猴头菌丝多糖提取工艺的研究

王振丽，李书华，闫泽华

（河南质量工程职业学院，河南平顶山 467000）

猴头菌是一种重要的药食两用真菌，多糖是猴头菌中的重要活性物质[1]，具有保护胃黏膜[2]、抗肿瘤[3]、抗衰老、降血脂和提高免疫力等多种功能[4]。用猴头多糖制成的药品、保健品和食品深受人们喜爱，猴头多糖成为人们关注的焦点之一，成为近年来医学和食品等领域研究的热点之一，开发前景十分广阔[5-6]。近年来，对猴菇子实体多糖提取条件的研究较多，但对深层发酵猴头菌丝多糖的提取工艺，尤其是超声波提取法研究的较少。以液体发酵生产的猴头菌菌丝为原料，利用超声波技术提取猴头菌丝体多糖，对提取条件进行了优化，以提高猴头菌丝体多糖的提取率。

1 仪器与材料

菌种：猴头菌（Hericium erinaceus），河南质量工程职业学院提供。

仪器：立式压力蒸汽灭菌器、双人净化工作台、振荡器、高速台式离心机、超声波清洗器、低温冷冻干燥机等。

2 试验方法

2.1 菌丝体多糖的提取

以转速6 000 r/min 离心发酵的液体10 min，然后收集菌丝体，用蒸馏水清洗、干燥、粉碎，即得猴头菌丝干粉。称取一定量的猴头菌丝干粉，加入40 倍体积的蒸馏水，在一定的超声波下提取一段时间，提取液离心后过滤，浓缩上清液，向浓缩物中添加3 倍体积的95%乙醇，然后过夜沉淀、离心，沉淀再干燥即为猴头菌丝多糖。

2.2 多糖提取率的测定

3 结果与分析

3.1 不同提取方法对HEP 的影响

称取一定量的猴头菌丝干粉，分别放入编号为1，2，3，4 的瓶中。其中，1 号瓶加入一定量的蒸馏水；2 号瓶加入一定体积的蒸馏水后按一定的超声条件进行提取；3 号瓶加入一定体积的蒸馏水在一定的微波条件下提取。然后离心，上清液再过滤、浓缩，浓缩液再加入一定量的95%乙醇，过夜沉淀；经离心、沉淀再干燥即为猴头菌丝多糖；测其多糖含量，比较猴头多糖的得率。

不同提取方法对HEP 的影响见表1。

表1 不同提取方法对HEP 的影响/%

由表1 可知，微波提取多糖比单纯以蒸馏水为浸提剂时多糖提取率提高了18.4%；以超声波提取时多糖提取率最高，比微波辅助法提高了12.8%。因此，以下试验以蒸馏水为浸提剂，辅以超声提取。

3.2 多糖提取率与超声时间的关系

称取6 份质量相同的猴头菌丝粉，加入20 倍的水，超声功率80 W，在60 ℃的温度下提取多糖10，20，30，40，50，60 min，测定猴头多糖提取率。

多糖提取率与超声时间的关系见图1。

图1 多糖提取率与超声时间的关系

由图1 可知，随着超声时间的增加，多糖提取率先增加后逐渐减小。当超声时间为30 min 时，猴头多糖提取率达到最高。因此，最佳超声时间为30 min。

3.3 多糖提取率与超声温度的关系

称取同质量的猴头菌丝粉6 份，加入20 倍的水，超声功率80 W，在40，50，60，70，80，90 ℃的温度下处理30 min，测定猴头多糖提取率。

多糖提取率与超声温度的关系见图2。

图2 多糖提取率与超声温度的关系

由图2 可知，随着超声温度的升高，多糖提取率也随之提高，当超声温度达到60 ℃时，增幅较大；当超声温度超过60 ℃时，多糖提取率随着超声温度的增加变化不大，从能耗角度考虑，选用超声温度60 ℃为宜。

3.4 多糖提取率与加水倍数的关系

称取同质量的猴头菌丝粉6 份，加入10，20，30，40，50，60 倍的水，在60 ℃，80 W 超声条件下，进行30 min 的处理，然后测定多糖提取率。多糖提取率与加水倍数的关系见图3。

图3 多糖提取率与加水倍数的关系

由图3 可知，随着加水倍数的增加，多糖提取率逐渐增加。当料液比为1∶40 时，猴头多糖提取率最高。因此，提取过程中的料液比选择1∶40。

3.5 提取条件的优化

根据单因素测试的结果，选择超声温度（A）、加水倍数（B）、超声时间（C） 进行L9（34）正交试验。

正交试验因素与水平设计见表2，正交试验结果及极差分析见表3。

表2 正交试验因素与水平设计

表3 正交试验结果及极差分析

由表3 的极差分析可看出，3 个因素对猴头多糖的影响大小依次为超声时间＞加水倍数＞超声温度，较优的浸提条件为A1B2C2。因此，确定最佳提取条件为以蒸馏水为浸提溶剂，料液比1∶40，60 ℃下超声处理30 min。

4 结论

通过研究，确定猴头菌丝体多糖最佳提取条件为以蒸馏水为浸提溶剂，料液比1∶40，60 ℃下超声提取30 min。