经右心导管检测大鼠肺动脉压实验的方法优化

闫海峰，王 琳，杨志华，王贤良，刘 宇，毛静远

经右心导管检测肺动脉压力是诊断肺动脉高压的金标准[1]。大鼠是常用于肺动脉高压造模的实验动物，在不明确大鼠解剖结构及定位的情况下，盲插导管很容易进入右心耳、下腔静脉，造成实验结果失真，甚至穿破心脏，导致实验失败。查阅国内外文献，少有详细介绍导管制作及具体插管手法的报道[2-3]，有关于导管检测方法、操作技巧的文献，多是通过标记导管刻度、不同位置旋转相应内外方向，难以准确领会根据大鼠个体差异做出调整[4-6]。本研究通过对聚乙烯导管制作及插管方法进行改良，并观察插管显示的波形变化判断导管所达位置，根据波形变化与导管所达位置的联系，从而提出改良大鼠右心导管插管方法。现报道如下。

1 实验材料

1.1 实验动物 健康清洁级SD雄性大鼠60只，体重230～250 g(由斯贝福生物技术有限公司提供)，动物许可证编号：SCXK(京)2019-0010，饲养于中国医学科学院放射医学研究所，正常饲养1周，实验前12 h禁食、不禁水。

1.2 实验试剂 叔戊醇(上海麦克林生化科技有限公司)，规格100 mL，批号C10187107；三溴乙醇(Sigma公司)，批号MKCM1060，肝素生理盐水(1∶500)。

1.3 实验器材 Power Lab 8/35及其配套压力换能器，PE50导管(外径0.9 mm，内径0.5 mm)，PE80导管(外径1.2 mm，内径0.8 mm)，9号平口针头(内径0.6 mm，外径0.9 mm)，细软直铁丝，三通管1个，5 mL注射器1个，1 mL注射器针头1个，直尺1把，橡皮筋5根，解剖用器械包括弯镊2把、止血钳1把、眼科剪1把，组织剪1把。

1.4 实验方法

1.4.1 制备右心导管 截取长12～15 cm的PE50导管，2～3 cm的细软直铁丝，将铁丝插入导管约1.5 cm，弯曲铁丝，使其弧度处于平行状态(见图1A)，将导管及铁丝一并浸入100 ℃水中1～2 min，随后拿出迅速置于冰水中3 min，将导管中铁丝取出，并修剪导管末端成弧形，弧度为120°～150°，并在距导管末端约4 cm处做标记(见图1B)。截取长1.5 cm的PE80导管，将修剪后的PE50导管直端插入PE80导管内，用9号平口针头与PE80导管另一端相接备用(见图1C)。

图1 导管制作过程示意图(A为插入铁丝的PE50导管；B为修剪标记后的PE50导管；C为制备好的右心导管)

1.4.2 连接仪器及导管 打开电脑、多导生理仪、压力换能器、Power Lab记录软件，将三通管与压力换能器、自制PE导管针栓端、充满肝素钠的5 mL注射器连接，旋转三通管使三向相通，推注肝素钠于压力换能器及导管中，排净气泡，随即将Power Lab记录软件调零，关闭三通管。

1.4.3 检测肺动脉压力 大鼠称重，用预先配制的1.5%三溴乙醇(1 mL/100 g)腹腔注射麻醉，大鼠取仰卧位，用橡皮筋将四肢及牙齿固定于鼠板上，剪去颈部右侧体毛，用75%乙醇消毒，眼科剪从外上至内下方剪开颈部右侧皮肤，并用弯镊剥离颈外静脉，游离约1 cm，远心端用细棉线结扎，并用止血钳固定细棉线，轻轻往后牵拉使颈外静脉适度绷紧，近心端打松结备用。随之用弯镊柄插入颈外静脉下方，朝心室方向用眼科剪剪出一个2～3 mm的V形开口，用预先自制呈90°弯曲的1 mL注射器针头轻轻插入V形开口内，并轻轻向上挑起，迅速将制备好的右心导管弯曲端插入导管，轻轻旋转导管，使导管头部朝向大鼠颈部内侧，同时用细棉线扎紧近心端，防止出血。打开电脑记录软件，轻轻推进导管，根据记录仪显示的波形，判断导管所达位置。逆时针旋转导管，使其穿过大鼠锁骨，继续逆时针旋转推进，可见静脉波(见图2A)，当导管推至约4 cm标识处，波形变化为心房波(见图2B)，此时缓慢逆时针推进过程中可见波形压力值突然增高，提示导管位于房室口处，随即轻推导管进入右心室，出现右心室压力波形(见图2C)。再次轻推0.5 cm左右，即可见到肺动脉压力波形(见图2D)。整个插管过程应注意鉴别右心导管经大鼠颈外静脉、上腔静脉，进入右心房、右心室到达肺动脉易出现的疑似波形。导管进入右心室后由于血流冲击或者导管头部可能贴壁、堵塞，会出现类似肺动脉压力波形(见图2E、图2F)，此时可推入肝素钠疏通导管或轻旋导管方向，即出现完整的右心室压力波形。随后继续向前推送导管0.5 cm左右，即可出现肺动脉波形。

