哮喘-慢阻肺重叠综合征患者免疫球蛋白、辅助性T细胞17和调节性T细胞与肺功能的相关性

焦春燕，焦咏梅，赵曌

（1.遂平县中医院内科，河南 驻马店 463100；2.驻马店市第一人民医院内科，河南 驻马店 463000）

哮喘-慢阻肺重叠综合征（asthma-chronic obstructive pulmonary disease overlap syndrome，ACOS）是指患者同时存在哮喘和慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD），且两种疾病之间存在相互转变，其主要临床表现为气道持续性受限，呈进行性发展［1-2］。该病的发生与机体免疫功能有关［3］。但目前临床仍未明确ACOS的发病机制及治疗要点。因此，探讨ACOS的生理病理特点对治疗及预后有一定临床价值。外周血辅助性T细胞17（helper T cell 17，Th17）是一类与Th1、Th2独立且产生白细胞介素-17的新型效应CD4+T细胞亚群，可促进炎症反应［4］。调节性T细胞（regulatory T cell，Treg）同样属于CD4+T细胞亚群，具有免疫抑制功能的特点［5］。COPD机体中出现免疫细胞，存在以Th1细胞反应为特点的自体免疫反应，但缺乏对体液免疫、Th17、Treg在ACOS患者中的表达和其免疫调节产生机制以及与肺功能关系的相关研究［6］。基于此，本研究以ACOS患者为研究对象，分析体液免疫、外周血Th17和Treg水平与肺功能的关系，为临床寻找ACOS新的防治途径提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料采用便利取样法选取遂平县中医院2019年3月至2020年5月收治的80例ACOS患者，纳入A组。于同期选取40例哮喘患者（B组）及40例COPD患者（C组）。3组性别、年龄、吸烟史、病程、体质量指数比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 3组一般资料比较

1.2 ACOS诊断标准参照西班牙指南标准诊断ACOS［7］。（1）主要标准：①痰标本发现嗜酸粒细胞增多或有哮喘病史；②支气管舒张试验阳性，第1秒用力呼气容积（forced expiratory volume volume in 1 second，FEV1）改善率＞15%。（2）次要标准：①存在过敏史；②COPD患者总IgE水平升高；③2次或2次以上支气管舒张试验阳性，改善率＞12%。ACOS符合主要标准的其中1条和2条以上的次要标准即可确诊为ACOS。

1.3 纳入与排除标准（1）纳入标准：①符合ACOS的诊断标准；②近期未服用激素类药物；③能有效配合，顺畅交流；④患者和家属签署知情同意书。（2）排除标准：①合并其他器官病变；②伴有肺部严重病变或支气管病变；③合并精神疾病；④中途退出治疗或退出本研究。

1.4 观察指标

1.4.1 免疫球蛋白 采集患者空腹静脉血5 mL，装于带有抗凝剂的采血管中送检。采用全自动生化分析仪，利用免疫球蛋白试剂测定盒（浙江康特生物科技有限公司）对免疫球蛋白A（immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白M（immunoglobulin M，IgM）、免疫球蛋白G（immunoglobulin G，IgG）进行测定，方法为免疫比浊法。

1.4.2 Th17和Treg细胞 于清晨采集患者空腹静脉血5 mL，装于抗凝管内，采用磷酸盐缓冲液1∶1稀释后利用淋巴细胞分离液以3 000 r·min-1离心20 min，将单核细胞（浓度为每毫升2×106个）从淋巴细胞中分离出来，进行染色、孵育，采用CytoFLEX流式细胞仪（美国贝克曼库尔特有限公司）测定Th17、Treg细胞表达水平及Th17／Treg。

1.4.3 肺功能 采用科时迈肺功能检测仪检测FEV1、用力肺活量（forced vital capacity，FVC）、用力肺活量占预计值百分比（percentage of forced vital capacity to the expected value，FVC%pred）、第1秒用力呼气容积占预计值百分比（percentage of forced expiratory volume in 1 second to the expected value，FEV1%pred）。

1.5 统计学方法采用SPSS 22.0统计软件处理数据。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，3组比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用独立样本t检验；计数资料以例数和百分数（%）表示，组间比较采用χ2检验；相关性分析采用Pearson相关法。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫球蛋白3组IgA、IgM及IgG水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；A组和C组IgA、IgM及IgG水平较B组低（P＜0.05）；A组IgA和IgG水平较C组低，A组IgM水平高于C组（P＜0.05）。见表2。

表2 3组免疫球蛋白水平比较（±s，g·L-1）

表2 3组免疫球蛋白水平比较（±s，g·L-1）

注：与A组比较，a P＜0.05；与B组比较，b P＜0.05；IgA为免疫球蛋白A；IgM为免疫球蛋白M；IgG为免疫球蛋白G。

组别 例数IgA IgM IgG A组80 1.51±0.29 1.34±0.61 8.91±2.36 B组40 2.34±0.28a 1.64±0.30a 10.58±2.49a C组40 1.82±0.41ab 1.12±0.25ab 9.53±1.19ab F 88.865 12.154 7.934 P ＜0.001＜0.001 0.001

2.2 Th17、Treg及Th17／Treg3组Th17、Treg及Th17／Treg水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；A组和C组Th17、Th17／Treg水平高于B组，Treg水平低于B组（P＜0.05）；A组Th17、Th17／Treg水平高于C组，Treg水平低于C组（P＜0.05）。见表3。

