肿瘤标志物TAP、CEA、CA19-9检测在食管癌诊断中的应用价值

张 喆，汪 阔

空军军医大学第二附属医院唐都医院检验科，陕西西安 710038

食管癌是临床常见的消化道恶性肿瘤之一，病死率极高，位居第4，发病年龄多大于40岁，男性多于女性，且近年来发病率呈上升趋势，对人类健康构成了严重的威胁[1-2]。临床上，食管癌患者多采用食管镜、内窥镜、组织病理学检查等发现，但有操作复杂、检测时间长、灵敏度低等缺点，给临床诊疗工作和患者造成诸多不便[3]。血清肿瘤标志物具有简便、经济、易行、创伤小等特点，成为辅助诊断肿瘤的主要手段[4-5]。因此，寻找灵敏度高、特异性好的肿瘤标志物成为近年来食管癌研究的热点。本文主要探讨异常糖链糖蛋白(TAP)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)3种肿瘤标志物在食管癌诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2020年8月至2021年4月在本院就诊的食管癌患者60例作为食管癌组，均经CT检查或穿刺活检、组织病理学检查确诊为食管癌，其中男50例，女10例，年龄(63.75±6.55)岁。排除标准：(1)哺乳期或妊娠期女性；(2)合并肝、肾、颅脑、心脏等器官病变者；(3)合并食管病变以外的其他脏器炎症、自身免疫性疾病、传染性疾病患者；(4)应用生物素制剂治疗者。另选取同期在本院临床诊断为食管良性肿瘤患者60例作为食管良性肿瘤组，其中男47例，女13例，年龄(62.12±8.43)岁；体检健康者60例作为健康对照组，其中男30例，女30例，年龄(57.46±5.43)岁。食管良性肿瘤组及健康对照组均经体检、影像学检查、胸部X光透视排除其他恶性肿瘤。本研究符合医学伦理学规定。3组年龄、性别等一般资料比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2仪器与试剂 TAP检测使用浙江瑞生TAP集成阅片仪、肿瘤异常蛋白检测系统图像分析仪或生物显微镜，试剂为异常糖链糖蛋白检测试剂盒(凝集法)，由凝聚素分散蓝CR-E、蒸馏水、氢氧化钠组成，购自浙江瑞生医疗科技有限公司；血清CEA、CA19-9检测使用德国罗氏Cobas e 602型全自动电化学发光免疫分析仪，检测试剂为肿瘤抗原定量测定试剂盒，主要组成成分包括M(包被链霉亲和素的磁珠微粒)、R1(生物素化的抗癌胚抗原抗体)、R2(钌标记的抗癌胚抗原抗体)，肿瘤抗原定量测定试剂盒、校准品、质控品均购自罗氏诊断产品(上海)有限公司。

1.3方法

1.3.1标本采集 采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管及含有分离胶的促凝管采集3组研究对象清晨空腹静脉血，各1管。EDTA-K2抗凝管采血2 mL，用于TAP检测，促凝管采血3～4 mL，3 000 r/min离心10 min后分离血清，用于肿瘤标志物CEA、CA19-9检测。所有标本无溶血、脂血、凝血、黄疸现象，2 h内完成检测。

1.3.2检测方法 TAP检测方法为凝集法。取静脉抗凝全血25 μL，在载玻片上推制薄厚均匀的血片，共2张，静置待干。血片干燥后，在2张血涂片分别均匀垂直滴下摇匀后的TAP检测试剂3滴(每滴约50 μL)，形成3个圆形斑点，平放静置1.5～2.0 h。质控品选取前1天任意2例患者标本，偏倚控制在10%以内。TAP的凝聚物面积≥125 μm2为阳性，晶体颗粒呈深褐色浅黄色或浅绿色，为边缘不整的圆形、卵圆形或多边形，中间有屈光性，四周较深呈棕黑色或墨绿色；凝聚物面积≥225 μm2为强阳性，凝聚物面积较大；凝聚物面积<125 μm2为阴性，无上述颗粒检出。血清CEA、CA19-9检测方法为电化学发光法，每天应进行质控或每次定标后进行质控，检测高、中、低3个检测值，各值应在正常参考范围内。血清CEA正常参考范围为0～5 ng/mL，血清CA19-9正常参考范围为0～27 U/mL，高于正常参考范围为阳性。

