重度脂血高速离心后对凝血指标的影响

施清蓉 宁长秀

1.江西省宜春市第二人民医院检验科，江西宜春 336000；2.江西省抚州市第一人民医院检验科，江西抚州 344000

目前临床上观察患者凝血功能的指标包括凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、活化部分凝血活酶时间（activeated partial thromboplasting time，APTT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）、纤维蛋白原（fipinogen，FIB）等，监测上述指标的变化有助于评估患者具体病情[1-2]。实际检验过程中，对于高脂血的标本，由于受到大量三酰甘油的影响，对于生化、凝血指标的检测容易受到干扰，降低了检验结果的准确性[3-4]。相关研究显示溶血、高脂血症、高胆红素血症等均是影响监测结果的重要因素[5]。因此对于这一类标本，探讨更为精确的检测方法具有重要的临床意义。美国实验室标准协会推荐采用高速离心法能够去除脂质对检测结果的影响[6-7]。本研究对高脂血症患者标本进行高速离心，并检测其凝血指标，以探讨降低高脂血对凝血指标检测影响的有效方案。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2020年7月至2021年7月宜春市第二人民医院收治的85 例患者作为研究对象，按照患者有无高脂血症将其分为观察组（43 例）和对照组（42例），观察组中，男23 例，女20 例；年龄23～38 岁，平均（29.15±5.29）岁。对照组中，男25 例，女17 例；年龄25～40 岁，平均（30.05±6.57）岁。两组患者的一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有患者及家属均知情同意。纳入标准：①年龄≥18 岁；②患者凝血功能正常；③精神状态正常，能顺利配合治疗。排除标准：①重症感染者；②晚期恶性肿瘤患者；③近期口服调血脂药物；④合并血液系统疾病。

1.2 使用仪器

湘仪H1650-W 高速离心机；中佳SC-3616 低速离心机；贝克曼AU-5800 型生化检测仪；日本希斯美康生产的CA-2000i 型全自动血凝仪；德国西门子公司生产的相应试剂（对应批号APTT：547173；PT：545519；TT：42826；FIB：538064；OV 缓冲液：547026）。所有仪器及标本在检测前均经质控中心检查通过（质检批号：107913N/P）。

1.3 检测方法

将所有标本采集完毕后进行离心，使用3000 r/min的离心机将所得标本进行离心，离心时间为15 min，离心半径为15.5 cm，以消除标本中的血小板成分对检测结果的影响，可见观察组患者采集血清呈混浊乳白色，对照组患者采集血清呈清亮色。使用全自动血凝仪检测两组患者标本APTT、PT、TT、FIB 值，随后将剩余血清置于三支1.5 ml 离心管中，分别将标本置于16000 r/min 的高速离心机（18 516×g）内高速离心10、20、30 min，离心半径为15.5 cm，此时上层为所得悬浮脂质，下层为清亮血清液，去除上层脂质用吸管提取下层所得标本，使用CA-2000i 型全自动血凝仪测定相应的APTT、PT、TT、FIB 值。

1.4 统计学方法

使用SPSS 26.0 统计软件进行数据分析，计量资料采用计数±标准差（±s）表示，组间比较采用t 检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK 检验；计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

对照组患者离心10、20、30 min 的APTT、PT、TT、FIB 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。观察组患者 离 心10、20、30 min 的APTT、PT、TT、FIB 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。组内比较，观察组患者离心20、30 min APTT、PT、TT、FIB 水平低于本组离心10 min，观察组患者离心30 min APTT、PT、TT、FIB水平低于离心20 min，差异均有统计学意义 （P＜0.05）。组间比较，观察组患者标本经离心10、20 min APTT、PT、TT、FIB 水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），两组患者间离心30 min APTT、PT、TT、FIB 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表1）。

表1 两组标本经高速离心后不同时间点APTT、PT、TT、FIB 值的比较（±s）

表1 两组标本经高速离心后不同时间点APTT、PT、TT、FIB 值的比较（±s）

注 与本组离心10 min 比较，aP＜0.05；与本组离心20 min 比较，bP＜0.05；APTT：活化部分凝血酶原时间；PT：凝血酶原时间；TT：凝血酶时间；FIB：纤维蛋白原

