宫颈高危型人乳头瘤病毒持续感染与阴道微生态的相关性研究

谢 聪，魏 艳，冯 丹，罗剑儒，胡 茜

（电子科技大学医学院附属妇女儿童医院·成都市妇女儿童中心医院妇科，四川 成都 610091）

宫颈高危型人乳头瘤病毒（HR-HPV）持续感染是导致宫颈癌前病变和宫颈癌的重要危险因素，但临床实践显示，部分出现宫颈上皮内瘤样病变但未使用药物进行治疗的HR-HPV持续感染者随着时间进展会出现病毒清除且病情逐渐转归的情况，最终并未罹患宫颈癌[1]。正常状态下，阴道菌群的需氧菌与厌氧菌比例为1∶5，合理的比例能够发挥阴道自净功能，对维持阴道菌群生态平衡起到关键作用[2]。细菌性阴道病与HR-HPV相关，因此推测HR-HPV感染可能与机体阴道菌群生态平衡存在一定的相关性，鉴于此开展本研究，旨在为降低女性宫颈癌发生风险、保障女性生殖健康提供新的思路和治疗方法，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年5月至2019年7月于电子科技大学医学院附属妇女儿童医院·成都市妇女儿童中心医院进行检查的200例HR-HPV持续感染者作为研究组，另选取同期就诊的200例HR-HPV一过性感染者作为对照组，开展前瞻性研究。对照组患者年龄25～68岁，平均（47.38±5.69）岁；生育史：未育102例，已育98例；产次0～3次，平均（1.85±0.46）次；体质量指数（BMI）17～27 kg/m2，平均（23.47±3.10） kg/m2。研究组患者年龄23～65 岁，平均（46.97±5.40）岁；生育史：未育107例，已育93例；产次0～3次，平均（1.79±0.63）次；BMI 16～27 kg/m2，平均（22.98±3.42） kg/m2。对比两组患者一般资料，差异无统计学意义（P＞0.05），组间可进行对比分析。纳入标准：符合《妇产科学》[3]中的相关诊断标准，且均经宫颈脱落细胞HPV分型检测确诊者；检查前1周无性生活史、无外用或口服阴道抗菌药物史者等。排除标准：检查前1个月内有人流史者；处于妊娠期或哺乳期的女性；精神异常无法配合取样者等。本研究经院内医学伦理委员会审核批准，患者均签署知情同意书。

1.2 检查方法 ①HPV检测：使用专用取样器具刷取宫颈管和宫颈外口周围脱落细胞，放入专用标本瓶内的固定液体中。如宫颈表面有大量血液或分泌物附着，需用无菌大棉签轻柔拭去血液或分泌物后再使用取样器刷取脱落细胞，应用聚合酶链反应（PCR）检测方法对受检者予以多重HPV分型检测，包括HPV 16、HPV 18型等高风险亚型。所有患者均在入组时检测1次，6个月后复查1次。以6个月后复查仍有宫颈HR-HPV感染即诊断为持续HR-HPV感染。②阴道微生态检测：患者取膀胱截石体位，以无菌窥阴器充分暴露阴道和宫颈，无菌棉签于阴道侧壁的中上1/3交界处取阴道分泌物送检，以干化学酶法检查阴道微生态4项指标，包括pH值、白细胞酯酶、唾液酸甘酶、过氧化氢（H2O2）。

1.3 观察指标 ①比较两组患者疾病类型，包括细菌性阴道炎（阴道微生态Nugent评分[4]≥ 7分）、需氧菌性阴道炎[阴道分泌物加10%氢氧化钾（KOH）溶液后光镜下检查可见芽孢和菌丝]、外阴阴道假丝酵母菌病（显微镜湿片判断标准Donders评分[5]≥ 3分）、混合感染性阴道炎。②比较两组患者阴道微生态4项指标的阳性率，pH值＞4.5；唾液酸甘酶≥ 7 U/L、比色卡显示为红色或紫色；白细胞酯酶≥ 9 U/L、比色卡显示为绿色或蓝色；H2O2＜2 μmol/L或比色卡显示不显色或淡黄色，均视为阳性[6]。③将阴道炎性疾病类型与阴道微生态指标阳性率中差异有统计学意义的因素纳入多因素Logistic回归分析模型，筛选导致HR-HPV持续感染的危险因素。

