吴西,袁铭铭,熊晓丽,钟国豪
1.江西省药品检验检测研究院,国家药品监督管理局中成药质量评价重点实验室,江西省药品与医疗器械质量工程技术研究中心,江西 南昌 330029;2.江西省药品检查员中心,江西 南昌 330001
草乌为毛茛科植物北乌头(Aconitum kusnezoffiiReichb.)的干燥块根。秋季茎叶枯萎时采挖,除去须根和泥沙,干燥。草乌味苦、性热,有大毒,具有祛风除湿,温经止痛的功能,用于风寒湿痹,心腹冷痛,麻醉止痛等[1],是临床常用名贵中药和蒙药材。现代药理研究表明,其生物碱类成分中的二萜生物碱是发挥治疗功效的关键成分[2]。
迄今为止的化学研究结果表明,草乌的化学成分主要为生物碱类,其他还包括黄酮类、糖苷类、挥发油类等。不同炮制方法,其化学成分也会有一定的差别[3]。
草乌中含有大量生物碱,且种类较多,主要为二萜类生物碱。包括新乌头碱(A1)、乌头碱(A2)、次乌头碱(A3)、北草乌碱(A4)、去氧乌头碱(A5)、苯甲酰新乌头原碱(A6)、苯甲酰乌头原碱(A7)、10-羟基乌头碱(A8)、焦新乌头原碱(A9)、苯甲酰次乌头原碱(A10)、焦乌头原碱(A11)、尼奥宁(A12)、焦次乌头原碱(A13)、焦去氧乌头原碱(A14)、15-α-羟基尼奥宁(A15)、新乌头原碱(A16)、乌头原碱(A17)、次乌头原碱(A18)、查斯曼宁(A19)、塔拉地萨敏(A20)、弗斯生(A21)、牛扁碱(A22)、别那宁(A23)、氨茴酰牛扁碱(A24)、海替生重排产物(A25)、denudatine(A26)、北乌碱A(A27)、北乌碱B(A28)、北乌定(A29)、8-乙氧基-14苯甲酰基-15-甲氧基乌头原碱(A30)、acsonine(A31)、14 苯甲酰基-15-甲氧基-16-氧化乌头原碱(A32)、3-乙酰乌头碱(A33)、3-乙酰乌头新碱(A34)、3-乙酰-10-OH 乌头碱(A35)、10-OH-中乌头碱(A36)、8-乙氧基-14 苯甲酰基-新乌头碱(A37)、Beiwucine(A38)、准格尔乌头碱(A39)、准格尔乌头胺(A40)、塔拉乌头胺(A41)、多根乌头碱(A42)、3-脱氧乌头碱(A43)、异塔拉乌头定(A44)、荷克布星A(A45)、8-甲氧基-14-苯甲酰-beiwutinine(A46)等[3-15]。
赵英永等[16]采用水蒸气蒸馏提取草乌中挥发性成分,并采用气相色谱—质谱(GC-MS)联用方法进行研究鉴定了14 个化合物,占挥发油总量的97.62%,包括环丙烷甲醇(B1)、N-甲基高藜芦胺(B2)、N,N-二甲基苄胺(B3)、4-氨基联苯(B4)、邻苯二甲酸二丁酯(B5)、1,5-二甲基己胺(B6)、棕榈酸甲酯(B7)、O-邻(丁氧羰基)苯甲酰羟基乙酸乙酯(B8)、棕榈酸(B9)、十三烷酸乙酯(B10)、亚油酸甲酯(B11)、7-乙烯基十六内酯(B12)、十一烯酸(B13)、(顺、顺,顺)-9,12,15-十八烷三烯-1-醇(B14)等。其中,棕榈酸和O-邻(丁氧羰基)苯甲酰羟基乙酸乙酯的含量最高,相对含量分别为34.04 和22.22。
草乌中还含有多糖类[鼠李糖、甘露糖、葡萄糖、木糖、阿拉伯糖、半乳糖、α-(1 →3),(1 →4)-D-葡萄糖等],重金属(铅、镉、砷、汞等)等成分[17-19]。
早在1958 年,张覃沐等[20]就研究发现,当对小白鼠注射乌头碱的剂量达到0.05 mg/kg 时就会出现镇痛作用,且随着剂量的增加,镇痛作用也随着增强。
另有动物实验表明[21],乌头碱和次乌头碱能够减轻疼痛并减少足肿胀大鼠模型的抽搐次数,其镇痛机制与中枢神经细胞膜Na+通道开放密切相关。乌头碱、新乌头碱等可作为Na+通道的激活剂,对 Na+通道结合位点有较好的结合,致使其去极化而阻滞疼痛传导[22]。
程薇等[23]研究发现用10%蛋清液对大鼠足跖皮下注射,制造急性炎症模型,利用低频电磁复合脉冲刺激、促透剂联合促进草乌提取物的透皮吸收,实验结果表明足跖容积和足跖肿胀度与模型组比较有显著下降,对蛋清溶液所致的急性炎症有明显的抑制作用。且支美汝等[24]研究发现无论是生草乌还是诃子制草乌均能抑制炎症因子一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、细胞介素6(IL-6)的释放,进一步明确了草乌的抗炎机制。
2009 年,刘太华等[25]研究发现乌头碱、新乌头碱对巨噬细胞活性有抑制作用,且浓度越大,抑制巨噬细胞分泌 TNF-α 的作用越强。其中20 mg/100 mL 的乌头碱和新乌头碱对巨噬细胞表达 CD91 和CD13 的抑制作用最强。邹帆等[26]研究发现乌头碱能够诱导骨肉瘤143B 发生caspase 依赖的凋亡,且随着浓度的增加,抑制效果加强。进一步证明了乌头碱具有显著的抗肿瘤作用,临床中常被用于缓解晚期癌症患者的疼痛,以改善晚期癌症患者的生存质量。
乌头碱对心功能不全大鼠离体心脏具有一定正性肌力作用,且乌头碱在激动钾通道的情况下,与单纯使用乌头碱相比,随着有效浓度范围增大,强心效果明显增强[27]。温善姗等[28]通过观察乌头碱对H2O2构建的心衰细胞模型的强心作用的量-时-效关系发现乌头碱对心衰模型有明显强心作用,并推测出50 μmol/L 的乌头碱,0.5 h 时效果最强。
此外,草乌除具有上述描写的药理作用以外,还具有免疫、抗氧化、抗衰老等功能[29],且对神经系统、心血管系统、生殖系统[30]等有一定的影响。
草乌是中医临床常用药材之一,尤其在具有舒筋活络等功能主治的方剂中比较常见。现代研究已发现多种活性成分,且药理作用较强,具有广阔的发展空间。草乌的毒性较大,一般需经过加工炮制后应用,且临床禁忌较多,应用较为慎重。因此,在不改变药理活性的情况下降低毒性就显得尤为重要。近年来也有较多的学者对草乌的炮制减毒进行了深入的研究,例如诃子可显著抑制生草乌的心肌细胞毒性,尤其是中剂量(4~6 mg/mL)使用时,其诃子炮制品比生草乌的安全性更高、更持久[24]。在今后的研究中,为了更好地应用本药材,达到更好地临床疗效,还需要对其减毒机制、化学成分有更深入的研究,确定更多的活性成分,明确其药理作用,建立统一、严格的质量标准。