南昌地区无偿献血者梅毒抗体血清学检测结果及感染状况分析

樊璐，李玉，庄养林，王芳

（江西省血液中心，南昌 330052）

近年来我国梅毒感染呈现流行地区扩大和感染率上升的严峻形势。 据中国疾病预防控制中心报道[1]，梅毒是我国乙类传染病中报告发病数居第3 位的病种。梅毒螺旋体感染标志物—梅毒螺旋体特异性抗体(抗-TP) 是输血相关传染病标志物之一，《血站技术操作规程》[2]规定采供血机构采用2个不同生产厂家的血清学检测试剂进行血液标本抗-TP 检测。 酶联免疫吸附试验(Enzyme-labeled Immunosorbeng Assay，ELISA)血源筛查试剂灵敏度较高，被血液筛查实验室广泛采用。 本研究对献血者抗-TP ELISA 筛查阳性标本实施梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 (Treponema Pallidum Particle Agglutination，TPPA) 确证及 (Hepatitis B Surface Antigin，HBsAg/TP)抗体胶体金法联合检测，探究南昌地区献血人群梅毒筛查阳性符合率，评估ELISA试剂、 金标试剂性能， 调查梅毒感染献血人群特征，为降低抗-TP 不合格引起的血液报废，招募低危献血者，加强血液安全提供参考依据。 现报告如下。

1 对象与方法

1.1 检测对象 2020 年8 月12 日至2021 年9 月29 日南昌地区符合国家 《献血者健康检查要求》(GB 18467-2011)的无偿献血者血液标本97554 人份， 收集其中抗-TP ELISA 筛查阳性血浆标本184例。

1.2 方法

1.2.1 设备 STAR 全自动样本处理系统 (瑞士Hamilton)；XANTUS 全自动加样仪与血型分析仪(深圳爱康)；FAME 24/20 全自动酶免分析系统(瑞士Hamilton)。 仪器设备每年定期校验。

1.2.2 试剂 ELISA 试剂： 梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)(厦门英科新创，简称试剂A；北京万泰，简称试剂B)；TPPA 试剂：梅毒螺旋体抗体检测试剂盒(凝集法)(日本富士瑞必欧)；金标试剂：乙型肝炎病毒表面抗原/梅毒螺旋体抗体联合检测试剂(胶体金法)(厦门英科新创)。 试剂均在有效期内使用。ELISA 试剂取得国家药品监督管理局生物制品批签发证明。

1.2.3 检测方法 采用2 种不同厂家抗-TP ELISA试剂平行检测无偿献血者血液标本，以S/CO 值≥1.0 判为反应性，0.8≤S/CO＜1 为灰区，单种试剂或2 种试剂检测为反应性时，使用同种试剂或2 种试剂对原标本进行双孔复试， 若复试结果中任何1孔呈反应性，检测结论判定为抗-TP 阳性。选取抗-TP ELISA 筛查阳性标本开展TPPA 确证， 并进行HBsAg/抗-TP 金标联检。 严格按照试剂说明书进行检测操作、检验结果判定。

1.3 统计分析 从SHINOW 9.5 启奥血站管理信息系统调取献血者抗-TP ELISA 筛查数据和梅毒感染献血者特征资料。 应用SPSS 20.0 软件统计分析，计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 无偿献血者梅毒抗体检测结果 南昌地区无偿献血人群抗-TP ELISA 筛查阳性率0.19%(184/97554)；TPPA 确证阳性率0.13%(130/97554)；TPPA确证阳性符合率70.65%(130/184)； 金标阳性率0.13%(124/97554)；见表1。

表1 南昌地区无偿献血者梅毒螺旋体抗体检测结果[n（%）]

2.2 抗-TP ELISA 筛查阳性标本的TPPA 确证结果 抗-TP ELISA 筛查阳性标本中， 双试剂阳性72.83%(134/184)，试剂A 单阳9.24%(17/184)，试剂B 单阳17.93%(33/184)；ELISA 双阳标本中TPPA阳性93.28%(125/134)；ELISA 单阳标本中TPPA 阳性10%(5/50)、TPPA 阴性82%(41/50)；见表2。

表2 抗-TP ELISA 筛查阳性标本的TPPA 确证结果[n（%）]