1.4 统计学方法 采用SPSS 25.0统计软件分析数据，计数资料以[ 例(%)]表示，行χ2检验，危险因素筛选采用多因素Logistic回归分析。以P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疾病类型 研究组患者细菌性阴道炎、需氧菌性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病及混合感染性阴道炎的发生率均显著高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 两组患者疾病类型比较[ 例(%)]

2.2 阴道微生态指标阳性率 研究组患者白细胞酯酶阳性率、唾液酸甘酶阳性率及H2O2阳性率均显著高于对照组，微生态正常率显著低于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；两组患者pH值阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 两组患者阴道微生态指标阳性率比较[例(%)]

2.3 多因素Logistic回归分析 多因素Logistic回归分析显示，外阴阴道假丝酵母菌病、唾液酸甘酶阳性、H2O2阳性、pH值阳性均是导致HR-HPV持续感染的危险因素，差异均有统计学意义（OR= 3.564、3.133、3.766、1.921，均P＜0.05），见表3。

表3 导致HR-HPV持续感染的多因素Logistic回归分析

3 讨论

宫颈癌前病变和宫颈癌多由HR-HPV持续感染发展而来，且大部分女性一生中会感染不同类型的HR-HPV，其中多数为一过性感染，患者可借自身免疫系统对病毒进行自我消除并痊愈，仅有少数患者会发展为持续性感染而触发宫颈癌前病变甚至宫颈癌。

正常情况下，女性对致病菌的防御系统由外阴阴道正常解剖结构、阴道菌群、周期性内分泌变化及阴道宫颈局部免疫组成，是一个动态且相对平衡的体系。但在日常生活中，女性阴道微生态极易受到外界环境的刺激而改变，导致阴道内菌群分布失调，进而引起阴道微生态失衡。研究证实，女性阴道炎症与HR-HPV持续感染存在较高相关性，致使宫颈病变的发生风险增大，尤其是当女性由于其他因素导致抵抗力下降时，可能引发内源性感染而导致阴道菌群失调，此时微生态环境内本应处于优势地位的乳酸杆菌受到抑制，进而导致生殖道炎症和HR-HPV持续感染发生，并进而引发宫颈病变[7]。

本研究结果显示，外阴阴道假丝酵母菌病、唾液酸甘酶阳性、H2O2阳性、pH值阳性均是导致HR-HPV持续感染的危险因素。分析其原因为，细菌性阴道炎是女性生殖道主要感染类型，主要因阴道内菌群失调导致负责合成H2O2的乳杆菌数量大幅降低，加德纳菌和厌氧菌大量繁殖，从而引发的一种混合性内源性感染；唾液酸甘酶则是加德纳菌等致病菌群的有效标志物，其表达量大，活性强，能有效反映致病菌侵袭和繁殖程度，亦是临床诊断细菌性阴道炎的重要指标。乳酸杆菌减少，加德纳菌和厌氧菌异常繁殖，引起阴道局部微生态失衡，促使生殖道炎症性疾病发生，增加了HPV持续感染风险[8]。外阴阴道假丝酵母菌病是一种由致病菌假丝酵母菌引起的外阴疾病，当机体或局部免疫力下降时，假丝酵母菌会加速繁殖并变形为菌丝相，引起阴道分泌物增多、外阴瘙痒等；同时高速繁殖的假丝酵母菌能够合成大量侵袭性酶类，促进炎症反应的发生，进而增加阴道上皮组织的通透性，破坏正常的上皮细胞结构，增强机体对HR-HPV的易感性，同时降低清除率[9]。乳杆菌对于维持阴道正常菌群具有重要意义，其通过自身细胞成分的抗菌作用、释放抗菌物质、刺激宿主局部免疫反应来维持阴道微生态的平衡，乳杆菌产生的H2O2促使具有过氧化物酶活性的蛋白抑制剂与过氧化物结合，或是直接通过激发过氧化物作用而抑制另一种细菌的生长来维持阴道的酸性环境，若乳杆菌减少或活性降低，将导致阴道pH值异常升高，增加生殖道感染的概率[10]。

因此建议避免滥用抗生素和不合理阴道冲洗，合理应用乳杆菌活菌阴道制剂修复阴道微生态，积极和规范治疗细菌性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病，有助于降低HR-HPV持续感染，减少宫颈癌前病变和宫颈癌的发生。

综上，HR-HPV持续感染与阴道炎疾病和阴道微生态存在显著相关性，临床中应注意指导女性正确进行会阴清洁，注意控制微生态动态平衡，从根源上预防女性生殖道疾病，从而维持女性生殖健康。