2020年青岛市医用口罩质量评价

牛萌萌 姬俊 王立云 王尊文

1 青岛市食品药品检验研究院，国家药监局海洋中药质量研究与评价重点实验室 （山东 青岛 266071）

2 青岛市妇女儿童医院 （山东 青岛 266034）

内容提要：目的：评价2020年青岛市生产的医用口罩的过滤效率和微生物指标。方法：对37批次三种类型的医用口罩分别按照现行标准GB19083-2010《医用防护口罩技术要求》、YY 0469-2011《医用外科口罩》、YY/T 0969-2013《一次性使用医用口罩》进行检测。结果：所检批次口罩中，有两批次的微生物指标不符合规定，所有批次的过滤效率均符合规定。结论：2020年青岛市生产的37批次三类医用口罩微生物指标的合格率为95%，过滤效率合格率为100%。

新型冠状病毒肺炎肆意全球，传播范围之广，感染人数之多，造成了全球性流行。其传播的主要途径为呼吸道飞沫传播和密切接触传播，为阻断传播途径，佩戴口罩是预防呼吸道传播疾病的重要方法之一。国家卫生健康委发布的《预防新型冠状病毒感染的肺炎口罩使用指南》建议使用的主要口罩类型为医用防护性口罩、医用外科口罩及一次性使用医用口罩，在正确佩戴的前提下能对病毒进行有效防护，降低新型冠状病毒感染的风险[1]。口罩的防护性能主要取决于颗粒过滤效率和细菌过滤效率，而微生物指标则与口罩的卫生和安全性能息息相关[2]。因此，考察口罩的颗粒过滤效率、细菌过滤效率以及微生物指标对于评价口罩质量有着重要意义。本文通过对2020年青岛市生产的37批次三类医用口罩进行过滤效率和微生物指标的检测并对检测结果进行评价，进一步了解青岛市生产的医用口罩质量，为打好疫情防控阻击战提供数据支持和技术保障。

1.材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 口罩

医用防护口罩共计6批，产自四个不同企业，包装上均无灭菌或无菌字样。

医用外科口罩共计8批，产自五个不同企业，4批次包装上有灭菌或无菌字样。

一次性使用医用口罩共计23批，产自九个不同企业，包装上均无灭菌或无菌字样。所有的口罩样品均产自青岛市的生产企业。根据口罩种类分别按照现行标准GB 19083-2010《医用防护口罩技术要求》、YY 0469-2011《医用外科口罩》、YY/T 0969-2013《一次性使用医用口罩》进行相应项目的检测，见表1。

表1.各类口罩检测依据的标准和检验项目

1.1.2 仪器

口罩细菌过滤效率（BFE）检测仪（ZR-1000型，青岛众瑞）、口罩颗粒物过滤效率及气流阻力测试仪（ZR-1006型，青岛众瑞）、恒温恒湿箱（KMF240，宾德）、电热恒温培养箱（INE500，德国MEMMERT）、隔水式培养箱（GNP-9160E，上海三发）、无菌集菌仪（HTY-603，泰林）、全自动微生物生化分析仪（VITEK 2 Compact，梅里埃）、显微镜（SCOPE A1，ZIESS）等。

1.1.3 培养基和菌种

pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号：20200307，海博）、胰酪大豆胨琼脂培养基（批号：20190715，日水）、硫乙醇酸盐流体培养基（批号：20191203，海博）、胰酪大豆胨液体培养基（批号：20200317，海博）、营养琼脂（批号：20191228，海博）、乳糖胆盐发酵培养基（批号：20171025，海博）、SCDLP液体培养基（批号：190806，陆桥）、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基（批号：20180402，海博）、血琼脂培养基（批号：20200217，海博）、葡萄糖肉汤（批号：20200313，海博）、沙氏培养基（批号：20200220，海博）、沙氏琼脂培养基（批号：20191219，海博）、VITEK革兰氏阳性鉴定卡（批号：2421354203，梅里埃）。

