河南省心脑血管疾病患者CYP2C19基因多态性分析

马新利，班爽爽，黄宇娜，侯远方，张暋

(郑州金域临床检验中心有限公司 实验诊断部，河南 郑州 450000)

心脑血管疾病已在全世界范围内成为人类的头号杀手[1]，氯吡格雷是临床上最常用的一种治疗脑梗死和冠心病的抗血小板聚集药物，是预防和治疗心脑血管疾病的一线药物[2]。氯吡格雷药效个体差异大，4%～30%的患者存在氯吡格雷抵抗，服用常规剂量的氯吡格雷后无法达到理想的抗血小板聚集效果，氯吡格雷抵抗可以通过药物基因组学来解释[3]。细胞色素P450(cytochrome P450，CYP)是一组参与生物转化的超基因家族编码的同工酶，CYP2C19作为 CYP药物代谢酶中的重要一员，是氯吡格雷在体内生物代谢的关键酶。CYP2C19基因遗传变异可导致酶活性的个体差异，使人群中出现超快代谢者、快代谢者、中间代谢者和慢代谢者4种表型[4]。本研究对河南省1 182例心脑血管病患者CYP2C19基因型和代谢表型分布特征进行统计分析，研究其分布，以期为心脑血管病患者CYP2C19基因筛查和氯吡格雷个体化用药提供一定理论依据，协助临床减少不良心血管事件的发生。

1 资料与方法

1.1 一般资料以2020年1月至2021年5月送检至郑州金域临床检验中心有限公司的1 182例心脑血管病患者标本为研究对象。(1)纳入标准：①在医生指导下长期服用氯吡格雷的患者；②年龄≥18岁；③临床诊断为心脑血管疾病。(2)排除标准：①有严重心、肝、肾疾病；②有抗血小板治疗禁忌证。患者年龄为18～99(62.98±11.73)岁，其中18～40岁44例，41～65岁609例，大于65岁529例。男752例，女430例。

1.2 DNA提取方法抽取患者外周血2 mL于乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA)抗凝管中，颠倒混匀后吸取200 μL，按照QIAamp DNA Blood Mini Kit(51106)试剂盒说明书提取DNA，用Nanodrop检测待检基因组DNA，确保DNA水平在10 mg·L-1以上，260 nm和280 nm处吸光度比值(A260/A280)为1.6～2.0。

1.3 基因分型提取好的DNA经PCR扩增，SAP纯化，单碱基延伸反应，树脂脱盐纯化后将样品点样到芯片上，用Agena MassARRAY®Analyzer 4进行质谱检测，用Typer Analyzer软件分析CYP2C19基因型。根据CYP2C19的基因类型，定义CYP2C19*17/*17、*1/*17为超快代谢型，CYP2C19*1/*1为快代谢型，CYP2C19*1/*2、*1/*3、*2/*17、*3/*17为中间代谢型，CYP2C19*2/*2、*2/*3、*3/*3为慢代谢型。

2 结果

2.1CYP2C19基因多态性分布1 182例心脑血管疾病患者CYP2C19基因多态性检测结果见表1，共检出10种基因型和4种代谢表型。CYP2C19*1/*1基因型出现频率最高，为40.69%，CYP2C19*17/*17基因型出现频率最低，为0.08%。超快代谢型、快代谢型、中间代谢型和慢代谢型分别占1.95%、40.69%、43.74%和13.62%。见表1。

表1 河南省1 182例心脑血管疾病患者CYP2C19基因型和代谢表型分布

2.2CYP2C19代谢表型在不同性别患者中的分布根据性别将1 182例患者分为两组，男性组752例，占63.62%；女性组430例，占36.38%。男、女两组患者CYP2C19代谢表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 不同性别者CYP2C19代谢表型分布[n(%)]

2.3CYP2C19代谢表型在不同年龄患者中的分布根据1 182例心脑血管疾病患者的平均年龄将其分为两组，<62.98岁组共533例，占45.09%；>62.98岁组共649例，占54.91%。不同年龄组患者CYP2C19代谢表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 不同年龄者CYP2C19代谢表型分布[n(%)]

