义(P<0.05)；而其他民族间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 汉族与其他4个民族ABO血型分布频率间比较(例)

2.3 5 个民族Rh (D)阴性抗原基因频率分布比较 侗族Rh (D)阴性抗原基因频率为0.06%，D 基因频率为0.024 9；汉族Rh (D)阴性抗原基因频率为0.22%，D基因频率为0.046 9；苗族Rh(D)阴性抗原基因频率为0.49%，D基因频率为0.070 2；瑶族Rh(D)阴性抗原基因频率为0.14%，D基因频率为0.037 5；壮族Rh (D)阴性抗原基因频率为0.16%，D 基因频率为0.040 4，见表3。

表3 Rh血型在不同民族中的分布及基因频率

3 讨论

据研究表明，我国的ABO血型分布可以粗略划分为南北两大类，分别以B基因频率较高和O 基因频率较高为特征[8]。本次调查结果显示柳州地区人群侗、汉、苗、瑶、壮族ABO 血型基因频率特征为O>B>A>AB，基因频率r>q>p，且r 均大于0.6，符合南方人群有较高的O基因频率的特点[5]。而柳州地区少数民族的ABO 血型基因频率分布特点也与国内其他学者对这些少数民族的研究结果相一致[3，9]。比如，侗族的血型基因分布频率与钟江[10]对贵州省侗族的调查研究结果相符；苗族的血型基因分布频率与姚玉仙等[11]对贵州省苗族的研究结果相一致；壮族的血型基因分布频率也与莫秋红等[12]针对广西南宁地区壮族的研究结果相符。而在不同民族间ABO血型的分布频率中，汉族与侗、苗瑶、壮族比较差异具有统计学意义，与黎海澜等[3]的研究结果相一致。而侗族与苗族、瑶族、壮族差异无统计学意义；而苗族与瑶族、壮族差异无统计学意义；而瑶族与壮族差异也无统计学意义，显示出了汉族的血型分布与少数民族分布有可能存在一定差异。综上所述，研究结果初步显示了柳州地区ABO血型基因频率的分布规律。

而针对Rh(D)血型，现有的研究表明，白人的Rh(D)阴性率约占15%，黑人Rh(D)阴性率为4%，蒙古人种中 Rh(D)阴性率不到 1%[5，13]。而汉族 Rh 阴性约占0.2%~0.5%，南方少数民族的Rh阴性占的比例更低[5]。本研究结果显示，Rh (D)阴性的表现频率均小于0.5%，与我国其他地区学者针对少数民族Rh(D)阴性的研究结果相符。

本研究结果仅针对此次纳入的研究对象，未来有待多中心扩大样本量进一步深入研究及验证。尽管如此，本研究结果还是初步显示了本地区ABO 及Rh(D)血型的分布规律，O基因频率较高而A基因频率较低；汉族与少数民族之间ABO血型分布可能存在一定差异；本地区少数民族的Rh(D)阴性频率较低，符合南方地区少数民族血型分布特征。研究结果可以给本地区群体遗传学的大数据提供较有意义的信息，也为本地区血液中心和医疗机构合理的采供血和储血备血工作提供一定参考依据。