水盐代谢相关激素在梅尼埃病发病中的作用

陈姿 郭明丽 屈永涛

梅尼埃病(meniere’s disease, MD)临床表现为反复发作的眩晕、波动性感音神经性听力下降和耳鸣等，发病率为10/10万～157/10万[1]。MD病因不明，主要病理变化为膜迷路积水，发病机制未明确，研究显示，水盐代谢相关激素与内淋巴液生成、吸收平衡有关，激素失衡、离子转运通道蛋白功能障碍或缺陷，可能导致内淋巴积水[2-5]。本研究检测MD患者外周血抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)、醛固酮(aldosterone,ALD)、糖皮质激素(glucocorticoid,GC)水平，探讨ADH、ALD、GC在内淋巴稳态中可能的作用机制。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年5～12月在河北省人民医院耳鼻咽喉科门诊及病房诊断为MD患者47例为试验组，同期不伴有耳、鼻疾病史的健康志愿者、耳鼻咽喉科门诊和住院患者19例为对照组。试验组47例，其中男19例，女28例；年龄24～77岁，平均年龄(54.39±12.39)岁。对照组19例，其中男12例，女7例;平均年龄(49.1±13.18)岁。2组年龄、性别比差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 纳入与排除标准 (1)试验组均符合《梅尼埃病诊断和治疗指南(2017)》诊断标准[1]；(2)1个月内未使用过糖皮质激素、镇静药物；(3) 2周内无急性感染；(4)无重大疾病史，患有慢性病者(如糖尿病、高血压等)病情控制稳定；(5)无内分泌系统代谢障碍性疾病(如抗利尿激素分泌失调综合征、库欣综合征、多发性内分泌腺瘤病等)。

1.3 方法 试验组发作期标本于眩晕发作后48 h内采血，间歇期标本于末次发作症状缓解4周以后采血。受试者均采用促凝真空采血管抽取晨起空腹外周血5 ml。标本于室温放置2～4 h，待其自然凝固后放置于离心机中，转速为 3 600 r/min，离心10 min后收集血清2 ml，置于EP管内，对EP管编号，登记编号信息后将血清置于-80℃冰箱保存，采用酶联免疫吸附法测定血清中ALD、ADH、GC的水平，对样本的处理、实验步骤及最终浓度的计算，均严格按照使用说明书进行操作。

2 结果

2.1 2组血清中ADH、ALD、GC水平比较 试验组血清中ADH和ALD水平均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；试验组血清中GC水平略低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组血清中ADH、ALD、GC水平比较

2.2 试验组发作期与对照组血清中ADH、ALD、GC水平比较 试验组发作期血清中ADH、ALD水平均高于对照组(P<0.05)；血清中GC水平略低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 试验组发作期与对照组血清中ADH、ALD、GC水平比较

2.3 试验组发作期与间歇期血清中ADH、ALD、GC水平比较 试验组发作期血清中ADH和ALD水平略高于间歇期，但差异无统计学意义(P>0.05)；间歇期血清中GC水平高于发作期(P<0.05)。见表4。

表3 试验组发作期与间歇期ADH、ALD、GC水平比较

3 讨论

MD是耳科常见病[6]，1938年Hallpike等[7]第一次提出了MD以膜迷路积水为主要病理基础，但膜迷路积水的机制至今尚不明确，学者关注到水盐代谢相关激素与MD的发生可能有关，本研究观察受试者血清中ADH、ALD和GC的水平并分别讨论。

3.1 ADH与MD：ADH又称血管加压素(vasopressin，VP)，由下丘脑视上核和视旁核的神经内分泌细胞合成，通过与血管加压素1受体(vasopressin 1 receptor，V1R)、血管加压素2受体(vasopressin 2 receptor，V2R)结合发挥作用，其中V2R与水盐代谢有关[8，9]。

内耳存在ADH受体以及水通道蛋白[10]，且MD患者内淋巴囊中AQP2 mRNA表达明显高于对照组，V2R和AQP2 mRNA 表达水平显著正相关[11]。本研究结果显示，试验组、试验组发作期血清中ADH水平均高于对照组(P<0.05)。Kitahara等[9]报道MD患者内淋巴囊V2RmRNA表达上调，使细胞膜内的AQP2无法向细胞质转移，细胞膜表面存有大量AQP2，ADH升高即可导致膜迷路积水。其他学者也认为，ADH引起血管纹中AQP2 mRNA表达上调，增加水从外淋巴进入到血管纹，再增加水向内淋巴的渗透，导致内淋巴产生增加[12,13]。除上述通路外，ADH还可作用于内淋巴囊中上皮钠通道，上调其功能，导致膜迷路积水[14]。本研究结果中，试验组发作期ADH水平高于对照组，推测可能原因ADH水平升高是MD患者症状发作的原因之一。