2.3 抗-TP ELISA 筛查阳性标本的HBsAg/抗-TP金标联检结果 抗-TP ELISA 筛查阳性标本中检出1 例HBsAg 金标阳性0.54%(1/184)；ELISA 双阳标本中抗-TP 金标阳性90.30%(121/134)；ELISA 单阳标本中抗-TP 金标阳性6%(3/50)、抗-TP 金标阴性94%(47/50)；见表3。

表3 抗-TP ELISA 筛查阳性标本的HBsAg/抗-TP 金标联检结果[n（%）]

2.4 抗-TP 金标阳性标本的TPPA 确证结果抗-TP 金标阳性标本中TPPA 阳性97.58%(121/124)， 抗-TP 金标阴性标本中TPPA 阴性76.67%(46/60)；见表4。

表4 抗-TP 金标阳性标本的TPPA 确证结果[n（%）]

2.5 抗-TP ELISA 筛查阳性标本S/CO 值分布与TPPA 确证结果 试剂A、 试剂B 真阳性率分别为83.44% (126/151)、77.25% (129/167) (χ2=1.91，P ＞0.05)；将2 种ELISA 试剂筛查阳性标本按S/CO 值各分为5 组， 当S/CO 值处于0.8～0.99 灰区范围，TPPA 确证无阳性结果； 随着S/CO 值增大，与TPPA 确证阳性符合率升高；当S/CO 值≥15，阳性符合率100%；见表5。

表5 抗-TP ELISA 试剂筛查阳性标本S/CO 值分布与TPPA 确证结果[n（%）]

2.6 梅毒确证阳性献血者人口学特征及合并感染情况 130 例南昌地区梅毒确证阳性献血者中，女性阳性率高于男性；46～55 岁年龄段献血者阳性率最高，36～45 岁次之；低学历人群阳性率较高，文化程度与阳性率呈反比关系；农民、工人、自由职业阳性率较高；初次献血阳性率高于重复献血；自愿献血阳性率高于团体献血； 捐献全血与捐献单采血小板阳性率无明显差异； 存在TP 合并HBV/HCV/HIV 感染情况；见表6。

表6 南昌地区130 例梅毒确证阳性献血者特征

3 讨论

岳晓丽[3]等报道，2014 年至2019 年中国梅毒总报告发病率逐年增长， 高发地区为西北部分地区、东南沿海部分省份。卢飞豹等[4]报道，2008 年至2019 年江西省梅毒疫情呈增长趋势， 波及地区和人群广泛，萍乡市、赣州市、上饶市为重点地区。 本研究显示， 南昌地区无偿献血人群梅毒抗体筛查阳性率0.19%，低于广东深圳宝安区0.52%[5]、广东肇庆0.2636%[6]。 近年来本地区梅毒抗体筛查阳性率呈下降态势，与血站持续加强献血前宣教干预、招募低危献血者相关。 本地区献血人群梅毒抗体确证阳性率0.13%，低于广东深圳宝安区3.14‰[5]、湖北武汉0.27%[7]、 浙江湖州0.22%[8]、 河南南阳0.15%[9]。 南昌地区献血者梅毒感染率处于较低水平，不属于我国梅毒高发地区。

血清学检测是梅毒筛查、 诊断和预后的最常用检测方法[10]。 ELISA 检测敏感性较高，检验仪器自动化程度高，结果客观易判读，适合于人群、血液制品大规模梅毒筛查； 不足之处是ELISA 方法存在非特异性反应，可出现假阳性。 TPPA 对各期梅毒的敏感性、特异性较强，是目前广泛被认可和应用的确证试验方法。 本研究显示ELISA 双试剂阳性标本中TPPA 确证阳性符合率达93.28%，与王艳彬等[11]的报道(93.82%)接近，高于胡晓玉等[12](90.71%)、钱立琼等[13](88.1%)、吴汉钟等[14]的报道(87.36%)。试剂A 真阳性率83.44%，高于吴汉钟等[14]的报道(79.17%)；试剂B 真阳性率77.25%，与钱立琼等[13]的报道(77.5%)接近，高于吴汉钟等[14](68.14%)、何芮等[15]的报道(66.30%)。 ELISA 单试剂阳性标本中TPPA 阴性率82%、TPPA 阳性率10%， 此结果表明抗-TP ELISA 单试剂阳性大多数为假阳性结果，同时提示单种试剂检测存在漏检风险。 联合应用2 种不同厂家ELISA 试剂可形成互补， 保障血液安全。 双试剂筛查阳性标本的确证符合率高于单试剂筛查阳性， 说明双试剂筛查策略提升检测准确性。

