血清神经元特异性烯醇化酶、胃泌素释放肽前体在小细胞肺癌中的表达意义

吕明闯，王红岩

（1.河南科技大学第一附属医院 胸外科，河南 洛阳 471003；2.南阳市第二人民医院 胸外科，河南 南阳 473000；3.河南科技大学 临床医学院，河南 洛阳 471003）

小细胞肺癌（small cell lung carcinoma，SCLC）是一种恶性程度较高、生长迅速、易早期转移的特殊肺部肿瘤，大部分患者初步确诊时已处于晚期，错失最佳治疗时机，预后较差［1］。因而，早期有效评估SCLC患者的病理特征，指导临床诊疗方案的制定及改善患者预后具有积极的意义。血清标志物可反映肿瘤发生、增殖等过程，且具有便捷、易获取等优势，因而采用有效的血清标志物评估SCLC患者的病理特征具有临床意义［2］。神经元特异性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）是神经元细胞质内糖酵解的烯醇化酶，主要存在于神经元及神经元内分泌组织中，当细胞组织发生恶性病变时，血液中NSE水平升高［3］。戎荣等［4］研究发现，肺癌患者NSE水平高于良性肺部疾病患者，可作为诊断SCLC重要的血清标志物之一。胃泌素释放肽前体（progastrin-releasing peptide，ProGRP）是一种有效的促分裂原，可促进胃泌素分泌，分布范围较为局限，存在于神经组织及少部分的肺神经内分泌细胞中且水平较低。与正常者比较，血清ProGRP在SCLC患者中呈高表达，且被证实是诊断SCLC的标志物之一［5］。由此推测SCLC患者血清NSE、ProGRP水平或与其临床病理特征存在一定的关系。基于此，本研究旨在分析血清NSE、ProGRP水平在SCLC患者中的表达意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年8月至2021年8月南阳市第二人民医院收治的106例SCLC患者。患者或家属均签署知情同意书。106例SCLC患者中男71例，女35例，年龄43～76（56.60±2.38）岁，有吸烟史58例。本研究经医院医学伦理委员会审核批准。

1.2 入选标准 （1）纳入标准：①SCLC符合相关诊断标准［6］，且经胸部CT、细胞学等检查确诊；②患者主要表现为咯血、咳痰等临床症状；③初次发病；④患者意识清晰，可配合本次检查，预计生存时间＞3个月。（2）排除标准：①入院前已经接受过化疗、放疗、靶向治疗、免疫治疗等；②合并重症感染；③合并胃溃疡、慢性胃炎、恶性贫血、急性心肌梗死、脑血管意外、心力衰竭等；④近期具有重大手术史或严重创伤史；⑤合并其他恶性肿瘤。

1.3 收集指标

1.3.1 血清NSE、ProGRP水平检测方法 入院时，采集患者清晨空腹＞8 h的肘静脉血3 mL，使用离心机（上海达华医疗器械有限公司，FLQ-1J-7型），以3 500 r·min-1离心15 min，离心半径为13.5 cm，取血清，保存于-70℃的环境中。采用磁微粒化学发光法检测血清NSE水平，试剂盒选自北京大成生物工程有限公司。采用化学发光免疫分析法检测血清ProGRP水平，试剂盒选自北京乐普医疗科技有限责任公司。