3.2 ALD与MD的关系： ALD由肾上腺皮质球状带分泌，为盐皮质激代表。盐皮质激素的主要生理作用是促进肾小管重吸收钠而保留水，并排泄钾。

ALD可通增强ENaC表达，ENaC在豚鼠耳蜗中表达部位包括血管纹、螺旋韧带、前庭膜、螺旋神经节、螺旋器及螺旋缘等[15]，加速Na+泵出细胞、K+泵入细胞，导致细胞内与小管液之间的K+浓度差变大，促进K+的分泌[16，17]。ALD还可通过增加ENaC表达来增加 Na+运输，增加水吸收，导致内淋巴液量增加[18]。Qin等[19]将ALD注射至豚鼠腹腔内，可以引起内耳膜迷路积水，说明体内ALD含量升高可导致MD同样的内耳病理变化，也就有可能导致MD同样临床症状。

本研究结果显示，试验组、试验组发作期血清中，ALD水平均高于对照组(P<0.05)。推测MD患者ALD基础水平即高于对照组，当某种因素导致体内ALD浓度升高，ENaC表达增强，增加了Na+运输，同时造成了膜迷路积水。

研究表明，ADH、ALD的分泌又受AngⅡ的调节,AngⅡ不仅可促进神经垂体释放ADH，还可以合成和分泌ALD，血液中ADH、ALD水平增高后会导致MD的发作[20]。当MD患者因生活习惯、情绪问题导致血液中AngⅡ含量升高，可刺激下丘脑ADH基因表达和垂体释放ADH[21]。AngⅡ还可以经过血管紧张素酶A生成AngⅢ[22]，AngⅡ和AngⅢ均可刺激肾上腺皮质球状带合成和分泌ALD[23]，使Na+和水的重吸收增强，最终导致MD患者的病情发作[24]。AngⅡ可以调节ADH、ALD的分泌，后者可以通过多种机制作用于内耳，调节内耳膜迷路水盐代谢，当各种原因导致二者体内水平升高，使得内耳膜迷路水盐代谢异常，导致MD患者出现膜迷路积水，并表现出相应的临床症状，本试验结果与上述推测相符。

3.3 GC与MD的关系 GC由肾上腺皮质束状带分泌，其中90%为皮质醇，10%为皮质酮[8]。GC在人体中的主要作用是参加糖代谢、蛋白质纸代谢、脂肪代谢、水和电解质代谢[25]。试验组发作期血清中GC水平略低于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)；试验组间歇期GC水平高于发作期(P<0.05)。

研究发现，内耳组织中存在糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor，GR)[26]。Echisen等[27]对Na+，K+-ATPase在内耳的分布以及GC对Na+，K+-ATPase的调节作用研究显示，利用免疫组织化学(immunofluorescence，IHC)发现小鼠内耳存在Na+，K+-ATPase，同时发现在小鼠生长发育过程中，GR表达的时间和量与Na+，K+-ATPase的表达有一致性，作者推测GC可能通过调节Na+，K+-ATPase表达的方式来调节内耳电解质平衡。

GC还通过调控AQP实现对内耳水代谢的调节。Nevoux等[28]进一步研究，发现AQP3在内耳将水运输到内淋巴液中，证实地塞米松对AQP3表达和水流量的调节有关。Nevoux等[28]也观察到AQP3在人和小鼠内耳中分布并高度表达，发现地塞米松对小鼠的前庭细胞的AQP3的表达具有刺激作用，证实地塞米松可以刺激内耳中内淋巴液的再吸收。这一结果对维持内淋巴稳态有重要意义。

目前临床上MD治疗中应用的GC类药物主要有地塞米松、甲泼尼龙琥珀酸钠等，其可与内耳中GR结合，可能通过调节内耳Na+、K+-ATPase、AQP3活性，实现对内耳电解质和水代谢的调控，另外，GC还可有效阻止异常免疫反应、抑制炎性介质释放、降低炎性反应，从而减轻膜迷路积水，缓解MD患者临床症状。

综上所述，MD发作期血清中GC水平低于间歇期(P<0.05)。试验组与对照组、MD发作期与对照组，差异无统计学意义(P>0.05)。说明MD间歇期受试者体内GC的水平升高，这可能是促进MD患者临床症状缓解的因素之一，这一结果为临床应用GC治疗MD提供了理论依据。