血清ProGRP与CYFRA21⁃1水平辅助肺鳞癌诊断及预后的研究

陈军 范洪峰 芮晓艳

肺鳞癌即肺鳞状细胞癌，是非小细胞肺癌中的独特病理类型，其发病率较高，仅次于肺腺癌，发病率占肺癌的25%～30%，其生长速度较快，需尽早确诊，及时治疗，以改善患者预后，延长生存时间［1⁃2］。血清肿瘤标志物为临床早期诊断癌症、监测预后的重要指标，且具有简单、快速、安全等优势。胃泌素释放肽前体（Pro⁃Gastrin⁃Releasing Pep⁃tide，ProGRP）、细胞角蛋白19 片段（cytokeratin 19 fragment，CYFRA21⁃1）均为非小细胞肺癌的特异性肿瘤标志物，中华医学会检验分会、卫生部临床检验中心等在《肿瘤标志物的临床应用建议》［3］中提出，ProGRP、CYFRA21⁃1 可作为肺癌筛查、诊断、预后评估和疗效监测的指标。并且近年来越来越多研究证实，ProGRP、CYFRA21⁃1 在肺癌的发生、进展中发挥重要作用［4］，可用于肺癌的早期诊断，但其对患者预后监测作用的报道尚少。本研究对ProGRP、CYFRA21⁃1 在肺鳞癌诊断及预后监测中的应用进行分析，旨在为肺鳞癌的诊治提供参考。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年1月至2019年12月滁州市第一人民医院呼吸科收治的102 例肺鳞癌作为观察组，其中男55 例，女47 例；年龄平均（65.23±10.38）岁；体质量指数（BMI）平均（22.58±1.79）kg/m2；肿瘤直径平均（3.24±0.83）cm；TNM 分期：Ⅰ期14 例，Ⅱ期36 例，Ⅲ期35 例，Ⅳ期17 例。观察组纳入标准：①符合《中华医学会肺癌临床诊疗指南（2018 版）》［5］中肺鳞癌诊断标准，并经病理检查确诊；②均接受ProGRP 与CYFRA21⁃1 检查者；排除标准：①合并其他恶性肿瘤者；②妊娠或哺乳期妇女；③合并严重心脑血管或肝肾功能异常等疾病者；④失去随访者。

另随机选取同期在本院经肺纤维镜、CT 等检查确诊为肺部良性病变的38 例患者作为对照组，其中男21 例，女17 例；年龄平均（63.50±11.16）岁；BMI 平均（22.23±1.68）kg/m2；疾病类型：肺炎15例，肺结核9 例，支气管炎6 例，支气管扩张5 例，肺气肿3 例。两组性别、年龄、BMI 比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有入试者均签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

于治疗前或体检前采集观察组和对照组空腹静脉血5 min，静置30 min 后加速3 000 r/min 加速离心（半径10cm），离心15 min，分离血清，采用梅里埃VIDAS 全自动免疫分析仪和电化学发光法检测ProGRP、CYFRA21⁃1 水平，试剂盒均购自上海博谷生物科技有限公司，检测步骤严格参照试剂说明书：①样本中加入固相抗体，磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤；②加入血清标本，充分反应后形成抗原复合物，PBS 洗涤，去除杂质；③样本中加入酶标抗体，待与固相免疫复合物充分发硬后PBS 洗去残余酶标抗体，固相载体上的酶量可定量反映受检物质水平；④加入反应底物和酶催化底物，参照颜色反应定性或定量分析抗原物质。

1.3 预后评估

对肺鳞癌102 例患者进行电话、门诊等随访2年，随访截至值2021年12月。随访第1年每3月1 次，第2年，每6月1 次。患者总生存时间未确诊到随访结束或死亡的时间。

1.4 统计学处理

采用软件SPSS 22.0 处理数据，计量资料符合正态分布，用（±s）表示，采用独立样本t检验；计数资料采用n（%）表示，采用χ2检验；诊断价值采用受试者工作特征曲线（ROC）进行分析；采用Kaplan⁃Meier 生存曲线进行生存情况分析。P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组ProGRP、CYFRA21⁃1 水平比较

观察组ProGRP、CYFRA21⁃1 水平高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 两组ProGRP、CYFRA21⁃1 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of ProGRP and CYFRA21⁃1 between the two groups（±s）

表1 两组ProGRP、CYFRA21⁃1 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of ProGRP and CYFRA21⁃1 between the two groups（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 102 38 ProGRP（ng/L）64.47±13.44 50.86±8.58 8.042 0.000 CYFRA21⁃1（ng/mL）4.81±2.36 2.27±1.15 10.896 0.000

2.2 ProGRP、CYFRA21⁃1 对鉴别肺鳞癌与肺部良性病变的价值分析

ROC 曲线分析显示，ProGRP、CYFRA21⁃1 诊断肺鳞癌的AUC分别为0.779、0.808，根据最佳临界值，当ProGRP 高于60.86 ng/L 时，其敏感度为55.9%，特异度为92.1%；当CYFRA21⁃1高于4.15 ng/mL时，其敏感度为53.9%，特异度为97.4%。见表2、图1。

表2 ProGRP、CYFRA21⁃1 对肺鳞癌的诊断价值分析Table 2 Analysis of the diagnostic value of ProGRP and CYFRA21⁃1 for lung squamous cell carcinoma

