余杭地区人乳头瘤病毒感染情况及风险因素调查

徐建成，沈 毅

(1.浙江大学 公共卫生学院，浙江 杭州 310058；2.杭州华硕医学检验实验室有限公司，浙江 杭州 311106)

人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)作为常见的DNA双链病毒，包含一百多类亚型，且多种亚型均可特异性地感染机体皮肤或者黏膜鳞状上皮细胞，可直接引发宫颈上皮等位置出现良恶性病变。宫颈癌作为源自宫颈位置的恶性肿瘤，是妇科常见疾病，其患病率约占妇科恶性肿瘤的第二位，受到医疗界重点关注[1-2]。临床指出[3]，HPV持续性感染是引发宫颈癌的主要因素，而大部分患者的HPV均属于一过性感染，仅少数可发展成维持性，且容易进展成宫颈癌。近年来，我国宫颈癌的患病率日渐升高，成为危害女性机体健康与生存质量的主要疾病之一[4]。临床虽然已有报道证实宫颈癌的发生与发展均与HPV感染存在密切关联[5]，但其在本地感染情况尚无相关报道。本研究调查了解余杭地区女性的HPV感染情况，并分析其风险因素，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 资料来源 选择杭州市余杭地区2019年9月—11月进行HPV检测的334 500名女性作为观察对象，所有观察对象或家属均自愿参与本次调查，均为余杭地区常住人口，且存在性生活史，中途未有退出者；排除月经期、妊娠期或者哺乳期女性，排除存在宫颈手术、放化疗史、HPV感染治疗史或者激素治疗史及合并自身免疫性疾病、肿瘤疾病、精神方面疾病、免疫抑制状态或严重心脑血管疾病者[6]。

1.2 检测方法 所有观察对象均接受薄层液基细胞检查、HPV反向点杂交法检测。收集观察对象宫颈脱落细胞，并要求其在收集前24 h之内无性生活，72 h之内阴道未接受冲洗或者上药。选择专用宫颈毛刷在观察对象的宫颈外口进行标本收集，随后将其置于专用的细胞保存液的采集管，放在4℃冰箱内待检。将标本转移至微量离心管内，以13 000 r/min速度进行离心10 min，去除上层清液，滴入细胞裂解液50 uL，悬浮沉淀，在100℃条件下加热10 min，以13 000 r/s速度离心，10 min后，保存上层清液。

HPV基因扩增与反向点杂交依据试剂盒说明书要求进行操作，利用PCR扩增HPV衣壳蛋白基因，并实施基因分型，PCR反应条件设置成50℃15 min，95℃变性10 min，94℃30 s，42℃90 s，72℃30 s，重复40次，72℃5 min，随后妥善固定PCR产物，对各类HPV分型探针的硝酸纤维素膜条实施变性与液相杂交，同时给予洗涤、显色，依照杂交点的分型探针类别来评估HPV感染，并明确其基因亚型。

1.3 观察指标 收集检测对象的一般资料，包括年龄、居住地、文化程度、体质量、孕次、产次、流产史、性伴侣个数、首次性生活年龄、避孕方式、饮酒史、吸烟史；记录所有女性的HPV检测结果，分析不同HPV亚型感染情况，比较不同年龄女性的HPV检测结果。

2 结果

2.1 HPV检测结果及HPV亚型感染情况 本次进行HPV检测的334 500名女性中，HPV阴性者330 733例，占比98.87%；阳性者3 767例，占比1.13%。观察3 767例HPV阳性者的亚型感染情况分布，HPV52的阳性数较多，共581例(15.42%)，明显高于其他亚型，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 HPV亚型感染情况分布(n=3 767)Table 1 Distribution of HPV subtype infection (n=3 767)

表1(续)

2.2 检测对象一般资料 HPV检测的334 500名女性中25岁及以下16 575例，26～55岁282 585例，55岁以上34 025例，年龄不详1 315例；文化程度：初中及以下102 524例，高中114 892例，大专及以上117 084例；体质量51～67 kg，平均(60.23±1.24)kg。比较HPV阳性者与阴性者的一般资料，结果显示2者在孕次、饮酒上差异无统计学意义(P>0.05)，但在居住地、产次、流产史、性伴侣个数、首次性生活年龄、吸烟、避孕方式上差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 HPV阳性者与阴性者的一般资料比较(n=334 500，例)Table 2 Comparison of general data between HPV positive and HPV negative patients (n = 334 500，cases)

2.3 不同年龄的HPV感染情况 55岁以上女性的HPV 阳性率(1.99%)高于25岁及以下(1.65%)、26～55岁(0.99%)和年龄不详者(0.84%)，差异均有统计学意义(P<0.05)。