2.4CYP2C19代谢表型在不同地区的分布对河南、重庆、福建和湖北CYP2C19代谢表型分布进行统计学比较，结果显示，河南省CYP2C19代谢表型分布与文献报道的重庆[5]、福建省[6]和湖北省[7]CYP2C19代谢表型分布情况相比，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 不同地区CYP2C19代谢表型分布[n(%)]

3 讨论

氯吡格雷是一种抗血小板药物，在心脑血管疾病的防治中效果显著。氯吡格雷作为一种前体药物，经肠道消化吸收后85%～90%酯化为无活性成分，仅有10%～15%通过肝药酶CYP2C19代谢为活性产物，与表面的二磷酸腺苷受体不可逆地结合，从而发挥抗血小板聚集的治疗作用[2,8]。2010年美国食品药品监督管理局修改的氯吡格雷说明书中用黑框警示：CYP2C19基因检测结果应作为医生调整治疗策略的参考[9]。因此，氯吡格雷基因多态性检测在指导个体化抗血小板治疗中具有重要意义。

CYP2C19具有多个等位基因，亚洲人群常见的等位基因是CYP2C19*2、*3，CYP2C19*17是一种新的等位基因，是近年来的研究热点，但在中国人群中分布较少[10]。本研究对1 182例心脑血管疾病患者进行CYP2C19基因多态性检测，检测CYP2C19*2、*3及*17等位基因和相应代谢表型，10种基因型全部均有检出，包括*17/*17、*1/*17、*1/*1、*1/*2、*1/*3、*2/*17、*3/*17、*2/*2、*2/*3、*3/*3。国内关于CYP2C19*17/*17基因型的报道很少[3]，本研究检出1例CYP2C19*17/*17基因型患者。超快代谢型出现频率为1.94%，该代谢型患者血小板抑制作用强，治疗推荐使用说明书推荐剂量，即每日75 mg，但超快代谢型患者在服用氯吡格雷时应密切注意出血风险；快代谢型出现频率为40.69%，该代谢型患者血小板抑制作用正常，治疗推荐使用说明书推荐剂量，每日75 mg；中间代谢型患者最多，出现频率为43.75%，该代谢型患者血小板抑制作用较弱，心脑血管事件发生风险较高，考虑换用其他药物；慢代谢型出现频率为13.60%，该代谢型患者血小板抑制作用很弱，心脑血管事件发生风险高，考虑换用其他药物。在本研究纳入的河南省心脑血管疾病患者中，中间代谢型和慢代谢型共占57.35%，即超过一半的人存在不同程度的氯吡格雷抵抗。因此，建议对使用或拟用氯吡格雷的患者进行CYP2C19基因检测，根据患者的基因代谢型及时调整剂量或更换其他药物，以获得预期治疗效果及避免不良心血管事件的发生。为全面了解河南省心脑血管疾病患者氯吡格雷CYP2C19基因多态性分布特点，本研究对比了河南省与重庆、福建省和湖北省CYP2C19代谢表型分布，结果显示不同地区CYP2C19代谢表型分布差异有统计学意义，说明河南省心脑血管疾病患者CYP2C19代谢表型具有一定的地域特异性，这可能与该地区人群遗传背景、生活环境、饮食结构和习惯等有一定关系。男女患者CYP2C19代谢表型差异无统计学意义，不同年龄患者CYP2C19代谢表型差异也无统计学意义，说明常染色体上CYP2C19基因的基因型与性别无关，年龄变化对CYP2C19基因的基因型也无影响。

综上所述，河南省心脑血管疾病患者CYP2C19基因存在多态性，全部10种基因型均有检出。CYP2C19中间代谢型和慢代谢型患者所占比率较高，标准剂量氯吡格雷用药可能无法达到预期治疗效果。河南省CYP2C19代谢表型分布与其他地区存在一定差异，提示用药前检测当地患者CYP2C19基因型和代谢表型具有重要意义。CYP2C19*17/*17基因型出现频率虽然较低，但对于检出的患者具有较重要的出血风险警示意义。用药前检测CYP2C19基因多态性不仅可以协助医生制定精准的用药方案，也可以作为调整氯吡格雷剂量或更换药物的依据，有助于减少心脑血管不良事件的发生。