粒细胞集落刺激因子治疗复发性流产的临床研究

倪素娜 刘静 李丽雅 沈丽娟 王伟

流产是临床常见与妊娠相关的疾病，其诱发因素较多，免疫、内分泌、凝血功能异常，生殖系统畸形、染色体异常等因素均可诱发流产发生[1，2]。据统计，一生中有流产史的女性约为25%，经历≥2次的女性为1%～5%[3]。而同性伴连续两次及以上的自然流产即称之为复发性流产(RSA)。胚胎成功着床是妊娠成功的关键环节，在排除临床可查明原因的后，仍有部分患者无法成功受孕，有学者对这部分患者进行研究，认为此类患者受孕失败与机体免疫功能异常有密切关系[4，5]。研究表明，妊娠期特殊的免疫系统功能紊乱与 RSA 具有显著的相关性[6]。母胎界面免疫系统平衡是胚胎成功着床及发育的重要条件，Th1、Th2 细胞在机体免疫排斥、耐受中起重要作用；Th1/Th2 平衡模型中Th1型免疫应答过度增殖即会引发着床失败，反之则可维持妊娠[7]。有研究报道，粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor，G-CSF)可用于RSA的治疗[8，9]。本研究观察G-CSF治疗RSA的机制及临床效果，结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 对2018年2月至2020年5月于我院就诊的并接受保胎治疗的 120例RSA 患者资料进行回顾分析，患者年龄22～38岁，孕2～4次。2组患者一般临床资料差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1 2组患者一般资料比较

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：①与同性伴侣连续发生≥2次自然流产史；②生殖道结构及夫妻染色体正常；③配偶精液无异常；④凝血功能、黄体功能、卵巢功能正常；⑤超声检查结果显示为孕早期宫内妊娠；⑥入院时孕周<6周；⑦近期未接受特殊免疫治疗。

1.2.2 排除标准：①经检查确诊为子宫解剖结构异常；②生殖道疾病；③内分泌异常；④自身免疫抗体及凝血功能异常；⑤外伤流产或感染所致流产；⑥使用辅助生殖技术；⑦药物过敏及中途中断治疗；⑧病史资料提供不全及失访患者。

1.3 方法 患者依据是否接受G-CSF治疗分为G-CSF 组80例及对照组40例。2组患者均给常规保胎治疗，方案：黄体酮注射液(天津金耀药业有限公司，规格：20 mg/ml)肌内注射，20 mg/次，每周3次；叶酸(北京斯利安药业有限公司，规格:0.4 mg/片)口服，1次/d，1片/次；维生素E胶丸(浙江医药股份有限公司新昌制药厂，规格：10 mg/粒)口服，1粒/次，3次/d。G-CSF 组患者常规保胎治疗的基础上给予重组人 G-CSF(齐鲁制药有限公司， 规格：9×106U/支)1.5 U·μg-1·kg-1隔日皮下注射。

1.4 观察指标 采集2组治疗前及妊娠10周时晨起空腹静脉血，分离血清使用免疫双抗体夹心检法检测检测血清Th1/Th2 细胞因子浓度[白介素-2(Interleukin-2，IL-2)、白介素-4(Interleukin-4，IL-4)、白介素-6(Interleukin-6，IL-6)、白介素-10(Interleukin-10，IL-10)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、γ-干扰素(interferon-γ，INF-γ)]；使用GE Voluson TM E8 彩色多普勒超声诊断仪，测量子宫动脉的血流收缩期、舒张末期峰值流速，计算收缩期峰值/舒张末期流速(S/D) 比值，并比较2组患者妊娠结局。

2 结果

2.1 2组患者外周血Th1/Th2 细胞因子浓度比较 2组患者治疗前外周血Th1/Th2 各型细胞因子浓度差异无统计学意义(P>0.05)，G-CSF 组孕10周时外周血 IL-4、IL-6及 IL-10浓度较治疗前明显上升(P<0.05)，并高于对照组(P<0.05)；对照组治疗前后外周血Th1/Th2 各型细胞因子浓度差异无统计学意义(P>0.05)。见表2、3。

表2 2组患者Th1/Th2 细胞因子水平比较

表3 2组患者Th1/Th2 细胞因子水平比较

2.2 2组治疗前后子宫动脉S/D比值比较 2组治疗前左侧、右侧及双侧子宫动脉血流收缩期、舒张末期峰值流速计算的S/D比值差异无统计学意义(P>0.05)，G-CSF 组孕10周时S/D比值较治疗前明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)；对照组治疗前后左侧、右侧及双侧子宫动脉血流收缩期舒张末期峰值流连计算所得S/D比值差异无统计学意义(P>0.05)；G-CSF 组孕10周时左侧、右侧及双侧子宫动脉计算所得S/D比值均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 2组治疗前后子宫动脉S/D比值比较

2.3 2组患者妊娠结局比较 G-CSF组患者发生再次流产16例，发生率为20.0%；对照组患者发生再次流产15例，发生率为37.5%；G-CSF组发生再次流产率低于对照组，差异有统计学意义(χ2=4.2624；P=0.0390)。见表5。

表5 2组患者妊娠结局比较 例(%)

3 讨论

RSA是指同性伴的情景下，育龄女性妊娠20周内连续发生自然流产2次及以上，其发病率约占育龄女性的1%[7]。据统计，育龄期女性中RSA发生率为1%～5%，但 RSA 患者再次妊娠的流产率可高达70%～80%，已成为妇产科临床亟待解决的疑难问题[10，11]。RSA病因复杂，与多种因素关，其中以凝血因素与免疫因素最受临床重视[12]。有研究表明，孕期 Th1/Th2 平衡模型可解释母胎免疫反应，Th2 细胞优势表达对维持妊娠进展具有重要作用；相反，Th1 型细胞过度增殖则会导致着床失败，发生自然流产[13-17]。

综上所述，G-CSF可增加 RSA 患者外周血Th2 型细胞因子，降低子宫动脉阻力，提高RSA 患者妊娠率，值得临床推广应用。