组别 APTT（s） PT（s） TT（s） FIB（g/L）观察组（n=43）离心10 min离心20 min离心30 min F 值P 值对照组（n=42）离心10 min离心20 min离心30 min F 值P 值29.87±2.54 28.02±2.19a 26.41±1.82ab 8.326 0.001 15.89±1.85 13.87±1.64a 12.33±2.03ab 5.364 0.018 21.69±2.54 19.55±2.09a 18.06±2.23ab 6.714 0.006 5.06±1.59 4.55±1.47a 3.25±0.79ab 5.604 0.016 t 离心10 min 组间比较值P 离心10 min 组间比较值t 离心20 min 组间比较值P 离心20 min 组间比较值t 离心30 min 组间比较值P 离心30 min 组间比较值27.34±2.05 26.58±2.14 26.14±1.98 1.457 0.163 4.506 0.002 3.854 0.008 1.014 0.102 12.84±2.06 12.25±1.98 12.57±2.13 1.534 0.154 5.617＜0.001 4.204 0.005 0.854 0.118 18.09±2.31 17.54±1.98 17.95±2.16 1.097 0.206 4.819 0.001 3.519 0.009 0.637 0.167 3.24±0.64 3.09±0.59 3.14±0.72 1.605 0.194 6.219＜0.001 4.529 0.005 0.941 0.129

3 讨论

凝血项目检测是临床上常用的检查项目，根据此检测结果有助于临床医师评估患者病情的变化及手术指征，同时能够指导临床决策。然而目前临床上干扰凝血项目检测结果的因素较多，其中高血脂是最常见的干扰因素，影响检测结果的准确性[8-9]。近年来随着人们生活水平的提高，临床上高脂血症的发病率逐年增加，其不仅影响患者生化检测结果，同时影响生化指标。为了降低高血脂对于生化、血脂等指标的影响，据报道目前常用的方法包括去脂剂、高速离心法、去离子水稀释法和乙醚萃取法等[10-11]。本研究使用高速离心法对重度高脂血症患者血清标本及正常体检组标本分别进行离心10、20、30 min，并采用全自动血凝仪检测患者APTT、PT、TT、FIB 指标。

关于重度高脂血症对于凝血指标检测的干扰，分析原因为全自动血凝仪的检测是以光学比浊法为原理，而透光度降低的水平为判断的标准，因此普通的光学系统检测会受到黄疸、高血脂及溶血血浆等因素的干扰；高血脂会导致吸光强度出现变化，继而使得散射光及透光度出现异常变化；对于高血脂标本影响凝血功能的检测结果是因为吸光度增加使得血凝指标的检测结果增加；脂血对血浆内血凝因子的包裹使血凝试剂不能与血浆内凝血因子充分发生反应，只能检测出多数脂肪的吸光度，而全自动血凝仪分析是以双磁路磁珠法为检测原理，突破了标本外观的干扰[12-13]。本研究结果显示，对照组患者标本经高速离心机离心10、20、30 min 后，三个时间点APTT、PT、TT、FIB 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示对于常规标本凝血指标的检测不会受到影响。

本研究结果还显示，观察组患者标本经高速离心机离心10、20、30 min 后，三个时间点APTT、PT、TT、FIB 水平差异有统计学意义（P＜0.05）。与离心10 min相比，离心20、30 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。因此根据此研究结果，随着高速离心时间的延长，所测得的凝血指标越接近于真实水平。由于对照组患者测得的凝血指标更为精确，本研究进一步比较两组患者APTT、PT、TT、FIB 水平的差异，结果显示两组患者标本经离心10、20 min 后检测结果显示，观察组患者标本经离心10、20 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平高于对照组，差异有统计学意义 （P＜0.05），两组患者间离心30 min 后APTT、PT、TT、FIB 水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），提示对于重度高血脂标本经高速离心30 min之后可基本消除对于APTT、PT、TT、FIB 测定的干扰。值得一提的是，由于临床检测结果具有一定时效性，因此离心时间不应过久，而通过高速离心30 min 即可使血脂标本得到最大程度的澄清，消除高脂血对于APTT、PT、TT、FIB 检测的影响[14-15]。

综上所述，重度高脂血标本会影响APTT、PT、TT、FIB 凝血指标的检测结果。因此实际临床工作中遇到高脂血标本时，可采用高速离心30 min 来澄清脂血标本，以消除重度脂血对仪器检测的影响。