蔊菜质量标准提升研究

肖丹，孔毅，刘星，李松，高源，周映佑

(1.贵州省食品检验检测院，贵州 贵阳 550004；2.贵州省食品药品检验所，贵州 贵阳 550004)

0 引言

本品为十字花科植物蔊菜Rorippa indica(L.)Hiern或无瓣蔊菜 Rorippa dubia(Pers.)Hara 的干燥全草。夏、秋二季花期采挖，除去杂质，干燥。本品亦为我省少数民族用药。蔊菜又名辣米菜(《纲目》)，野油菜(《分类草药性》)，塘葛菜(《岭南采药录》)，干油菜(《民间常用草药汇编》)，石豇豆(《贵阳民间药草》)，鸡肉菜、田葛菜(广州部队《常用中草药手册》)，江剪刀草、野雪里蕻、野芥草、野菜花(《上海常用中草药》)，山芥菜、独根菜、山萝卜、金丝荚(《福建中草药》)。《本草纲目拾遗》：《字林》云，蔊、辛菜，南人食之，去冷气。《纲目》中描述蔊菜，生南地，田园间小草也。冬月布地丛生，长二、三寸，柔梗细叶，二月开细花，黄色，结细角长一、二分，角内有细子。南人连根叶拔而食之，味极辛辣，呼为辣米菜。沙地生者尤伶仃。在贵州民间应用广泛，收载于2003版《中药材，民族药材质量标准》。目前蔊菜已被广泛作为蔬菜食用。关于蔊菜的药用研究较少有见文献记载。

目前蔊菜质量标准不完善，仅见收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003版)，标准滞后，难以保证药材的质量与临床用药的安全性，本研究的宗旨是为完善并提升该药材质量标准提供参考。为推进贵州省中药、民族药创新与大健康产业的发展，蔊菜作为民间广泛使用的药物，无疑具有很大的开发利用价值和市场潜力，对其进行质量标准的研究具有重要的现实意义。

1 仪器、试剂与样品

1.1 仪器

电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司 MS204S/01 MS105DU)、数显恒温水浴锅(金坛市江南仪器厂 HH-2)、回旋震荡器(上海一恒科学仪器有限公司 WSZ-200A)、纯水仪(倍捷科技有限公司 Mili-Q)、电热鼓风干燥箱。

(上海一恒科学仪器有限公司 DHG-9240A)、箱式电阻炉(马弗炉)(天津市泰斯特仪器有限公司 SX-4-10)、三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂 ZF-2)。

1.2 试剂及对照

盐酸(国药集团化学试剂有限公司 优级纯)；乙醇(天津市鑫铂特化工有限公司 分析纯)；石油醚(天津市富宇精细化工有限公司 分析纯)；甲醇(淮安科仪化玻有限公司 色谱纯)；乙酸乙酯(天津市科密欧化学试剂有限公司 优级纯)；甲酸(分析纯 成都金山化学试剂有限公司)；三氯化铝(天津市致远化学试剂有限公司 分析纯)；硅胶板(青岛海洋化工有限公司)；芦丁对照(中国食品药品检定研究院)。

1.3 样品收集

本实验共收集蔊菜样品3批，涉及贵州省贵阳市不同行政区域。样品来源见表1。

表1 蔊菜供试样品来源

2 试验方法与结果

2.1 性状

本实验蔊菜3个样品经贵州中医药大学吴之坤教授鉴定为十字花科植物蔊菜 Rorippa indica(L.)Hiern 或无瓣蔊菜 Rorippa dubia(Pers.)Hara 的干燥全草。

2.1.1 蔊菜性状

蔊菜全草长15～35cm。表面淡黄绿色至浅黄褐色。茎近基部分枝或单一，淡黄绿色，偶有带浅紫色，具有细纵沟。根弯曲，细长，主根直径约为0.2cm，具有不规则纵皱及须根痕，质地较脆且易折断，断面皮部为类白色，木部为淡黄色。叶片呈黄绿色，完整叶片展平后呈长椭圆形或宽披针形，呈头状羽裂，边缘有疏齿，叶多卷缩或破碎。总状花序顶生或侧生，黄色，花小。果呈长角细圆柱形，短而粗。气微，味淡。

无瓣蔊菜全草长10～30cm，表面淡绿色。茎直立或铺散状分枝。叶生于茎下部和基部，具长柄，两侧具狭翅，完整叶片展平后呈卵形，大头羽裂，先端裂片具钝锯齿缘。种子每室1行，数多，细小，种子褐色，近卵形。

图1 蔊菜生景照片及药材图片

2.2 鉴别

2.2.1 显微鉴别

参照2020年版《中国药典》第四部通则2001显微鉴别法的粉末制片方法，将蔊菜样品粉碎过四号筛，取少量粉末与干净的载玻片上，加水合氨醛1-2滴，置于酒精灯上微微加热透化，重复2-3次，冷却，滴加稀甘油1-2滴，盖上盖玻片，显微镜下观察蔊菜显微特征，结果见图2。原标准未对粉末鉴别项进行描述，本实验通过对不同产地焊材药材样品的粉末进行观察、测量，其显微鉴别特征总结如下：本品粉末呈棕灰色，表皮或下皮细胞呈棕色，排列紧密；主要为梯纹导管，网纹导管，排列比较紧密，导管直径为22～56μm；淀粉粒较多，常为类圆形、半圆形或圆多角形；复粒由2～6分粒组成；气孔主要为平轴式；纤维众多，散在，平直或微弯曲，无分叉，壁较厚，胞腔线性；非腺毛平直或先端弯曲常弯曲，壁厚，微具疣突。