金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]、大肠埃希菌[CMCC（B）44 102]、乙型溶血性链球菌[ATCC 21059]、铜绿假单胞菌[CMCC（B）10 104]。标准菌株均购于中检院，零代干粉经活化制备成标准工作菌株，采用十倍稀释法。其中金黄色葡萄球菌按照2015版《中国药典》通则1105规定的制备新鲜培养物，以1.5%无菌蛋白胨溶液稀释，制成含量为5.0×105CFU/mL的菌悬液。

1.2 方法

1.2.1 无菌

取样品10个，按照无菌操作将每个口罩平分，取一份分别投入至100mL的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基中，根据《中国药典》2015年版通则1101无菌检查法中要求进行无菌试验。

1.2.2 微生物指标

供试液制备：用无菌的方法打开用于检测的3个包装，从每个包装中取样，将口罩剪碎后准确称取10g样品，加入到200mL灭菌生理盐水中，充分混匀，作为样液。

细菌菌落总数检测：待样液自然沉降后取上清液作菌落计数，每个平皿加入1mL样液，共接种5个平皿，置于36°C培养48h后计数，再根据公式计算样品的细菌菌落总数。

大肠菌群检测：取样液5mL接种至50mL的乳糖胆盐发酵管中，置于36°C培养24h，如不产酸产气则报告阴性；如产酸产气，划线接种至伊红美蓝平板上，置于36°C培养24h，若有可疑菌落，进行镜检并同时接种乳糖发酵管。

绿脓杆菌检测：取样液5mL接种至50mL的SCDLP培养基中，置于36°C培养24h，从培养基中挑取培养物划线接种十六烷三甲基溴化铵平板上，置于36°C培养24h后，观察菌落特征，若有可疑菌落，则挑取可疑菌落进行镜检、氧化酶试验、绿脓菌素试验、硝酸盐还原产气试验、明胶液化试验以及42°C生长试验。

金黄色葡萄球菌检测：取样液5mL接种至50mL的SCDLP培养基中，置于36°C培养24h，从培养基中挑取培养物划线接种血平板上，置于36°C培养48h后，挑取典型菌落进行镜检、甘露醇发酵试验、血浆凝固酶试验。

溶血性链球菌检测：取样液5mL接种至50mL的葡萄糖肉汤中，置于36°C培养24h，从培养基中挑取培养物划线接种血平板上，置于36°C培养24h后，挑取典型菌落进行镜检、链激酶试验、杆菌肽敏感试验。

真菌菌落总数检测：待样液自然沉降后取上清液作真菌计数，每个平皿加入1mL样液，共接种5个平皿，置于24°C培养7d后计数，再根据公式计算样品的真菌菌落总数。

真菌定性检测：取样液5mL接种至50mL的沙氏培养基中，置于24°C培养7d，每天观察是否有真菌生长，若培养管混浊则划线至沙氏琼脂培养基上培养，证实是否有真菌生长[3]。

1.2.3 细菌过滤效率（BFE）

每批取3个样品进行试验，将样品放置在温度21°C、相对湿度为85%的恒温恒湿箱中预处理至少4h后再进行试验。

BFE试验系统中先不放入样品，在通过采样器的气体流速为28.3L/min的状态下，向喷雾器输送细菌悬液的时间设定为1min，空气压力和采样器运行时间设定为2min，开启仪器，使细菌气溶胶收集到胰酪大豆胨琼脂培养基平板上，作为阳性质控值，以此值计算气溶胶流速，应为（2200±500）CFU。取样品，分别加在采样器上端，被测面向上，按照上述程序进行采样。采样后，将胰酪大豆胨琼脂培养基平板在36°C培养48h后计数，使用转换表将菌落数转换为校正后的颗粒计数值，用公式计算出样品的细菌过滤效率值[4]。

1.2.4 颗粒过滤效率（PFE）

每批取3个样品进行试验，将样品放置在温度38°C、相对湿度为85%的恒温恒湿箱中预处理25h，试验在预处理结束10h后完成。测试过程中气体流量稳定至30L/min，气体通过的截面积为100cm2，试验用氯化钠气溶胶颗粒大小分布应为粒数中值直径（0.075±0.020）μm，几何标准差不超过1.86，浓度不超过200mg/m3。

