三种结核抗体联合检测对活动性肺结核的诊断价值

韩伟 崔俊伟 黄健 潘艳静 董伟 高盼盼

肺结核是由于结核杆菌感染导致的慢性传染性疾病，可累及全身各个系统，严重威胁人类健康。由于耐药菌的出现及扩展、获得性免疫缺陷综 合 征（Acquired immunodeficiency syndrome，HIV）以及肺结核控制规划不完善导致全球结核病呈现明显上升趋势［1］。在肺结核的防治过程中，早期发现并行规范的治疗十分重要。细菌学检查为目前诊断肺结核的金标准，但抗酸染色检查敏感性低，分离培养花费时间长。如何对肺结核快速准确诊断是目前临床研究热点，尤其对活动性肺结核诊断更是困难，寻找敏感性、特异性高，简便、快速的诊断方法是目前临床研究热点课题之一［2］。本文使用结核分枝杆菌免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）、免疫球蛋白M（Immuno⁃globulin GM，IgM）抗体及血清结核分支杆菌糖脂免疫球蛋白G（Mycobacterium tuberculosis glycolip⁃id immunoglobulin G，LAM⁃IgG）联合检测，分析其对活动性肺结核的诊断价值，旨在为临床诊疗提供参考依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年3月至2020年7月新乡医学院附属第一医院收治的活106 例动性肺结核患者作为观察组。其中男75 例，女31 例，平均年龄（52.11±6.47）岁。纳入标准：①符合《肺结核活动性判断规范及临床应用专家共识》中相关诊断标准［3］；②临床资料完整；③有咳嗽、消瘦、乏力等临床表现，X 线检查肺部有渗出性病变、干酪性病变并周边渗出性病变、空洞等情况。排除标准：①临床资料缺乏；②存在严重靶器官疾病者；③合并感染性疾病者。根据患者病情变化分期分为三个亚组［4］：进展期：出现新的活动性肺结核，可见病灶增大、增多，有空洞或空洞变大，痰菌检查转（+），临床症状进展）28 例；好转期（病灶消失好转，空调缩小或消失，痰菌（-），临床症状改善）41 例；稳定期［空洞消失、痰菌（-）持续6 个月以上；空洞存在但痰菌转（-）1年以上］37 例。选取101 例同期住院治疗非活动性肺结核患者为对照组，其中男71 例，女30 例，平均年龄（52.26±6.10）岁，疾病类型：支气管炎、肺炎等。选择同期99 例健康体检人群作为健康组，其中男68 例，女31 例，平均年龄（51.87±6.59）岁，入选者身体健康，无肺结核感染。三组人员一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准通过，受试者或家属均签署知情同意书。

1.2 方法

1.2.1 结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体检测

使用胶体金法进行检测，试剂盒均为北京建乃喜生物技术有限公司提供，检测步骤严格遵循试剂所配套说明书进行。

1.2.2 LAM⁃IgG 检测

采取受试者静脉血液1 mL，将血液离心后获取上清液，检测用试剂包括脂阿拉伯甘露糖抗原和胶体金标本抗人IgG 单克隆抗体探针，对照试剂为美国DynaGeN 公司所提供的结核快捷诊断试剂盒。所有操作均严格按照试剂所配套说明书进行操作。

1.2.3 痰培养

MGIT 960 培养操作按《结核病诊断实验室检验规程》［4］进行。将标本经过NALC⁃4%NaOH 处理后，静置15 min，然后加入0.067 mol/L pH 6.8的磷酸盐缓冲液（PBS）行3 000 r/min 低温离心15 min 弃上清，将所得菌悬液加入到BACTEC MGIT 960 培养管中进行培养，孵育42 d，实时监测并读取结果。

1.2.4 X 线检查所有患者均进行X 线检查，检查仪器为日本东芝10B⁃500 m A，了解患者肺部病灶情况。

1.3 观察指标

比较各组结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况，并计算结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体、LAM⁃IgG 单独以及联合检测对活动性肺结核的诊断敏感度（真阳性数/（真阳性数+假阴性数）×100%）、特异度（真阴性数/（真阴性数+假阳性数）×100%）、阳性预测值（真阳性数/（真阳性数+假阳性数）×100%）、阴性预测值（真阴性数/（真阴性数+假阴性数）×100%）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件进行统计分析，计量资料采用（±s）描述，使用t检验；计数资料采用n（%）表示，采用χ2检验；以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG表达情况

各组结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG阳性表达情况：观察组>对照组>健康组，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 各组结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况［n（%）］Table 1 expression of Mycobacterium tuberculosis IgG，IgM antibody and Lam IgG in different populations［n（%）］