图2 粉末显微图

2.2.2 薄层鉴别

原标准有薄层鉴别项，但以原标准的色谱条件进行实验，样品不能被分离，需重新进行色谱条件的选择。原标准以蔊菜素作为对照品进行薄层鉴别，但由于蔊菜素对照品市场上无法购买到，实验选择了取蔊菜对照药材进行薄层鉴别。取焊材药材细粉(过四号筛)10g，加入100mL水，煮沸15min，滤过，滤液浓缩至约3mL，加入无水乙醇7mL，滤过，滤液蒸干，加入氯仿1mL使残渣溶解，作为薄层鉴别供试品溶液。另取蔊菜对照药材，按照上述步骤进行提取，作为对照药材溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2020年版四部通则0502)进行试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿-甲醇-甲酸(1.5 mL：1 mL：0.4 mL：0.1 mL)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果见附图3，供试品色谱图与对照药材色谱图在相同的位置上显相同颜色的斑点。T1；3：药材T2；4：药材T3。

图3 不同产地显微图

2.3 检查

原标准无此项目，实验按《中国药典》2020版通则项下规定进行实验。

2.3.1 水分

按照2020年《中国药典》第四部通则0832水分测定法的第二法烘干法测定不同产地蔊菜样品水分含量。取不同产地蔊菜粉末(过四号筛)2g，平铺于预先105℃干燥至恒重的扁形称量瓶中，厚度不超过5mm，精密称定，开启瓶盖在105℃干燥5h，盖好瓶盖，移置干燥器中，放冷30min，精密称定，再在105℃温度干燥1h，重复上述操作，直至连续两次称重的差异不超过5mg为恒重。根据减失的重量，计算供试品中含水量(%)。3批蔊菜水分含量值为13.1%、10.8、13.0%，平均值为12.3%。

2.3.2 酸不溶性灰分

按照2020年《中国药典》第四部通则2302测定不同产地蔊菜样品酸不溶性灰分含量。总灰分：将坩埚置于550℃马弗炉中炽灼至恒重，准确至0.0lg称定蔊菜粉末(过40目)2g，置于马弗炉中缓缓炽热，温度逐渐升高至550℃，注意避免燃烧，完全灰化并至恒重，计算供试品中总灰分的含量(%)。酸不溶性灰分：直接在上述恒重好的灰分坩埚中小心加入稀盐酸15mL，坩埚用表面皿覆盖，并置于沸水浴上加热10分钟，用5mL热水分多次冲洗表面皿，洗液全部并入坩埚中，使用定量滤纸(灰分≤0.01%)滤过，残渣用水多次冲洗于滤纸上，直至洗液不显氯化物反应。滤渣连同滤纸同一移置于坩埚中，干燥，炽灼至恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量(%)。

各批蔊菜酸不溶性灰分分别为0.53%、0.52%、0.56%，平均含量分别为0.54%。

2.4 浸出物

原标准无此项目，对所有药材试样，分别考查水冷浸法、水热浸法和30%，50%，70%，100%浓度醇溶性浸出物，通过结果比较可知，热浸法的水溶性浸出物含量高于其他溶剂，故实验选择水热浸法。根据测定结果，检测值分别为36.96%、38.94%、40.59%，平均值38.83，暂定浸出物标准不得少于30.0%。

3 讨论

3.1 薄层鉴别

本实验考查了供试品制备方法、薄层色谱条件的展开系统和温湿度，建立了以芦丁为对照的薄层色谱方法。本方法简单、重现性好、薄层色谱斑点清晰，可对蔊菜药材进行快速、准确的定性鉴别，有助于猪鬃草标准的提高优化。

3.2 检查项

经测定3批蔊菜水分药材平均值为12.3%，建议蔊菜药材中水分不得过15.0%；测定蔊菜总灰分平均值为14.2%，经研究发现，草类样本由于采集时根茎泥沙较多，导致灰分数据不好控制，从而进一步针对酸不溶性灰分情况进行考察；蔊菜酸不溶性灰分平均值为0.54%，建议蔊菜酸不溶性灰分不得过3.0%。根据提取溶剂和提取条件的考查，确定了蔊菜的浸出物测定方法，测试蔊菜的浸出物含量，结果蔊菜药材水溶热浸出物平均值为38.83%，建议蔊菜水溶性热浸出物不得少于30.0%。

由于《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版中仅有鉴别项，未见检查项。本文建立的显微、薄层色谱鉴别方法和检查项限值建议，能更加系统地控制蔊菜药材的质量，为完善蔊菜药材质量标准提供了可靠的方法和依据参考文献。