图1 ROC 曲线图Figure 1 ROC curve

2.3 肺鳞癌患者中ProGRP、CYFRA21⁃1 表达与临床病理特征的关系

102 例患者中66 例ProGRP 表达≥60.86 ng/L的定义为高表达组，另外36 例定义为低表达组；58 例CYFRA21⁃1≥4.15 ng/L 的定义为高表达组，另外44 例定义为低表达。ProGRP、CYFRA21⁃1 在TNM 期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润程度T3～T4 患者中的高表达率高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润程度T1～T2 患者差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 肺鳞癌患者中ProGRP、CYFRA21⁃1 表达与临床病理特征的关系［n（%）］Table 3 Relationship between the expression of ProGRP and CYFRA21⁃1 and clinicopathological characteristics in patients with lung squamous cell carcinoma［n（%）］

2.4 肺鳞癌患者中ProGRP、CYFRA21⁃1 表达与预后的关系

随访至2020年12月31日，102 例患者存活48例，死亡54 例，生存率为47.06%（48/102），总生存时间为（31.92±12.67）月。ProGRP、CYFRA21⁃1 高表达者存活率低于低表达者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表4、图2。

图2 ProGRP、CYFRA21⁃1 表达与预后的关系Figure 2 The relationship between the expression of ProGRP and CYFRA21⁃1 and prognosis

表4 肺鳞癌患者中ProGRP、CYFRA21⁃1 表达与预后的关系［n（%）］Table 4 The relationship between the expression of ProGRP and CYFRA21⁃1 and the prognosis in patients with lung squamous cell carcinoma［n（%）］

3 讨论

肺癌是发病率最高的一种肿瘤，死亡率也较高，而肺鳞癌作为肺癌的一种，病因尚不明确，可能是由吸烟、空气污染、电离辐射、基因突变、遗传等多种因素相互作用引起的［6⁃7］。本研究发现，肺鳞癌患者诊断初的血清ProGRP、CYFRA21⁃1水平可以辅助鉴别肺鳞癌与肺部良性病变，尤其特异度很高，且与患者肿瘤的TNM 分期、浸润程度和淋巴结转移等相关。ProGRP 为GRP 前体，是带有信号肽的蛋白质裂解产物，其结构稳定、半衰期长，可在血液中稳定存在，已成为早期诊断肺癌的新型标志物［8⁃9］。ProGRP 属肺癌自主生长因子，正常情况下，由人体脑组织、胃神经纤维及胎儿肺部分泌，但人体出现肺癌后，肺癌细胞可合成、分泌ProGRP，而ProGRP 又可促进肿瘤生长、转移和侵袭。以往报道［10］显示，ProGRP 在肺癌患者血清中高表达，动态观察ProGRP 水平对判断患者病情、评估预后有一定价值。CYFRA21⁃1为细胞角蛋白19 的可溶性片段，可构成细胞骨架丝状物，当细胞发生癌变后，机体会大量分泌CYFRA21⁃1，促进癌细胞增殖、转移［11］。本研究结果提示ProGRP、CYFRA21⁃1 表达上调可能参与肺鳞癌发生发生过程。ROC 曲线结果显示，ProGRP、CYFRA21⁃1 对肺鳞癌的诊断的AUC 分别为0.779、0.808，诊断的敏感度分别为55.9%、53.9%，特异度分别为92.1%、97.4%，提示ProGRP、CYFRA21⁃1 对肺鳞癌具有一定的诊断价值。该结果与王宇琛［12］等研究结果具有一致性，且其敏感度低可能与筛查的患者临床表现不明显及肿瘤较小有关。

另有报道［13］称，ProGRP、CYFRA21⁃1 水平与肺鳞癌病理分期、转移、浸润等病理特征关系密切。本研究将102 例肺鳞癌患者根据ProGRP、CYFRA21⁃1 水平分为高表达组和低表达组，分析结果显示ProGRP、CYFRA21⁃1 在TNM 期Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移、浸润程度T3～T4 患者中的高表达率高于Ⅰ～Ⅱ期、无淋巴结转移、浸润程度T1～T2 患者。这是因为ProGRP、CYFRA21⁃1 参与着肿瘤进展，例如ProGRP 由肺癌细胞分泌后，可通过旁分泌机制促进肿瘤组织生长，诱导肿瘤细胞转移、侵袭；CYFRA21⁃1 在正常组织及良性疾病中含量较低，而在肺癌组织中大量存在，水平与肿瘤恶性程度成正比，可促进肿瘤进展。报道［14⁃15］显示，高水平ProGRP、CYFRA21⁃1 提示肺癌处在进展期或预后不良。本研究对102 例患者随访至2020年12月31日，结果存活48 例，死亡54 例，生存率为47.06%（48/102），总生存时间为（31.92±12.67），并且ProGRP、CYFRA21⁃1 高表达总体生存率明显低于低表达患者，提示ProGRP、CYFRA21⁃1 水平可监测预后。李燕舞等［16］分析ProGRP、CYFRA21⁃1 在肺鳞癌中的表达水平与预后关系的报道中表示，ProGRP、CYFRA21⁃1 在肺鳞癌中表达水平升高，且与病理特征有关，可用于评估患者预后，与本研究结果类似。这是因为高水平ProGRP、CYFRA21⁃1 往往提示肿瘤病理分期较高，恶性程度较高，导致患者治疗后预后效果较差，从而生存率较低。

综上所述，检测血清ProGRP、CYFRA21⁃1 水平有助于鉴别肺鳞癌与肺部良性病变，当患者ProGRP、CYFRA21⁃1 水平升高时，诊断肺鳞癌更为可靠。肺鳞癌患者ProGRP、CYFRA21⁃1 高表达者存活率明显低于低表达者，预后较差。但本研究仍有一定限制，例如研究样本量较小，研究中心单一，未分析ProGRP、CYFRA21⁃1 在不同病理类型肺癌中的表达差异等，可能会对研究结果造成一定影响，后期可在此基础上进行验证性探究。