1.3.2 临床病理特征 血清学检查后，患者均接受穿刺活检。穿刺时采用日立Preirus型号超声诊断仪，采用1～5 MHz的专用穿刺凸阵探头，采用体积分数为75%的乙醇溶液浸泡探头约5 min，常规消毒、铺巾后，采用20 g·L-1的利多卡因（万邦德制药集团有限公司，国药准字H13023765）1～2 mL行穿刺点局部麻醉。根据设计好的穿刺路径，在超声引导下进针，获取组织后放于甲醛溶液中固定，然后送入病理科进行病理学检查。由2名以上医生观察并讨论患者的临床病理特征，包括病灶分型（中心型、周围型）、病灶位置（右侧、左侧）、疾病分期（局限期、广泛期）、肿瘤分化程度（低分化、中-高分化）、淋巴结转移（合并、未合并）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理。采用Shapiro-Wilk正态分布检验计量资料的正态分布情况，符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示；绘制受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线，得到曲线下面积（area under curve，AUC），采用血清NSE、ProGRP水平对SCLC患者疾病分期、淋巴结转移的评估价值，AUC＞0.9表示评估价值较高，0.7～0.9表示有一定评估价值，0.5～＜0.7表示评估价值较低。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同临床病理特征SCLC患者的血清NSE水平比较 广泛期、合并淋巴结转移的SCLC患者血清NSE水平分别高于局限期、未合并淋巴结转移的患者（P＜0.05）；不同病灶分型、病灶位置、肿瘤分化程度的SCLC患者血清NSE水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 不同临床病理特征SCLC患者的血清NSE水平比较（±s，μg·L-1）

表1 不同临床病理特征SCLC患者的血清NSE水平比较（±s，μg·L-1）

注：SCLC为小细胞肺癌；NSE为神经元特异性烯醇化酶。

临床病理特征 例数 血清NSE t P病灶分型中心型 56 26.85±3.62周边型 50 26.50±3.66 0.494 0.622病灶位置右侧 55 26.11±3.70左侧 51 27.31±3.65 1.728 0.087疾病分期局限期 57 25.00±3.84广泛期 49 28.65±3.92 4.791 ＜0.001肿瘤分化程度低分化 48 27.02±3.85中-高分化 58 26.41±3.74 0.825 0.411淋巴结转移合并 46 28.77±4.05未合并 60 25.09±3.84 3.478 ＜0.001

2.2 不同临床病理特征SCLC患者的血清ProGRP水平比较 广泛期、合并淋巴结转移的SCLC患者血清ProGRP水平分别高于局限期、未合并淋巴结转移的患者（P＜0.05）；不同病灶分型、病灶位置、肿瘤分化程度的SCLC患者血清ProGRP水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 不同临床病理特征SCLC患者的血清ProGRP水平比较（±s，ng·L-1）

表2 不同临床病理特征SCLC患者的血清ProGRP水平比较（±s，ng·L-1）

注：SCLC为小细胞肺癌；ProGRP为胃泌素释放肽前体。

临床病理特征 例数 血清ProGRP t P病灶分型中心型 56 90.85±8.17周边型 50 91.25±8.25 0.251 0.803病灶位置右侧 55 90.87±8.33左侧 51 91.22±8.21 0.218 0.828疾病分期局限期 57 88.65±8.24广泛期 49 93.82±8.47 3.179 0.002肿瘤分化程度低分化 48 90.21±8.32中-高分化 58 91.73±8.25 0.941 0.349淋巴结转移合并 46 98.63±8.52未合并 60 85.22±8.20 8.205 0.008

2.3 血清NSE、ProGRP单独及联合评估SCLC患者疾病分期的效能 将SCLC患者血清NSE、ProGRP水平作为检验变量，疾病分期作为状态变量（局限期＝0，广泛期＝1），绘制ROC曲线（见图1）发现，血清NSE、ProGRP水平评估SCLC患者疾病分期的最佳截断值分别为26.960μg·L-1、90.520 ng·L-1，SCLC患者入院时血清NSE、ProGRP水平单项及联合评估疾病分期的AUC分别为0.813、0.810、0.873，均＞0.80，均有一定评估价值。见表3。

表3 血清NSE、ProGRP单独及联合评估SCLC患者疾病分期的效能

图1 血清NSE、ProGRP单独及联合评估SCLC患者疾病分期的ROC曲线

2.4 血清NSE、ProGRP水平单独及联合评估SCLC患者淋巴结转移的效能 将SCLC患者血清NSE、ProGRP水平作为检验变量，淋巴结转移情况作为状态变量（未合并淋巴结转移＝0，合并淋巴结转移＝1），绘制ROC曲线（见图2）发现，血清NSE、ProGRP水平评估SCLC患者淋巴结转移的最佳截断值分别为26.720μg·L-1、95.630 ng·L-1，SCLC患者入院时血清NSE、ProGRP水平单项及联合评估淋巴结转移的AUC分别为0.810、0.809、0.870，均＞0.80，均有一定评估价值。见表4。