表3 3组Th17、Treg、Th17／Treg比较（±s）

表3 3组Th17、Treg、Th17／Treg比较（±s）

注：与A组比较，a P＜0.05；与B组比较，b P＜0.05；Th17为辅助性T细胞17；Treg为调节性T细胞。

Th17／%Treg／%Th17／Treg A组组别 例数80 6.52±1.73 1.61±0.47 4.37±1.46 B组40 3.26±0.91a 3.49±0.63a 1.01±0.21a C组40 4.78±1.19ab 2.74±0.58ab 2.18±0.75ab F 71.775 173.623 137.092 P ＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 肺功能3组FVC%pred、FEV1%pred、FEV1／FVC比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；A组FVC%pred、FEV1%pred、FEV1／FVC低于B组（P＜0.05）；C组FVC%pred、FEV1%pred、FEV1／FVC低于B组（P＜0.05）；A组FVC%pred与C组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），FEV1%pred、FEV1／FVC低于C组（P＜0.05）。见表4。

表4 3组肺功能指标比较（±s，%）

表4 3组肺功能指标比较（±s，%）

注：FVC%pred为用力肺活量占预计值百分比；FEV1%pred为第1秒用力呼气容积占预计值百分比；FEV1／FVC为第1秒用力呼气容积／用力肺活量。

组别 例数FVC%pred FEV1%pred FEV1／FVC A组80 73.49±12.67 55.31±10.22 59.69±8.26 B组40 88.45±14.51 71.63±11.74 74.48±11.69 C组40 74.64±13.01 63.19±9.42 68.14±9.76 F 18.301 33.449 33.744 P ＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 ACOS患者免疫球蛋白、Th17和Treg水平与肺功能的相关性Pearson相关分析显示，IgA、IgM、IgG、Th17、Treg、Th17／Treg与FVC% pred、FEV1% pred、FEV1／FVC呈正相关（P＜0.05）。见表5。

表5 ACOS患者免疫球蛋白、Th17和Treg水平与肺功能的相关性

3 讨论

ACOS为基于哮喘基础上并发COPD的疾病［8］。哮喘是一种慢性气道炎症性疾病，主要表现为胸闷、气喘，伴有进行性吸气性呼吸困难；COPD的主要特点为不完全可逆性气流受限，呈进行性发展，对肺功能有严重损伤性，严重者可引起全身不良反应［9］。ACOS的发病机制较复杂。黄远东等［10］研究指出，肺功能与ACOS的发生发展存在一定相关性，其中FEV1／FVC可以反映患者的病情严重程度及气道阻塞程度。但是ACOS患者较哮喘、COPD患者的病情危急，且发作较反复，仅靠肺功能无法全面评估病情变化。这会对ACOS的治疗及预后造成严重影响，同时影响患者的生活质量。因此，研究诊断ACOS的指标具有重要价值，临床上可根据此类指标进行病情评估，以促进患者恢复［11］。

杨晓芸等［12］研究发现，体液免疫可影响COPD患者的肺功能，COPD患者体液免疫功能低下，随着病情加重，肺功能降低，免疫功能减退。体液免疫是机体一种特异性免疫能力，主要由B淋巴细胞组成。IgA、IgM、IgG是反映体液免疫的主要指标。当机体体液免疫功能降低时，可表现为IgA、IgM、IgG水平下降［13］。本研究结果显示，A组和C组IgA、IgM及IgG水平较B组低，A组IgA和IgG水平较C组低，A组IgM水平高于C组。这说明相比于哮喘、COPD患者，ACOS患者的体液免疫功能存在明显障碍，而COPD患者比哮喘患者的体液免疫功能更低。可能原因为：ACOS和COPD患者长期氧供给不足，机体二氧化碳过多，炎症因子入侵导致机体内环境不稳定，除了影响呼吸系统之外，也会影响机体其他重要器官功能的代谢，而免疫功能下降则会导致细菌、病毒严重入侵，引起一系列循环反应，造成机体严重损伤。本研究结果显示，A组和C组Th17、Th17／Treg水平高于B组，A组和C组Treg水平低于B组，A组Th17、Th17／Treg水平高于C组，A组Treg水平低于C组。这说明ACOS患者免疫细胞分布异常，Th17／Treg失调，与黄羽等［14］研究结果一致。Th17、Treg对机体内分泌-免疫系统具有重要的调节作用。Th17可促进炎症因子增多，加重炎症反应。Treg可以使病理细胞受到阻断，抑制感染细胞，保护机体组织。而ACOS患者Th17异常增强而Treg免疫减弱，导致两者比例失调，使得ACOS患者全身炎症反应增强［15］。本研究结果显示，A组FVC%pred、FEV1%pred及FEV1／FVC低于B组，A组FVC%pred与C值比较差异无统计学意义。这说明肺功能指标对ACOS、COPD与哮喘的鉴别具有重要意义，但是对ACOS和COPD的鉴别诊断仍存在局限性。在本研究中，IgA、IgM、IgG、Th17、Treg、Th17／Treg与FVC%pred、FEV1%pred、FEV1／FVC呈正相关。这说明体液免疫、Th17、Treg水平对评估ACOS患者的病情程度具有重要价值，同时可反映肺功能，这与夏清等［16］研究结论一致。

综上所述，ACOS患者存在体液免疫功能障碍，外周血Th17、Th17／Treg水平表达异常，且与肺功能关系密切。