2 结 果

2.13组TAP的凝聚物面积及CEA、CA19-9水平比较 食管癌组TAP的凝聚物面积及CEA、CA19-9水平高于食管良性肿瘤组和健康对照组，食管良性肿瘤组TAP的凝聚物面积及CEA、CA19-9水平高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组TAP的凝聚物面积及CEA、CA19-9水平比较[M(P25，P75)]

2.23组TAP、CEA、CA19-9单独及联合检测的阳性率比较 食管癌组TAP、CEA、CA19-9单独及3项联合检测的阳性率高于食管良性肿瘤组和健康对照组，食管良性肿瘤组高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 3组TAP、CEA、CA19-9单独及联合检测的阳性率比较(%)

2.33项指标单独及联合检测食管癌的灵敏度、特异度 TAP、CEA、CA19-9 3项联合检测食管癌的灵敏度为85.00%，特异度为75.00%，约登指数高于单项指标检测，见表3。

表3 3项指标单独及联合检测食管癌的灵敏度、特异度、约登指数(%)

3 讨 论

2015年国家癌症中心统计发现，我国食管癌的发病人数约为477 900例，发病人数占全部恶性肿瘤的11.1%，死亡人数估计为375 000例，死亡人数占全部恶性肿瘤的13.3%[6]。据调查研究显示，食管癌的高发与多种因素有关，如饮食习惯、肿瘤家族史、经济状况、生活节奏的加快和环境的恶化[7-8]。

TAP又称肿瘤异常蛋白，是肿瘤细胞在新陈代谢过程中释放的糖蛋白和钙-组蛋白复合物[9]。本研究结果显示，食管癌组TAP的阳性率高于对照组，与文献报道一致[10]，提示TAP是检测食管癌的一个较好的指标。TAP是细胞中的癌基因、抑癌基因等发生基因突变后所表达的产物，在食管癌发生、发展的过程中分泌增多，到达一定水平后，向血液中排放，并较多地存在于外周血[11]。本研究结果发现，TAP检测食管癌的灵敏度为75.00%，特异度为76.67%，TAP单项检测的灵敏度高于血清CEA、CA19-9单项检测。CEA是一种复杂的可溶性糖蛋白，主要存在于成人肿瘤细胞及胎儿的胃肠道中。在成人消化道肿瘤中，肿瘤细胞会重新表达CEA，并释放入血[12]。有研究显示，CEA是提示食管癌疾病的最早指标，与食管癌的发生、发展密切相关[13]。本研究结果显示，CEA单独检测食管癌的诊断特异度(83.33%)较好，但阳性率(45.00%)较低，漏诊率较高。所以CEA单项检测临床意义不大，通常采用多项指标联合检测。CA19-9是一种黏蛋白型的糖类肿瘤相关抗原。据文献报道，CA19-9可作为食管癌发生的首选标志物，在食管癌中的阳性率为20%～50%，特异度为70%～90%[14]。本研究结果显示，CA19-9的阳性率为51.67%，特异度为80.00%，与文献[14]研究结果一致。

本研究结果显示，TAP、CEA、CA19-9联合检测的灵敏度高于任一单项检测，提示单项检测肿瘤标志物对食管癌的诊断具有一定的局限性，所以临床上应建立有效的多参数、多指标联合检测以提高对食管癌的灵敏度。有文献报道，CEA、CA19-9联合检测食管癌的灵敏度为53.33%，CA19-9、CEA、糖类抗原125(CA125)联合检测灵敏度为41.20%[15-16]。本研究发现，TAP、CEA、CA19-9联合检测的灵敏度达到了85.00%。这是由于TAP运用多级偶联技术，用数十种凝集素，一次性组合检测20多种异常糖链结构[17-18]，提高了检测的灵敏度和准确性，所以TAP在食管癌的筛查和检测中起到了很好的辅助作用，在食管癌的发生、发展、转移及预后等方面有一定的临床应用价值。

综上所述，肿瘤标志物TAP、CEA、CA19-9联合检测对食管癌的诊断具有重要的价值，而对于其他消化道肿瘤的诊断有待进一步研究。