导管刚进入肺动脉时受呼吸及压力影响，常出现的波形不稳定(见图2G)，所得肺动脉压力值不稳定，此时应继续推进导管，待阻力减小，波形稳定，且与心室压力波形区别明显时，则为所取肺动脉压力波形。

图2 导管进入右颈静脉直至肺动脉过程波形(A为静脉压力波形；B为心房压力波形；C为右心室压力波形；D为典型的肺动脉压力波形；E、F为导管可能贴壁或堵塞疑似肺动脉波形；G为不稳定的肺动脉波形。1 mmHg=0.133 kPa)

2 讨 论

本实验自制的PE导管检测肺动脉压波形与文献报道[7-8]类似，肺动脉插管技术需反复操作及熟悉导管所达大鼠解剖位置，方可顺利进入肺动脉。亦有多种改进插管方法，如X线下导丝引导导管[9]、改良导管弧度及标记不同刻度[6]，操作期间需时刻观察导管位置及刻度，但时间稍长、导管较硬、易插破血管，且初学者用容易混淆导管位置。作为学习操作该实验者，现将经验总结如下：①初学者的眼科剪易剪断右颈静脉，需反复操练，精准、稳定操作，操作时应用弯镊柄插入右颈静脉下方，则不易剪断大鼠右颈静脉；②导管刚进入右颈静脉时，若方向错误则不易通过颈内静脉锁骨段，此时谨记将导管头朝向大鼠颈部内侧逆时针旋转，并轻轻推送；③操作导管时，右心导管经大鼠右颈外静脉—上腔静脉—右心房—右心室—肺动脉过程中易进入腋静脉及上腔静脉分叉处，此时，切记勿强迫推进，以免刺穿血管，应轻轻回抽导管，再次缓缓逆时针旋转推送即可；④导管通过上腔静脉后略逆时针推送即可进入右心房，观察心房波形变化，如继续逆时针推进毫无阻力，有种落空感，且导管标记4 cm处越过大鼠锁骨位置，提示导管进入下腔静脉，此时逆时针缓慢回抽导管至出现典型的心房波(见图2B)，若推送导管无法前进，有阻力感，则导管处于心房之内，不断逆时针旋转导管，到达房室口位置时压力突然升高，即见到右心室压力波形，则为房室口位置，此时，应轻轻推送，即可进入右心室，为防止导管贴壁或堵塞，可缓慢推注肝素钠，并逆时针旋转导管，直至出现稳定的右心室压力波，随之导管继续推送约0.5 cm，可出现疑似肺动脉压力波形(见图2E、图2F)，此时应轻轻回撤导管，并逆时针旋转，即可出现稳定的肺动脉压力波形(见图2D)。

本实验肺动脉压力的检测主要与导管的弯曲度及硬度、操作手法有关，检测肺动脉压时不需时刻根据导管标记位置确定导管所达部位来调整旋转方向，操作过程中，应始终逆时针旋转并轻轻推送，根据波形变化，判断导管所处位置即可。实验过程中有3只大鼠因导管穿破心脏或麻醉不当导致死亡，未检测出肺动脉压力波形，检出率为95%。本研究详细说明了导管的制作及操作手法，对于初学者短期内易于掌握，为肺动脉压的实验检测提供了借鉴。