2.2 不同临床分期活动性肺结核患者结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况

肺结核患者结核分枝杆菌不同时期IgG、IgM抗体、LAM⁃IgG 阳性表达情况：进展期>好转期>稳定期，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 不同临床分期活动性肺结核患者结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况［n（%）］Table 2 expression of Mycobacterium tuberculosis IgG，IgM antibody and Lam IgG in patients with active pulmonary tuberculosis at different clinical stages［n（%）］

2.3 不同病变范围活动性肺结核患者结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况

病灶≥3 肺野患者结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 阳性表达率均明显高于病灶<3 肺野患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

表3 不同病变范围活动性肺结核患者结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 表达情况［n（%）］Table 3 expression of Mycobacterium tuberculosis IgG，IgM antibody and Lam IgG in patients with active pulmonary tuberculosis in different lesion areas［n（%）］

2.4 结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体、LAM⁃IgG 单独以及联合检测对活动性肺结核的诊断效能比较

以痰培养检查作为金标准，106 例患者痰培养阳性率为37.74（40/106）。联合诊断活动性肺结核效能明显高于三者单独检测（P<0.05）。见表4。

表4 结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体、LAM⁃IgG 单独以及联合检测对活动性肺结核的诊断效能比较Table 4 Comparison of the diagnostic efficacy of Mycobacterium tuberculosis IgG，IgM antibody，Lam IgG alone and combined detection for active pulmonary tuberculosis

3 讨论

临床中诊断肺结核标准为痰标本检测，此检测特异性高，但是漏诊率较高，且所需时间长，难以做到快速诊断，如果患者无痰、痰涂片阴性，此检测方法更难以做出准确判断［5］。

肺结核与人体的免疫机制存在着密切的联系。相关研究显示，肺结核杆菌再次对机体造成侵犯时，体内的B 淋巴细胞可产生IgG、IgM 类免疫球蛋白，并使其发生变化，且在患者痊愈之后的一年左右时间IgG、IgM 等免疫球蛋白仍会呈现阳性，在临床中可通过检测免疫球蛋白来了解患者结核感染情况［6］。有文献研究显示，IgG、IgM 在肺结核患者中检出率与机体的免疫情况、疾病程度存在密切的联系［7］。病程越长、病情越严重者越易出现免疫应答，IgG、IgM 表达会明显增加。免疫水平高的患者中其免疫应答程度也高，阳性率也增加，反之，阳性率较低［8］。

LAM 蛋白抗体属于结核杆菌特异性糖脂，也是特异性的非蛋白结合杆菌抗原，在结核杆菌表面糖脂结构中广泛存在，控制机体免疫系统对结合杆菌的免疫调节情况［9⁃10］。有研究显示，LAM 蛋白对巨噬细胞有抑制作用，可抑制巨噬细胞对结核杆菌的杀伤作用，且抗原性高，能刺激患者机体产生抗体，是临床检查中特异性较高的分子［11⁃13］。在机体出现结核杆菌感染时会刺激机体产生LAM⁃IgG 抗体。Moure 等人［12］研究发现，LAM⁃IgG 可能与结核发病有着重要的联系，为重要的致病因子。

本研究中，不同人群IgG、IgM、LAM⁃IgG 阳性表达率比较可发现，结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 阳性表达情况为：观察组>对照组>健康组，提示三种因子可为活动性肺结核临床诊断提供参考，对活动性肺结核与非活动性肺结核有鉴别价值［14］。在不同临床分期活动性肺结核患者中，进展期IgG、IgM、LAM⁃IgG 阳性表达率明显高于稳定期和好转期，病灶范围超过3 肺野者IgG、IgM、LAM⁃IgG 检出阳性率也高于病灶范围低于3 肺野者，与以往文献研究结果相符，说明检测IgG、IgM、LAM⁃IgG 表达情况对患者病情评估有较大应用价值［15⁃16］。经痰培养检查可知106 例患者中阳性率为37.74（40/106），以此为基准，发现IgG、IgM、LAM⁃IgG三者联合检测敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为92.50%、98.46%、94.87%、95.52%，提示三者联合诊断活动性肺结核诊断效能高，可有效提高诊断敏感度、特异度，与以往文献研究结果相符［17⁃18］。

综上所述，结核分枝杆菌IgG、IgM 抗体及LAM⁃IgG 联合检测可提高对活动性肺结核诊断效能，其阳性表达率与患者病情严重程度密切相关，临床中可通过监测三种因子变化情况，对活动性肺结核患者病情进行监测以评估患者病情。