表4 血清NSE、ProGRP水平单独及联合评估SCLC患者淋巴结转移的效能

图2 血清NSE、ProGRP单独及联合评估SCLC患者淋巴结转移的ROC曲线

3 讨论

SCLC具有特殊的病理学表现（增殖速度快、淋巴结转移较早等）得到了临床医生的广泛性关注，但由于其发病机制复杂，手术取材受限等因素的干扰，SCLC诊治在长时间内并未有较大的突破。同时临床研究发现，SCLC患者早期接受放化疗后短期内临床疗效较好，但随着治疗的进展，大多患者最终出现肿瘤转移，其预后较差［7］。因而对SCLC患者及早诊断尤为必要。目前，临床通常对SCLC患者进行影像学检查、血常规等检查，而较少实施局部穿刺活检，易忽视其病理变化，影响治疗方案的制定，不利于患者预后。因此，探讨与SCLC患者病情相关的血清指标，以此评估SCLC的病理特征具有积极的意义。

刘琳等［8］研究结果显示，血清NSE、ProGRP与SCLC的发生、发展密切相关，二者在SCLC患者中的水平高于健康人体。可见，血清NSE、ProGRP水平可能与SCLC患者病理变化相关，本研究分析血清NSE、ProGRP与SCLC患者病理特征发现，广泛期、合并淋巴结转移的SCLC患者血清NSE、ProGRP水平分别高于局限期、未合并淋巴结转移的患者，初步提示了血清NSE、ProGRP水平与SCLC患者临床分期、淋巴结转移存在一定关系，且血清NSE、ProGRP过表达，可能提示患者存在广泛期、高淋巴结转移风险。

NSE主要是由于神经内分泌细胞分泌，在正常脑组织中NSE含量较高，但在肺部神经内分泌细胞中的含量较少［9］。而SCLC属于高级别神经内分泌肿瘤，在免疫组化技术中可见神经内分泌颗粒，且通过检测检测神经内分泌标志物（如NSE）呈阳性。研究发现，具有神经内分泌功能的肿瘤可通过其自身的分泌途径释放出刺激恶性肿瘤细胞增殖、转移的相关活性物质［10］。且临床多项研究已经证实，在SCLC患者中血清NSE呈过表达［11-12］。因而，在SCLC中肿瘤细胞可分泌NSE，可促使血清NSE呈过表达，且刺激肿瘤细胞不断增殖，促使肿瘤恶变及转移。因此，在广泛期、合并淋巴结转移的SCLC患者血清NSE水平较高。细胞生物学表明，所有的肺癌细胞可同时产生多种激素，还可产生脑肠肽激素，胃泌素释放肽（gastrin releasing peptide，GRP）属于脑肠肽激素中的一种，而ProGRP是GRP前体，且其活性较为稳定，临床监测相对容易，可有肺癌细胞分泌，并通过自分泌的形式促进肿瘤细胞的增殖、转移，或与附近细胞膜上相应的GRP特异性受体结合促进肿瘤的增殖变化，促使肿瘤细胞恶变程度逐渐升高，增加转移风险［13-14］。因此，广泛期、合并淋巴结转移的SCLC患者血清ProGRP水平较高。

针对NSE、ProGRP在肿瘤发病及病情进展中的多种作用机制，推测NSE、ProGRP可用于评估SCLC患者临床分期及淋巴结转移情况，进一步绘制ROC曲线发现，血清NSE、ProGRP水平单独及联合预测SCLC患者临床分期、淋巴结转移的AUC均＞0.80，均有一定价值。但是，本研究未观察SCLC患者血清NSE、ProGRP水平动态变化情况，因而血清NSE、ProGRP水平在SCLC患者中的表达仍需进一步进行探讨。

综上所述，SCLC患者血清NSE、ProGRP水平与患者临床病理特征中疾病分期、淋巴结转移有密切关系，临床可通过检测患者血清NSE、ProGRP水平，评估SCLC患者肿瘤分期及淋巴结转移情况。