老年痴呆患者血清微小miR-9和M-CSF及Hcy的变化及其意义

张颖奇，徐莹，刘琳

（沈阳积水潭医院神经内科，辽宁 沈阳 110027）

我国属于老年痴呆的高发国家，因此，引起了人们的广泛关注[1]。痴呆是因大脑病变所导致的临床综合征之一，患者临床特征主要表现为认知功能减退，如抽象思维、计算、推理、判断、理解、记忆，同时可能伴人格改变、行为紊乱、妄想、幻觉[2]。血管性痴呆、阿尔茨海默症则是临床中较为常见的老年痴呆类型。准确识别和有效预防老年痴呆，能有效延缓病程进展，显著改善患者预后。临床相关研究结果显示，老年痴呆的发生、发展，与血清微小RNA-9（miR-9）、巨噬细胞刺激集落因子（M-CSF）、同型半胱氨酸（Hcy）水平密切相关[3]。本研究旨在分析老年痴呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy的变化及其意义，旨在能为老年痴呆的防治提供指导，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取本院2019年2月至2020年4月收治的老年痴呆患者60例作为实验组，另选取同期本院收治的60例非老年痴呆患者作为对照组。实验组男33例，女27例；年龄62～81岁，平均（75.33±6.72）岁；伴高血压36例，伴糖尿病19例，伴冠心病6例，吸烟15例。对照组男35例，女25例；年龄61～83岁，平均（75.18±6.65）岁；伴高血压31例，伴糖尿病16例，伴冠心病4例，吸烟17例。两组临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。

纳入标准：患者及家属均知情同意并签署知情同意书；符合相关诊断标准[4]，MMSE评分为14～23分；年龄≥60岁。排除标准：精神疾病；过往存在颅脑手术、创伤病史；放化疗和颅内恶性肿瘤；脑出血、脑梗死、短暂性脑缺血发作；其他原因导致的痴呆。

1.2 方法 采集两组患者6 ml空腹静脉血，选取部分血液标本，13 000 r/min离心10 min，收集血清标本，通过miR-9试剂盒提取miRNA，利用反转录试剂盒反转录为cDNA，保存在-80℃的冰箱内。根据PCR仪器说明书开展相关的检测操作，选择CFX manager 3.0软件分析相对定量表达。选取部分血液标本2 500 r/min离心15 min，收集血清，选择酶联免疫吸附法检测血清M-CSF、Hcy水平；选择美国贝克曼AU680型全自动生化分析仪和上海东方顺宇生物科技有限公司的试剂，严格遵循试剂说明书开展相关的检测操作。

1.3 观察指标 比较两组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平检测结果与MMSE评分，分析两组MMSE评分与各项检测指标的相关性。

1.4 统计学方法 采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计量资料以“±s”表示，比较采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平检测结果与MMSE评分比较 实验组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明显高于对照组（P＜0.05），但MMSE评分明显低于对照组（P＜0.05），见表1。

表1 两组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平检测结果与MMSE评分比较（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

表1 两组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平检测结果与MMSE评分比较（±s）Table 1 Comparison of serum miR-9,M-CSF,Hcy levels and MMSE scores between the two groups(±s)

注：miR-9，Microrna-9；M-CSF，巨噬细胞刺激集落因子；Hcy，同型半胱氨酸；MMSE，简易精神状态量表

组别实验组对照组t值P值例数60 60 miR-9（2-△△ct）8.24±1.18 5.55±0.94 13.811 5＜0.05 M-CSF（pg/ml）632.77±151.75 457.08±94.15 7.620 4＜0.05 Hcy（μmol/L）20.54±3.03 14.24±2.82 11.789 5＜0.05 MMSE评分（分）16.86±2.02 25.79±2.17 23.331 9＜0.05

2.2 两组MMSE评分与各项检测指标的相关性分析 老年痴呆患者的MMSE评分与血清miR-9、M-CSF、Hcy水平呈负相关（P＜0.05），见表2。

表2 MMSE评分与各项检测指标的相关性Table 2 Correlation between MMSE score and various test indexes

3 讨论

老年痴呆属于一种认知功能障碍综合征，发生时患者意识并无异常；其病理学特征不仅包括老年斑、神经元丧失，而且还包括神经元纤维缠结、血管淀粉样病变等[5]。老年痴呆的发病原因复杂，相关临床研究结果显示，炎症反应、神经细胞骨架改变、神经传递障碍、遗传、年龄等因素与老年痴呆的发生、发展密切相关[6]。老年痴呆的发病具有隐匿性，发病初期易被忽视，当患者认知功能障碍症状明显时，表示其病情已较危重，常规干预手段效果不佳。因此，准确和及早识别老年痴呆，同时进行有效的干预，能有效控制病程进展。选择合适的生物学标志物早期诊断老年痴呆已成为现阶段的研究热点[7]。

血清微小RNA-9（miR-9）含量比较稳定，可将其作为诊断多种疾病的标志物。miR-9能调控多种基因表达，如突触孔蛋白、神经突触小泡磷酸酶1等，进而影响神经递质功能、神经元活性；除此之外，miR-9还能在一定程度上调节和控制糖皮质激素感触因子基因表达，阻碍神经元的相互运输[8-9]。M-CSF是由星形胶质细胞与小胶质细胞合成的，通过与神经胶质细胞增生同族受体有效结合激活趋化因子，不仅能明显增强小胶质细胞清道夫受体表达，而且还能明显增强脂蛋白E受体，促进细胞增殖，损伤神经胶质细胞[10]。Hcy为甲硫氨酸代谢脱去甲基的衍生物之一，不但能促进氧自由基的生产，而且还能促进钙离子超载，出现神经毒性；此外，Hcy还能增强神经元对毒性淀粉样β蛋白的敏感性。当Hcy处于较高水平时，则会在一定程度上损伤血管内皮功能，在一定程度上影响脂质代谢，脑内小动脉发生粥样硬化，脑血管发生缺血性损伤，认知功能出现障碍[11]。本研究结果显示，实验组血清miR-9、M-CSF、Hcy水平均明显高于对照组（P＜0.05），表明，老年痴呆患者的血清miR-9、MCSF、Hcy水平明显升高。另外，实验组MMSE评分则明显低于对照组（P＜0.05），老年痴呆患者的MMSE评分与血清miR-9、M-CSF、Hcy水平表现为负相关（P＜0.05）。本研究结果显示，老年痴呆患者的MMSE评分与血清miR-9、M-CSF、Hcy水平存在显著相关性，血清miR-9、M-CSF、Hcy水平越高，认知功能损害则越严重。相关临床研究[12-13]发现，在早期诊断老年痴呆患者时，单独检测血清miR-9、MCSF、Hcy的诊断灵敏度、特异度分别为86.17%和78.02%、84.53%和74.09%、66.00%和75.86%；而联合检测的诊断灵敏度、特异度则为96.91%、92.28%；表明，联合检测血清miR-9、M-CSF、Hcy水平能明显提高诊断灵敏度、特异度。

综上所述，老年痴呆患者血清miR-9、M-CSF、Hcy水平显著增加，且与认知功能损害密切相关，通过联合检测血清miR-9、M-CSF、Hcy水平，能为辅助诊断老年痴呆提供一定依据。