2.4 HPV感染的风险因素分析 将表2中有统计学差异的变量带入Logistic回归方程计算，发现居住地、产次、流产史、性伴侣个数、首次性生活年龄、吸烟、避孕方式是HPV感染的风险因素(P<0.05)。见表3。

表3 HPV感染的风险因素分析Table 3 Analysis of risk factors of HPV infection

3 讨论

宫颈癌在女性生殖系统肿瘤中的患病率仅次于乳腺癌，而HPV感染在宫颈癌、宫颈上皮内瘤变的发生与发展中具有重要意义，因此尽早掌握HPV感染因素成为关键[7]。相关数据显示[8]，宫颈癌患者中高危型HPV阳性率高达100%，而高级别宫颈上皮内瘤变中HPV的阳性率也达到97%左右，进而证实早期诊断HPV感染在宫颈癌的预防中十分必要。

HPV主要感染机体的上皮组织，并存在较高的宿主特异性，尤其是对特异位置上皮细胞的亲和力极强[9-11]。由于宫颈癌的癌前病变通常来源于宫颈移行带，且多发生在鳞状上皮相交位置的鳞状化生期间，另外生殖道致病性HPV可感染宫颈的移行带上皮[12]。故HPV已成为临床公认的致瘤性病毒之一。HPV基因型种类较多，且多种基因序列已经完全测序。HPV 6、11等均属于低危型HPV，容易引发上皮细胞疣样病变；而HPV 16、18、52、58等均属于高危型HPV，长时间反复感染可造成宫颈癌[13-15]。本文结果显示，检测女性中HPV阳性者占比1.13%，以HPV52的阳性数最多(15.42%)，证实余杭地区HPV 52的感染率较高，应受到重点关注，及时制定有效措施，控制疾病传播。有研究显示[16]，HPV 16、18、52、58属于感染概率较高的亚型，也成为宫颈癌中常见的亚型。大部分女性受到HPV感染后，可在两年之内自行清除，仅少数可出现持续性感染[17]。与低危型相较而言，高危型HPV亚型的感染能力更为显著，与本文结果较为相似，本次调查的阳性者中以HPV52的阳性数较多，应受到临床重点关注。

有研究表明，HPV感染途径以性接触传播为主，其中性活跃女性的HPV感染风险较高。随后临床发现高危型HPV感染率呈现年龄分布特点，通常在15～24岁女性中，HPV感染出现第一个高峰；第二个高峰则是35～54岁，但低危型HPV感染并不存在显著的年龄差异。从本文中看到，25岁及以下、55岁以上女性的HPV 阳性率较高。分析认为可能是因为年轻女性性行为较早，或者存在多个性伴侣，对性知识了解甚少等因素有关；而55岁以上女性的HPV阳性率较高的原因是老年女性的抵抗能力明显衰退，从而使其出现持续性HPV感染[18-19]。

本研究结果还显示：HPV阳性者与阴性者在居住地、产次、流产史、性伴侣个数、首次性生活年龄、吸烟、避孕方式上差异有统计学意义，且上述因素均是HPV感染的风险因素。分析原因可能为：①农村地区医疗、经济较为落后，且文化程度普遍较低，导致女性对HPV感染的相关知识了解较少，因此其阳性风险较高。②疾病传播的途径为性传播，性生活开始年龄越早，感染HPV的概率越高。③性行为活跃的女性，往往有多个性伴侣，性伴侣感染HPV后可造成女性反复或者持续性感染。④存在流产史的女性，其宫颈可能完全显露，且宫颈细胞化生，牵连宫颈黏膜受损，增加宫颈病变的概率，同时流产可能造成机体雌激素与孕激素水平发生变化，减低免疫能力，提升HPV感染的风险。⑤口服避孕药中通常包含雌激素，可对宫颈上皮进行刺激，导致异常增生。而避孕套能够成为屏障，有效切断HPV的感染。⑥烟草代谢中存在大量尼古丁、亚硝胺等，可直接损坏宫颈黏膜上的免疫细胞介导网络，并促进DNA受损，增快宫颈移行带细胞分裂以及增生速度，直接降低女性宫颈柱状上皮的免疫能力，从而增加HPV感染的概率。

综上所述，余杭地区HPV阳性检出率为1.13%，且风险因素较多，应重点关注25岁及以下、55岁以上女性的筛查管理，同时加强对HPV感染相关知识的宣传力度，从而有效降低HPV感染率与宫颈癌的患病率，为女性机体健康提供保障。