软枣猕猴桃组织培养育苗技术

王禹

（黑龙江省农科院园艺分院 黑龙江，哈尔滨 150069）

软枣猕猴桃(Actinidia arguta)，别名软枣子、藤瓜、藤枣、猕猴梨，属于猕猴桃科猕猴桃属，为多年生藤本落叶植物，分布在我国的华北、东北、西北及长江流域，主要分布在东北南部长白山脉一带山区。软枣猕猴桃具有较高的营养及经济价值，其果实可鲜食，除富含多种维生素、微量元素、氨基酸及果胶外，还富含猕猴桃碱，具有生津润肺、止血等功效；其根及根皮对消化道癌症具有一定的抑制和治疗作用。

黑龙江省软枣猕猴桃野生资源较为丰富，人工驯化栽培始于20 世纪90 年代，目前栽植的品种也以野生驯化的品种为主。目前软枣猕猴桃种苗繁殖方式主要采用种子及扦插，但受季节、母株数量及质量等因素限制，出现繁殖周期长、苗木生长势参差不齐、繁殖系数较低等问题，减慢了优异资源的驯化及推广工作。因此，应探索高效的软枣猕猴种苗繁殖方法。本文从材料选择、组培苗育苗、组培苗驯化及管理等方面阐述利用组织培养技术繁育软枣猕猴桃种苗，以期应用此技术提高软枣猕猴优良品种种苗的繁殖速度。

1 材料选择

选择无病虫害、生长健壮、芽体饱满茎粗不超过0.5 cm的嫩枝或半木质化的枝条，田间采集时间为6月末-8月初。

2 组织培养准备工作

2.1 培养基的制备

所有培养基均采用MS+植物激素+7g/L琼脂+30g/L白糖，PH 5.4-6.0，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌20 min。

2.2 工具准备

无菌水、滤纸及工具，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌30 min。

2.3 材料消毒

将采集的枝条剪成带一个芽1 cm 长的茎段，用洗洁精清洗干净，流水状态下冲洗1 h，置于超净工作台中无菌水冲洗3次。

嫩枝茎段消毒：酒精30 s，无菌水冲洗3 次，每次1 min以上；Hgcl2消毒5 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。

半木质化茎段消毒：酒精1 min，无菌水冲洗3 次，每次 1 min 以上；Hgcl2消毒 7 min，无菌水冲洗 3 次，每次 1 min以上。

3 组培苗培养

3.1 生长培养

将消毒好的茎段底部黑色部分切去，接种到MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA 生长培养基上，10 d 后腋芽陆续萌发。

3.2 不定芽增殖培养

将萌发的腋芽从茎段上切下，转接到增殖培养基上，增殖培养基为MS+2 mg/L 6-BA+5 mg/L ZT，继续增殖时可将组培苗切成带1 个芽的茎段，每30 d 转接一次，增殖系数可达8-10。

增殖培养可连续进行5 次，然后进行复壮培养，复壮培养基采用MS不添加激素。

3.3 组培苗生根

将组培苗切成1 cm 长带1-2 个芽的茎段，接种到1/2MS+0.1 mg/L IBA进行生根培养。

3.4 培养条件

白天培养温度23 ℃±2 ℃，光照时间14 h/d，光照强度为2500lux-3000lux，相对空气湿度40%-60%。

4 组培苗驯化

4.1 炼苗

组培苗接种到生根培养基后，将其放置驯化室进行生根培养。白天温度不高于30 ℃，夜间不低于18 ℃；相对空气湿度不高于40%。生长至根系0.5-1 cm长、株高3 cm以下时，进行驯化。驯化前3 d，把瓶盖打开。

4.2 移栽

栽基质采用草炭土，拌入10%苯丁哒螨灵乳油的1000 倍液，高温塑料布覆盖10d。采用72 穴，5 cm 深的穴盘，使用前穴盘先喷洒0.1%的高锰酸钾溶液，放置1 d。栽前将穴盘浇透水，组培苗洗净根部培养基，用镊子在穴盘上上打孔，根系垂直栽入，轻覆土，浇透水。

4.3 驯化管理

缓苗前保持土壤湿润，遮光率20%；相对空气湿度不高于40%；环境温度白天不高于30 ℃，夜晚不低于18 ℃，30 d后成活率可达93%以上。

移栽后通风预防病虫害，预防红蜘蛛可选用10%苯丁哒螨灵乳油或5.7%甲维盐乳油等；病害害可采用多菌灵等。