2.结果

2.1 医用防护口罩检测结果

根据GB 19083-2010《医用防护口罩技术要求》对6批医用防护口罩样品进行微生物指标的检测。在试验过程中，由于医用防护口罩材质较厚且不易吸水，在制备供试液时需充分震荡和混匀，使样品充分接触到稀释液，增加检出概率，提高试验的准确性。6批次结果均符合规定。

2.2 医用外科口罩检测结果

根据YY 0469-2011《医用外科口罩》，对包装上有灭菌或无菌字样的4批样品进行无菌检测，其余4批样品进行微生物指标的检测，8批次均进行细菌过滤效率和颗粒过滤效率的检测，结果见表2。

表2.医用外科口罩检测结果

2.3 一次性使用医用口罩检测结果

根据YY/T 0969-2013《一次性使用医用口罩》对23批样品进行微生物指标和细菌过滤效率的检测。23批次的细菌过滤效率结果均在95%以上。其中J厂家2批次口罩在金黄色葡萄球菌检测中发现疑似菌株，经革兰氏染色和VITEK 2全自动微生物生化分析仪鉴定为表皮葡萄球菌和沃氏葡萄球菌，为葡萄球菌属，主要存在于人类的皮肤、鼻腔等，正常情况下为非致病性的葡萄球菌。N厂家1批次口罩在溶血性链球菌检测中，发现疑似菌落，经革兰氏染色和VITEK 2全自动微生物生化分析仪鉴定为枯草芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌。N厂家2批次口罩在真菌检测中，发现沙氏琼脂平皿上均有真菌生长，结果不符合规定。同一厂家2批次口罩检测出真菌，这2批生产批号相近，其他批号未检出真菌，可能在该段时期存在真菌污染。

3.讨论

医用口罩的过滤效率和微生物指标是影响口罩质量的重要因素和关键指标，GB 19083-2010《医用防护口罩技术要求》、YY 0469-2011《医用外科口罩》、YY/T 0969-2013《一次性使用医用口罩》有明确规定，在口罩检测时应严格按照标准，区分口罩的类型、是否灭菌，确定检测项目和方法。

试验样品中的无菌医用外科口罩检测结果均为无菌，在其生产工艺中使用环氧乙烷灭菌，能达到较好的灭菌效果，不同于辐照灭菌，环氧乙烷灭菌不会大幅降低口罩的颗粒过滤效率[5]。

口罩的过滤效率是体现口罩对细菌、颗粒、飞沫等的隔离阻挡作用，是体现口罩质量的重要指标。有研究表明，医用外科口罩的细菌过滤效率与颗粒过滤效率的结果数值呈正相关，当颗粒过滤效率达到86%以上时，细菌过滤效率可达到98%以上，8批医用外科口罩样品的细菌过滤效率与颗粒过滤效率均达到95%以上，与该结论一致[6,7]。细菌过滤效率与颗粒过滤效率检测的原理和目的比较相似，但细菌过滤效率所需周期较长。所以可以考虑在疫情期间如果出现医用外科口罩短缺时，采用检测周期较短的颗粒过滤效率代替细菌过滤效率检测，但是根据本文的检测结果，现行标准中颗粒过滤效率限度值较低（30%），采用指标替代时应提高限度。根据颗粒过滤效率放行的产品还要对同批次产品进行细菌过滤效率检测，一旦出现检测不合格的情况要立即召回放行产品。

佩戴口罩时，局部的温暖潮湿为微生物生长提供的适宜的微环境，若口罩微生物污染，则会失去口罩的防护目的，因此考察医用口罩的微生物指标有非常重要的安全意义[8]。由于疫情造成对非无菌医用口罩的需求大增，有些非口罩生产企业也转产口罩生产，对这些企业产品的安全性应给予重视，从本文中2批微生物指标不合格产品均来自服装转型企业能说明一定问题。

在2020年青岛市生产的37批次三类医用口罩中，微生物指标的合格率为95%，过滤效率合格率为100%，总体情况较好。但是在口罩生产中，应重视口罩的微生物指标，对于跨行转产生产医用口罩的生产企业来说，更需要加强人员卫生和无菌意识，增加微生物知识的培训，确保医用口罩的卫生质量和使用的安全性，从而提高口罩的整体质量。