为优化南昌地区献血者健康检查方案， 降低血液报废率，减少血液采集、检测、制备流程人力和物料成本消耗，本研究引入HBsAg/TP 抗体联合检测试剂(胶体金法)，了解其应用效果。 研究结果显示，抗-TP 金标阳性占TPPA 确证阳性97.58%，与陈邦锐等[7](91.04%)、黄伯泉等[16](90.4%)的报道均达90%以上， 表明金标试纸条能够有效检出绝大多数梅毒抗体阳性血液标本。黄伯泉等[16]研究发现，HBsAg/TP 抗体联检金标试剂与HBsAg 金标试纸条对HBsAg 检测效能一致，能够有效筛查出TP阳性标本，实际使用价值、经济效益明显。周丹等[17]报道，加强献血前体检初筛检查，尤其是加强献血前TP 检测，能有效减少高危献血人群比例。 建议本地区献血前检测项目增加梅毒初筛， 将现行HBsAg 金标试纸条替换为HBsAg/TP 抗体联检金标试纸条，从源头阻断梅毒感染者献血，降低抗-TP 不合格引起的血液报废。

本研究经对比分析发现，ELISA 筛查阳性标本较高的S/CO 值预示TPPA 阳性的可能性大，TPPA确证阳性符合率随初筛试验S/CO 值增大呈升高趋势。 张伟芳等[18]报道，梅毒抗体ELISA 检测结果S/CO 值的高低与确证实验分级结果存在正相关性。 尽管ELISA 的S/CO 值和TPPA 确证结果的相关性较高， 但不宜完全参照S/CO 值大小推断抗-TP ELISA 反应性结果真阳性与否。 采供血机构血液检测实验室为防止漏检， 大多设置ELISA 判读灰区。 本研究中灰区标本未检出TPPA 阳性，与黄伯泉等[16]研究结果近似，表明灰区设置在一定程度上增加假阳性几率。 亦有文献报道[18-19]灰区范围内部分标本检出TPPA 确证阳性结果，可见合理设置ELISA 灰区限值可发挥防漏检作用， 具备重要意义。

南昌地区130 例梅毒确证阳性献血者中，不同性别、年龄、文化程度、职业的梅毒检出率均存在差异。女性阳性率高于男性，与武汉[7]、广州[20]、南阳[9]等地研究结果一致，可能与女性生理结构特点往往导致梅毒隐性感染， 女性梅毒感染者中部分为性工作者相关。36～55 岁年龄段献血者阳性率较高，推测与梅毒抗体终生阳性、中老年人群成为江西省梅毒高发人群[4]两个因素相关。 低学历人群阳性率较高，文化程度与阳性率呈反比关系。 农民、工人、自由职业者阳性率较高，上述群体以低学历人员居多，缺乏性传播疾病防治知识，卫生条件较差。 高校学生属无偿献血主力军，近年来大学生群体TP、HIV 感染率增高，须引起高度重视，应加强青年学生性安全教育。 岳晓丽等[3]报道，年轻人群报告发病率快速增长； 各职业人群均有梅毒病例报告，以农民和民工最多，学生人群增幅最大。 卢飞豹等[4]报道，15～19 岁少年、农民梅毒报告发病率增幅较大，均为需要重点关注人群。 南昌地区梅毒感染献血者年龄、文化程度、职业特征与国内部分地区献血人群梅毒感染特征基本吻合， 符合我国及江西省梅毒疫情人群分布规律。 初次献血梅毒阳性率高于重复献血， 提示固定献血者队伍建设对于血液安全保障至关重要。

本项目初步掌握南昌地区献血人群梅毒抗体筛查、确证检测情况和梅毒感染献血者流行特征，因样本数量有限，尚存在一定局限性，有待扩大范围进一步调查。建议本地区血站对抗-TP ELISA 单试剂筛查不合格献血者开展TPPA 确证检测，允许确证阴性者进入献血者归队流程， 避免ELISA 假阳性所致血液资源流失； 合理选择检测方法和试剂，强化血液筛查实验室质量体系监控，不断提升检测结果准确性，最大程度避免漏检或假阳性；献血前检测项目增加梅毒抗体胶体金法快速筛查，做好献血者健康征询和健康检查， 从采血源头加大高危行为者甄别力度，保障临床用血安全。